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品牌專題8-羥基-2'-脫氧鳥苷(8-OHdG 或 8-oxo-dG)是脫氧鳥苷的氧化衍生物,主要由細胞DNA中的羥基自由基(·OH)、單線態(tài)氧(?O?)和單電子氧化劑等活性氧(ROS)引發(fā)生成。作為一種修飾的核苷酸堿基,8-OHdG不僅因其在細胞DNA中的含量較高而備受關(guān)注,還因其在DNA復(fù)制過程中可能導(dǎo)致的G到T的轉(zhuǎn)換突變而具有顯著的致突變潛力。這種突變會干擾基因的正常表達和功能,進而可能引發(fā)細胞的異常增殖或功能障礙。此外,8-OHdG還通過表觀遺傳機制參與基因的調(diào)控。具體而言,它能夠抑制甲基化結(jié)合域蛋白(MBD)與DNA的CpG位點的結(jié)合親和力。CpG位點的甲基化是一種重要的表觀遺傳修飾,通常與基因的沉默相關(guān)。當(dāng)8-OHdG在這些位點積累時,會干擾正常的甲基化調(diào)控過程,從而影響基因的激活或抑制。這種表觀遺傳調(diào)控機制進一步凸顯了8-OHdG在細胞功能和疾病發(fā)生中的復(fù)雜作用。盡管細胞內(nèi)存在多種DNA修復(fù)機制,但氧化損傷的DNA仍可能殘留并積累。堿基切除修復(fù)(Base Excision Repair, BER)是細胞應(yīng)對氧化損傷的主要修復(fù)途徑之一。BER酶能夠識別并切除受損的堿基,隨后通過一系列酶促反應(yīng)填補DNA缺口,恢復(fù)DNA的完整性。然而,當(dāng)氧化應(yīng)激超過細胞的修復(fù)能力時,8-OHdG等氧化損傷產(chǎn)物就會在DNA中積累。

目前,8-OHdG被廣泛接受為氧化DNA損傷和氧化應(yīng)激的敏感標(biāo)志物。研究表明,8-OHdG水平的增加與暴露于有害環(huán)境因素(如電離輻射、工業(yè)化學(xué)品、空氣污染、吸煙和癌癥化療)密切相關(guān)。此外,研究還表明,8-OHdG濃度的增加與多種與年齡相關(guān)的疾病(包括癌癥、冠心病、糖尿病和阿爾茨海默病等神經(jīng)退行性疾病)在病理上有聯(lián)系。與主要反映全身氧化損傷與修復(fù)速率平衡的尿液8-OHdG檢測相比,直接定量正常和疾病狀態(tài)下不同細胞/組織中的8-OHdG含量,可以識別DNA的組織特異性氧化損傷。因此,可以獲得更有用的信息,以更好地理解氧化損傷與疾病的關(guān)系,這有助于疾病的診斷和治療。
目前用于檢測組織和細胞中8-OHdG的幾種色譜技術(shù),如HPLC-ECD和LC-MS,這些方法耗時且成本高,通量低。目前使用的競爭性ELISA方法也不便于用于細胞/組織8-OHdG檢測,因為它們不夠準(zhǔn)確,且無法直接使用從細胞或組織中分離的完整DNA。為解決這些問題,EpigenTek提供了EpiQuik 8-OHdG DNA損傷定量檢測試劑盒(貨號P-6003),能夠快速定量細胞或組織中的8-OHdG含量。
貨號 | |
名稱 | EpiQuik 8-OHdG DNA Damage Quantification Direct Kit (Colorimetric) 8-OHdG DNA損傷定量檢測試劑盒(比色法) |
樣本 | 從任何物種(如哺乳動物、植物、真菌、細菌和各種形式的病毒)分離的DNA樣本 |
原理 | 在該檢測中,DNA被結(jié)合到經(jīng)過特殊處理、具有高DNA親和力的條孔中。通過捕獲抗體和檢測抗體來檢測8-OHdG。檢測到的信號經(jīng)過增強,然后通過在微孔板分光光度計中讀取吸光度來進行比色定量。8-OHdG的含量與測得的吸光度(OD值)強度成正比。 |
標(biāo)曲 |
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總之,8-OHdG作為氧化DNA損傷的重要標(biāo)志物,在環(huán)境因素暴露、疾病發(fā)生和表觀遺傳調(diào)控中扮演著關(guān)鍵角色。EpigenTek的EpiQuik 8-OHdG DNA損傷定量檢測試劑盒為8-OHdG的檢測提供了一種創(chuàng)新的解決方案,克服了傳統(tǒng)方法的局限性,為氧化應(yīng)激相關(guān)研究和疾病診斷提供了有利工具。
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