基因、RNA 或蛋白質(zhì)到細(xì)胞的轉(zhuǎn)染  (即傳遞)  是生命科學(xué)領(lǐng)域的一項基礎(chǔ)技術(shù)。成功轉(zhuǎn)染對于一系列應(yīng)用至關(guān)重要 ，包括生物  制藥中對基因表達(dá)、基因敲低  (即RNAi)  、基因組編輯和蛋白質(zhì)表達(dá)的研究。此外 ，哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)的進步  (如體內(nèi)遞  送)  經(jīng)證明對臨床研究具有極大的價值 ，這些技術(shù)在疫苗以及細(xì)胞和基因療法開發(fā)方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。未來 ，轉(zhuǎn)染技術(shù)可用于建造疾病的動物模型和藥物篩選模型 ，基因治療、異種器官移植、改良動植物品種和生產(chǎn)性能、生產(chǎn)藥用蛋白和保健蛋白和生產(chǎn) 人抗體等領(lǐng)域。手冊下載：PDF

DNA 遞送—— 瞬時和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染用于研究基因功能和基因調(diào)節(jié) ，基因產(chǎn)品的突變分析和生化表征、基因表達(dá)對細(xì)胞健康和生命 周期的影響 ，以及用于大規(guī)模生產(chǎn)純化用蛋白和下游應(yīng)用蛋白

RNA 遞送—— 瞬時轉(zhuǎn)染可將基因表達(dá)敲除用于蛋白敲除研究、表型分析、功能恢復(fù)、通路分析、體內(nèi)敲除和藥物靶點發(fā)現(xiàn)

蛋白/抗體遞送——CRISPR-Cas9 轉(zhuǎn)染可在干細(xì)胞工程、基因治療、組織和動物疾病模型、工程抗病轉(zhuǎn)基因植物等廣泛應(yīng)用 中進行基因組編輯

轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑——病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑可用于基因治療、基因工程、細(xì)胞治療和基因編輯等領(lǐng)域 ，將目標(biāo)基因?qū)氲剿拗骷?xì)胞中。 疫苗佐劑——增強疫苗的免疫原性 ，提高疫苗的免疫力和保護效果。

大綱 ：

一、脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑  ( Lipo2000, Lipo3000 ，F(xiàn)ugene HD，jetPRIME ，Xfect ，HiPerFect ，RNAiMAX…等傳統(tǒng)試劑)

1. 1、DreamFect Gold ，綜合最強轉(zhuǎn)染試劑 ，DNA、寡核苷酸、mRNA、siRNA、shRNA…

2. 2、Lullaby ，基因沉默最強方案 ，siRNA, shRNA, miRNA, dsRNA

3. 3、EcoTransfect ，常規(guī)經(jīng)濟方案 ，DNA

   
   

二、HELIX-IN 聚合物轉(zhuǎn)染試劑  ( PEI ，F(xiàn)ugene 6 ，Lipo3000 ，X-tremeGene…等傳統(tǒng)試劑)

三、磁性轉(zhuǎn)染試劑  (最強遞送系統(tǒng) ，專治各種不轉(zhuǎn)、難轉(zhuǎn))

1. 1、CombiMag ，提升客戶當(dāng)前轉(zhuǎn)染試劑30%以上的轉(zhuǎn)染效率 (轉(zhuǎn)染增強器 ，最佳配角)

2. 2、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染 ：PolyMag Neo (全能)，   SilenceMag  (沉默專用)

3. 3、FluoMag ，轉(zhuǎn)染可視化 (TRITC 偶聯(lián)的各類型磁性轉(zhuǎn)染試劑)

4. 
   

四、病毒專欄  生產(chǎn)、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)導(dǎo)  (慢病毒/逆轉(zhuǎn)錄病毒 ，AAV腺相關(guān)病毒/腺病毒)

1. 1、HEK-293慢病毒大規(guī)模生產(chǎn) ，4質(zhì)粒系統(tǒng)

2. 2、Mag4C 病毒濃縮與保存

3. 3、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo) ：更有CAR-T細(xì)胞治療專用慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑 ( 臨床前級)

五、特色應(yīng)用試劑

1. 1、生物工藝與生物反應(yīng)器生產(chǎn)

2. 2、特定細(xì)胞類型轉(zhuǎn)染 ：神經(jīng)細(xì)胞 ，干細(xì)胞 ，Vero ，昆蟲細(xì)胞 ，CHO ，293細(xì)胞

3. 3、體內(nèi)遞送系統(tǒng) (注射動物)

4. 4、細(xì)胞內(nèi)的蛋白與抗體的遞送

5. 5、3D細(xì)胞培養(yǎng) ，轉(zhuǎn)染試劑

6. 6、疫苗佐劑 ：蛋白質(zhì)疫苗 ，DNA/mRNA疫苗

轉(zhuǎn)染效率與高轉(zhuǎn)基因表達(dá)水平或高基因沉默和最小化細(xì)胞毒性有賴于多個關(guān)鍵參數(shù)。這些因素包括細(xì)胞類型、質(zhì)粒DNA特性  (大 小、啟動子、報告基因)  和純度、siRNA序列和純度、細(xì)胞培養(yǎng)條件  (含或不含血清的培養(yǎng)基、細(xì)胞數(shù)、無污染等)  、核酸和試 劑的用量以及轉(zhuǎn)基因檢測等等。因此 ，轉(zhuǎn)染試劑需要根據(jù)要傳遞的核酸  ( DNA、siRNA、mRNA、ODN、shRNA等)  和所使用的 細(xì)胞類型進行特定設(shè)計 ，以達(dá)到最佳效果。艾美捷科技為您推薦幾種出色的轉(zhuǎn)染試劑 ：

一、脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑

脂質(zhì)轉(zhuǎn)染  ( Lipofection)  是?種基于脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染技術(shù) ，屬于生物化學(xué)方法 ，包括聚合物、DEAE葡聚糖和磷酸鈣。脂質(zhì)轉(zhuǎn)染原理 是將核酸與陽離子脂質(zhì)制劑結(jié)合。由此產(chǎn)生的分子復(fù)合物 ，稱為脂質(zhì)體 ，然后被細(xì)胞吸收。脂質(zhì)轉(zhuǎn)染的主要優(yōu)點是效率高 ，能夠 在廣泛的細(xì)胞類型中轉(zhuǎn)染所有類型的核酸 ，易于使用 ，可重復(fù)性強 ，毒性低。此外 ，該方法適用于所有轉(zhuǎn)染應(yīng)用  ( 瞬時、穩(wěn)定、 共轉(zhuǎn)染、反向、順序或多次轉(zhuǎn)染 ……)  、高通量篩選測定 ，并且在?些體內(nèi)模型中也顯示出良好的效率。

 傳統(tǒng)的脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑有 ：Lipo2000, Lipo3000 ，Fugene HD，jetPRIME，Xfect ，HiPerFect ，RNAiMAX…等。作為尖端 ，更 高轉(zhuǎn)染效率轉(zhuǎn)染技術(shù)的代表 ，艾美捷為您推薦最新TEE-TECHNOLOGY  (觸發(fā)性內(nèi)質(zhì)?逃逸技術(shù))  專利技術(shù)的轉(zhuǎn)染試劑 ，包含  了?個親脂性部分 ，如脂質(zhì) ，和?個帶電的聚胺基團 ，如陽離子聚合物。這些部分協(xié)同作用 ，確保了核酸的緊密壓縮和保護 ，以 及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的非常有效的破壞 ，從而釋放大量的核酸到細(xì)胞質(zhì)和DNA核攝取。特別關(guān)注全可生物降解實體的合成。通過這種方   式 ，轉(zhuǎn)染試劑不會干擾細(xì)胞機制 ，每次實驗都保持高細(xì)胞存活率 ，避免任何潛在的副作用。

*相同產(chǎn)品的不同規(guī)格，用“/“隔開貨號 (下同) 。

 發(fā)表文章

1. ①. Montagnac, Guillaume et al. "αTAT1 catalyses microtubule acetylation at clathrin-coated pits". Nature (IF=69.5)

2. ②. Xu, Na et al. "MicroRNA-145 regulates OCT4, SOX2, and KLF4 and represses pluripotency in human embryonic stem cells". Cell (IF=66.8)

二、HELIX-IN 聚合物轉(zhuǎn)染試劑  (陽離子聚合物)

傳統(tǒng)的陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑有 ，PEI ，F(xiàn)ugene 6 ，Lipo3000 ，X-tremeGene…艾美捷科技為您推薦 ，?種新型專利陽離子輕基 化兩親性多嵌段聚合物  (Cationic Hydroxylated Amphiphilic Multi-block Polymer ，CHAMP)  ，它具有經(jīng)典陽離子聚合物的所有 特性 ，通過核酸屏蔽芯增強以降低細(xì)胞壓力 ，并結(jié)合可生物降解的特性 ，從而增強轉(zhuǎn)染。它非常適合多個DNA的共轉(zhuǎn)染。在體   內(nèi) ，DNA被濃縮并保護成小的多聚物 ，限制免疫應(yīng)答 ，并能夠通過循環(huán)系統(tǒng)導(dǎo)航 ，直到它們被遞送。

貼壁永生化細(xì)胞系的理想選擇 ，用于體外和體內(nèi)應(yīng)用的DNA轉(zhuǎn)染 ，如HEK-293 ，NIH-3 T3 ，CHO ，COS ，HeLa ，MCF 7， MEF ，RPE-1 ，C2C12....

發(fā)表文章

1. ①. Solinger, J.A., Rashid, HO. & Spang, A. FERARI and cargo adaptors coordinate cargo flow through sorting endosomes.

Nature Communications (IF=17.7)

2. ②. Liu, X., Salokas, K., Weldatsadik, R.G. et al. Combined proximity labeling and affinity purification?mass spectrometry workflow for mapping and visualizing protein interaction networks. Nature Protocols (IF=17)

三、磁性轉(zhuǎn)染試劑  (最強遞送系統(tǒng) ，專治各種不轉(zhuǎn)、難轉(zhuǎn))

磁性轉(zhuǎn)染  ( Magnetofection?)  原理是將核酸、轉(zhuǎn)染試劑或病毒與特異性陽離子磁性納米顆粒結(jié)合。然后濃縮所得的分子復(fù)合物 并轉(zhuǎn)運到由適當(dāng)磁場支持的細(xì)胞中。通過這種方式 ，利用施加在基因載體上的磁力 ，可以非?？焖俚貙⒄麄€載體劑量集中吸引到 細(xì)胞上 ，使100%的細(xì)胞接觸到顯著的載體劑量 ，并促進細(xì)胞攝取。

Magnetofection?是唯?適用于所有類型核酸  ( DNA、siRNA、dsRNA、shRNA、mRNA、ODN......)  的通用技術(shù)。原代細(xì)胞的 首選工具 ！高轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率以及低毒性 ！

*上述基于磁性轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品，均需配套磁力板。字母K開頭的貨號，為含有磁力板的套裝，適合初次使用 (下同) 。

發(fā)表文章

1. ①. Heumüller, Maximilian et al. "A genetically encodable cell-type-specific protein synthesis inhibitor". Nature methods (IF=47.9)

2. ②.Fujiu, Katsuhito et al. "A heart-brain-kidney network controls adaptation to cardiac stress through tissue macrophage activation". Nature medicine (IF=87.2)

四、病毒專欄 ：生產(chǎn)、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)導(dǎo)

通常當(dāng)我們需要將特定的DNA或RNA導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)以調(diào)控基因表達(dá) ，可以使用轉(zhuǎn)染試劑。這個過程有點像是給細(xì)胞打開?個“門     戶” ，讓外來物質(zhì)可以進入到里面。而對于?些比較復(fù)雜的試驗 ，還需要使用病毒這個工具。病毒可以作為?個“載體” ，將特定的 DNA或RNA傳導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi)。這時 ，我們選擇相應(yīng)的病毒并感染細(xì)胞 ，多在基因工程領(lǐng)域被廣泛運用。

 發(fā)表文章

1. ①、Venkatraman, A., He, X., Thorvaldsen, J. et al. Maternal imprinting at the H19– Igf2 locus maintains adult haematopoietic stem cell quiescence. Nature (IF=69.5)

2. ②、Cheung, Kevin J et al. "Collective invasion in breast cancer requires a conserved basal epithelial program". Cell (IF=66.8)

五、特色應(yīng)用試劑 ：

1、生物工藝與生物反應(yīng)器生產(chǎn)

在生物反應(yīng)器中 ，轉(zhuǎn)染試劑可以用于細(xì)胞培養(yǎng)和生長 ，提高生產(chǎn)效率和生產(chǎn)質(zhì)量 ，故而在生物工藝和生物反應(yīng)器中的應(yīng)用極其廣 泛 ，是生物學(xué)研究和生物制藥產(chǎn)業(yè)中的重要基礎(chǔ)試劑。

發(fā)表文章

1. ①. Basore, Katherine et al. "Cryo-EM Structure of Chikungunya Virus in Complex with the Mxra8 Receptor". Cell (IF=66.8)

2. ②. Zhao, Haiyan et al. "Structural Basis of Zika Virus-Specific Antibody Protection". Cell (IF=66.8)

2、特定細(xì)胞類型轉(zhuǎn)染 ：神經(jīng)細(xì)胞 ，干細(xì)胞，Vero ，昆蟲細(xì)胞 ，CHO ，293細(xì)胞

不同的細(xì)胞類型可能需要不同的轉(zhuǎn)染試劑。例如 ，神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞和Vero細(xì)胞等可能對轉(zhuǎn)染有不同的要求。因此 ，對每種細(xì)胞 類型使用合適的轉(zhuǎn)染試劑可以是實現(xiàn)高效可靠轉(zhuǎn)染結(jié)果的絕佳選擇。

 更多細(xì)胞類型專用轉(zhuǎn)染試劑 ，如Hela、COS細(xì)胞 …歡迎垂詢艾美捷科技

發(fā)表文章

1. ①. Rangaraju, Vidhya et al. "Spatially Stable Mitochondrial Compartments Fuel Local Translation during Plasticity". Cell (IF=66.8)

2. ②. Wang, Wenzhang et al. "The inhibition of TDP-43 mitochondrial localization blocks its neuronal toxicity". Nature medicine (IF=87.2)

3、體內(nèi)遞送系統(tǒng)  (注射動物)

目前與全身基因載體注射  (基因治療)  相關(guān)的主要問題包括基因載體在全身的生物分布 ，缺乏對病理位點的特異性  (靶位點的生 物可利用性)  ，需要大劑量才能達(dá)到高局部濃度 ，非特異性毒性 ，由于與體內(nèi)環(huán)境成分的不良相互作用而導(dǎo)致載體失活以及高載 體劑量引起的其他副作用。磁性轉(zhuǎn)染?解決了與擴散限制過程和靶位點受限生物可利用性相關(guān)的問題。

發(fā)表文章

1. ①. Schubert, Rajib et al. "Virus stamping for targeted single-cell infection in vitro and in vivo". Nature biotechnology (IF=68.2)

2. ②. Fujiu, Katsuhito et al. "A heart-brain-kidney network controls adaptation to cardiac stress through tissue macrophage activation". Nature medicine (IF=87.2)

4. 4、細(xì)胞內(nèi)的蛋白與抗體的遞送

相比于DNA和RNA轉(zhuǎn)染 ，蛋白/抗體的遞送有不少優(yōu)勢 ：避免基因突變 ，直接作用于細(xì)胞質(zhì) ，不會導(dǎo)致基因表達(dá)長期改變 ，非常 適用于體內(nèi)遞送。

發(fā)表文章

1. ①. Virant, David et al. "A peptide tag-specific nanobody enables high-quality labeling for dSTORM imaging". Nature communications (IF=17.7)

2. ②. Ozay, E Ilker et al. "Intracellular Delivery of Anti-pPKCθ (Thr538) via Protein Transduction Domain Mimics for Immunomodulation". Molecular therapy (IF=12.9)

5. 5、3D細(xì)胞培養(yǎng) ，專用轉(zhuǎn)染試劑

3D細(xì)胞培養(yǎng)是一種在三維空間內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞的技術(shù) ，與傳統(tǒng)的2D細(xì)胞培養(yǎng)不同。在3D細(xì)胞培養(yǎng)中 ，細(xì)胞可以自然地形成復(fù)雜的三 維結(jié)構(gòu) ，如球體、管狀結(jié)構(gòu)和多層結(jié)構(gòu)等 ，這種結(jié)構(gòu)更接近于生物體內(nèi)的真實環(huán)境。3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于癌癥研  究、組織工程、藥物篩選等領(lǐng)域。它可以提供更準(zhǔn)確的生物學(xué)信息 ，例如細(xì)胞-細(xì)胞相互作用、細(xì)胞-基質(zhì)相互作用以及化學(xué)梯度 的影響。此外 ，3D細(xì)胞培養(yǎng)還可以更好地模擬生物體內(nèi)的微環(huán)境 ，從而更好地預(yù)測藥物反應(yīng)和疾病發(fā)展。

發(fā)表文章

1. ①. Laperrousaz, Bastien et al. "Direct transfection of clonal organoids in Matrigel microbeads: a promising approach toward organoid-based genetic screens". Nucleic acids research (IF=19.2)

2. ②. Mori, Hiroki et al. "Smad3 deficiency leads to mandibular condyle degradation via the sphingosine 1-phosphate (S1P)/S1P3 signaling axis". The American journal of pathology (IF=5.7)

6. 6、疫苗佐劑 ：蛋白質(zhì)疫苗 ，DNA/mRNA疫苗

疫苗佐劑是提高疫苗免疫原性和穩(wěn)定性的重要組成部分 ，對疫苗的效果有著至關(guān)重要的影響。蛋白質(zhì)疫苗和DNA/mRNA疫苗是 目前疫苗研發(fā)的重要方向 ，艾美捷科技為您提供疫苗佐劑整體解決方案。