基因克隆技術

發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時間：2021-07-07

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基因克隆技術是分子生物學的核心技術，分子克隆指的是在體外將核酸分子插入病毒、質(zhì)?；蚱渌d體分子，構成遺傳物質(zhì)的新組合，使之進入宿主細胞內(nèi)并獲得持續(xù)穩(wěn)定增殖能力和表達?；蚩寺〖夹g的發(fā)展經(jīng)歷3個階段：

第一階段為經(jīng)典的T4 DNA連接酶介導的TA克隆及粘性末端克??；

第二階段為基于DNA修飾酶的LIC系列克隆；

第三階段為基于DNA重組酶的Gateway克隆及一步法克隆。

1、即用型表達克隆，構建表達載體所用的酶以及中間載體

提供140,000個預制即用型Nextday-ORF 克隆。無需再等上數(shù)日/數(shù)周即可馬上進行基因表達或蛋白表達實驗。每一個Nextday-ORF?克隆均經(jīng)過序列驗證，次日寄送，且多種病毒、非病毒類載體可選。

詳情查看：1、一步到位or從頭開始，GeneCopoeia基因克隆滿足你所有想象

2、轉(zhuǎn)染試劑

細胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA，RNA等導入細胞內(nèi)的一種技術。根據(jù)哺乳動物細胞蛋白表達流程，細胞培養(yǎng)完成后需進行細胞轉(zhuǎn)染，根據(jù)不同的實驗目的可選擇不同的轉(zhuǎn)染方法。目前，常用的細胞轉(zhuǎn)染方法主要分為三類途徑：物理介導（電穿孔法，基因槍法、顯微注射法）、化學介導（脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、磷酸鈣共沉淀法、陽離子聚合物介導法）、生物介導（病毒介導轉(zhuǎn)染、原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染）。

詳情查看：1、GeneCopoeia轉(zhuǎn)染試劑，攻堅克難：快、準、狠

3、構建表達載體

Gateway克隆技術作為一種可以快速、高效將DNA序列轉(zhuǎn)移到載體上的克隆方法，Gateway技術依賴于下面描述的兩個反應：BP反應和LR反應，通過BP反應獲得入門克隆(有時候我們也說中間克隆)，再通過LR反應將目的DNA以正確的方向連接到各種目的載體上，形成不同的表達載體。向大家介紹BP反應-構建入門載體和LR反應-構建表達載體：

詳情查看：1、Gateway克隆技術高深莫測?

4、熒光素酶

熒光素酶（luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的總稱。熒光素和熒光素酶這一生物發(fā)光體系，可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達，是檢測轉(zhuǎn)錄因子與目的基因啟動子區(qū)DNA相互作用的一種檢測方法。

其中要介紹有：1、螢火蟲熒光素酶（Firefly luciferase）；2、海腎熒光素酶（Renilla luciferase）；3、Gaussia 分泌型熒光素酶；4、分泌型堿性磷酸酶（secreted alkaline phos-phatase，SEAP）

詳情查看：1、神奇的熒光素酶（一），知否知否

詳情查看：2、神奇的分泌型熒光素酶（二），知否知否

產(chǎn)品推介：

1、構建表達載體所用的酶以及中間載體

貨號	載體名稱	規(guī)格	描述
RCBM-1001-020	EZRecombinase LR Mix	20次反應	催化attL x attR重組反應，高效率酶，與Gateway 克隆技術完全兼容
RCBM-1001-100	EZRecombinase LR Mix	100 次反應	催化attL x attR重組反應，高效率酶，與Gateway 克隆技術完全兼容
RCBM-1002-020	EZRecombinase BP Mix	20次反應	催化attB x attP重組反應，高效率酶，與Gateway?克隆技術完全兼容
RCBM-1002-100	EZRecombinase BP Mix	100 次反應	催化attB x attP重組反應，高效率酶，與Gateway?克隆技術完全兼容

貨號	載體名稱	規(guī)格	類型
EZ001	pEZ-Lv199	10ug	慢病毒表達載體
EZ003	pEZ-Lv233	10ug
EZ004	pEZ-Lv195	10ug
EZ006	pEZ-Lv201	10ug
EZ007	pEZ-M02	10ug	哺乳動物細胞表達載體
EZ008	pEZ-M13	10ug
EZ009	pEZ-M67	10ug
EZ010	pEZ-M68	10ug
EZ011	pEZ-M98	10ug
EZ012	pEZ-SH01	10ug	Human Safe Harbor載體
EZ013	pEZ-SH02	10ug	Mouse Safe Harbor載體
EZ014	pEZ-B01	10ug	大腸桿菌表達載體
EZ015	pEZ-B02	10ug	大腸桿菌表達載體
EZ016	pEZ-Lv235	10ug	慢病毒表達載體
EZ017	pEZ-Lv236	10ug
EZ018	pEZ-Lv237	10ug
EZ019	pEZ-Lv238	10ug
EZ021	pEZ-P002	10ug	植物表達載體
EZ023	pEZ-P004	10ug
EZ026	pEZ-P007	10ug
EZ027	pEZ-P008	10ug
EZ029	pEZ-P010	10ug
EZ030	pEZ-P011	10ug
EZ031	pEZ-P012	10ug
EZ032	pEZ-P013	10ug
EZ033	pEZ-M06	10ug	哺乳動物細胞表達載體
EZ034	pEZ-M09	10ug
EZ035	pEZ-M12	10ug
EG001	pShuttle-D01	10ug	穿梭載體
EG002	pShuttle-D02	10ug	穿梭載體

2、轉(zhuǎn)染試劑

貨號	名稱	適用性
EF003	EndoFectin? Max轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL)	廣泛適用于多種細胞
EF004	EndoFectin? Max轉(zhuǎn)染試劑 (3 mL)	廣泛適用于多種細胞
EF015	CRISPR-Fectin? 轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL)	優(yōu)化的CRISPR-Cas9核蛋白專用的轉(zhuǎn)染試劑?？膳cGeneHero? Cas9蛋白配合使用
EF015	EF016
EF007	EndoFectin? Expi293 轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL)	專注轉(zhuǎn)染懸浮細胞293F,轉(zhuǎn)染效率極高
EF009	EndoFectin? Expi293 增強轉(zhuǎn)染試劑盒 (1L 轉(zhuǎn)染用量)
EF010	EndoFectin? Expi293 增強轉(zhuǎn)染試劑盒 (10L 轉(zhuǎn)染用量)
EF005	EndoFectin? HepG2 轉(zhuǎn)染試劑 (1 mL)	為常用細胞系HepG2進行優(yōu)化設計
EF006	EndoFectin? HepG2 轉(zhuǎn)染試劑 (3 mL)	為常用細胞系HepG2進行優(yōu)化設計
EF001	EndoFectin? Lenti轉(zhuǎn)染試劑 (1 ml)	轉(zhuǎn)染293T細胞，可收獲更高滴度的慢病毒
EF002	EndoFectin? Lenti轉(zhuǎn)染試劑 (3 ml))	轉(zhuǎn)染293T細胞，可收獲更高滴度的慢病毒

3、BP反應-構建入門載體和LR反應-構建表達載體

貨號	名稱	說明
RCBM-1002-020	EZRecombinase? BP Cloning Kit (20 rxn)	Catalyzes attB x attP cloning（催化BP反應）
RCBM-1002-100	EZRecombinase? BP Cloning Kit (100 rxn)	Catalyzes attB x attP cloning（催化BP反應）
RCBM-1001-020	EZRecombinase? LR Cloning Kit (20 rxn)	Catalyzes attL x attR cloning（催化LR反應）
RCBM-1001-100	EZRecombinase? LR Cloning Kit (100 rxn)	Catalyzes attL x attR cloning（催化LR反應）

4、熒光素酶

貨號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品特性	熒光素酶	規(guī)格
LF001	Luc-Pair? Duo-Luciferase Assay Kit 2.0 Hot !	穩(wěn)定型	螢火蟲（Fluc）海腎（Rluc）	100rxns
LF002				300rxns
LF003				1000rxns
LF004	Luc-Pair? Duo-Luciferase HS Assay Kit Hot !	高靈敏型	螢火蟲（Fluc）海腎（Rluc）	100rxns
LF005				300rxns
LF006				1000rxns
LF007	Luc-Pair? Firefly Luciferase HS Assay Kits	高靈敏型	螢火蟲（Fluc)	100rxns
LF008				300rxns
LF009				1000rxns
LF010	Luc-Pair? Renilla Luciferase HS Assay Kit	高靈敏型	海腎（Rluc）	100rxns
LF011				300rxns
LF012				1000rxns
LF013	Luc-Pair? Duo-Luciferase HT Assay Kit	穩(wěn)定型，無需預先裂解細胞，適用高通量分析	螢火蟲（Fluc）海腎（Rluc）	10mL
LF014				30mL
LF015				100mL
LF016	Luc-Pair ? Firefly Luciferase HT Assay Kit	穩(wěn)定型，無需預先裂解細胞，適用高通量分析	螢火蟲（Fluc）	10mL
LF017				30mL
LF018				100mL
LF019	Luc-Pair? Renilla Luciferase HT Assay Kit	穩(wěn)定型，無需預先裂解細胞，適用高通量分析	海腎（Rluc）	10mL
LF020				30mL
LF021				100mL

熒光素酶報告基因載體：

貨號	產(chǎn)品	啟動子	報告基因	示蹤基因	篩選標記	抗性	研究
ZX001	pEZX-FR01(10?g)	N/A*	Firefly (hLuc)	Renilla (Rluc)	Puromycin	Kanamycin	常規(guī)啟動子等研究
ZX002	pEZX-FR02(10?g)	SV40	Firefly (hLuc)	Renilla (Rluc)	N/A*	Ampicillin	UTR靶標等研究
ZX003	pEZX-FR03(10?g)	miniCMV	Firefly( hLuc)	Renilla (RLuc)	Puromycin	Kanamycin	轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點等研究

貨號	名稱	規(guī)格	產(chǎn)品特性
LF031	Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit	100rxns	無需破碎細胞，吸取上清；檢測Gluc 和SEAP酶活性
LF032	Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit	300rxns	無需破碎細胞，吸取上清；檢測Gluc 和SEAP酶活性

分泌型單熒光素酶檢測試劑盒

貨號	名稱	規(guī)格	產(chǎn)品特性
LF061	Secrete-PairTM Gaussia Luciferase Assay Kit	100rxns	無需破碎細胞，吸取上清；檢測Gluc的酶活性
LF062	Secrete-PairTM Gaussia Luciferase Assay Kit	1000rxns	無需破碎細胞，吸取上清；檢測Gluc的酶活性

熒光素酶報告基因載體：

貨號	產(chǎn)品	描述	規(guī)格
ZX101	pEZX-GN01	pEZX-GN01 包含Gluc和SEAP的報告載體	10?g
ZX102	pEZX-GN03	pEZX-GN03 包含Gluc和SEAP的報告載體	10?g
ZX103	pEZX-GA01	pEZX-GA01 包含Gluc和SEAP的報告載體	10?g
ZX104	pEZX-GA02	pEZX-GA02 包含Gluc和SEAP的報告載體	10?g
ZX105	pEZX-GA03	pEZX-GA03 包含Gluc和SEAP的報告載體	10?g
ZX106	pEZX-LvGN01	pEZX-LvGN01 包含Gluc和SEAP的報告載體 (lentiviral)	10?g
ZX107	pEZX-LvGA01	pEZX-LvGA01 包含Gluc和SEAP的報告載體 (lentiviral)	10?g