抗體對于科學研究，診斷學和治療學來說是非常有價值的。這些簡單而強大的科學工具已進入多個領域和應用程序。一抗特異性結合目標蛋白（抗原）。識別一抗的帶標記二抗為檢測提供信號。多個多克隆二抗可與每個一抗結合，與直接標記的一抗相比，可提供信號放大的作用。   

由于二抗所具備的優(yōu)點使得其在免疫學實驗中得以應用廣泛，如ELISA、化學發(fā)光（以標記了酶的抗體或抗原為標記來檢測特異性的蛋白質），免疫組織化學（檢測組織中的特異性抗原），免疫細胞化學（檢測細胞的抗原組成），流式細胞術（通過檢測激光所激發(fā)熒光來鑒定分離不同類型的細胞）等。   

二抗是體外診斷試劑開發(fā)和生產(chǎn)過程中的重要原料之一，合理、靈活地選擇和使用二抗有助于節(jié)約產(chǎn)品研發(fā)周期、提高產(chǎn)品靈敏度。  

什么是二抗？二抗是識別來自不同物種的抗體（或抗體結構域）的抗體。在許多不同的實驗方案中，二抗用于結合一抗（對目標蛋白（抗原）具有特異性）。結合的二抗（標記有報告分子，如酶或熒光團）可用于顯現(xiàn)抗原。未偶聯(lián)的二抗也有許多應用，例如，包被ELISA板或beads以捕獲或純化一抗。  

A：直接免疫組織化學（IHC），直接標記的一抗與目標蛋白（抗原）特異性結合； B：間接IHC，多個標記的二抗結合至每個一抗，放大信號； C：通過使用生物素化的二抗，然后結合偶聯(lián)的鏈霉親和素，可以實現(xiàn)進一步的信號放大。  

為什么要使用二抗？

與直接方法相比，使用二抗的間接方法具有許多優(yōu)勢。

1.固有信號增強——多個二抗結合到一個抗原結合的一抗上，將額外的報告分子帶入抗原-抗體復合物（上圖B）。加入生物素化的二抗，然后結合鏈霉親和素，可進一步增強信號（上圖C）。

2.擴展的偶聯(lián)物的選擇——一抗通常偶聯(lián)于有限范圍的報告分子（或僅提供未偶聯(lián)的一抗）。二抗擴展了許多不同探針的使用，增加了試驗設計的靈活性，包括多種標記方案。

3.防止對抗體結合部位的干擾——一抗的抗原結合位點（paratope）可能由于偶聯(lián)到了報告分子而受損，從而降低其結合目標蛋白的能力。使用偶聯(lián)標記的多克隆二抗產(chǎn)生信號可以保留一抗的活性。

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