外泌體（Exosome，Extracellular vesicles，EVs）是一類由細(xì)胞釋放到細(xì)胞外的小型膜包裹囊泡。它們起源于細(xì)胞內(nèi)部的多種細(xì)胞器，如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和細(xì)胞膜，并通過融合或分泌途徑釋放到細(xì)胞外。外泌體的大小通常在30到150納米之間，具有豐富的蛋白質(zhì)、核酸和脂質(zhì)組成。

外泌體在細(xì)胞間的通訊和信號(hào)傳遞中起著重要作用。它們可以通過包裹和保護(hù)其內(nèi)部的生物活性分子，如小RNA、mRNA、蛋白質(zhì)和代謝產(chǎn)物，將這些分子傳遞到目標(biāo)細(xì)胞。這種傳遞方式可以影響目標(biāo)細(xì)胞的基因表達(dá)、蛋白質(zhì)合成和細(xì)胞功能。因此，外泌體被認(rèn)為是一種重要的細(xì)胞間通訊介質(zhì)，參與了多種生理和病理過程，包括免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞增殖和凋亡、腫瘤轉(zhuǎn)移和神經(jīng)系統(tǒng)功能。

近年來，外泌體的研究引起了廣泛的關(guān)注，因?yàn)樗鼈兙哂袧撛诘呐R床應(yīng)用價(jià)值。外泌體可以作為生物標(biāo)志物用于疾病的診斷、預(yù)后評(píng)估和治療反應(yīng)監(jiān)測(cè)。此外，外泌體還可以被利用為藥物傳遞系統(tǒng)，通過修改其組成或表面標(biāo)記物，將藥物有效地傳遞到特定的細(xì)胞或組織。總之，外泌體是細(xì)胞間通訊的重要媒介，對(duì)于理解細(xì)胞生物學(xué)和開發(fā)新的診斷和治療策略具有重要意義。

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本試劑盒基于自主研發(fā)的磁性顆粒，特異性捕獲外泌體而不吸附雜質(zhì)，實(shí)現(xiàn)高純度、高回收率外泌體分離。具有操作簡(jiǎn)便、高純度和高回收率等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于血漿、血清等復(fù)雜樣本中的外泌體分離。分離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流式粒徑分析、電鏡檢測(cè)、組學(xué)研究、細(xì)胞和動(dòng)物功能研究等。

試劑盒組分：

自備儀器、試劑與耗材

高速冷凍離心機(jī)

側(cè)擺搖床

1.5mL離心管

磁力架

超濾管（MWCO 10kDa）

使用方法

1、樣品預(yù)處理

1） 去除細(xì)胞。4℃，300g，離心 5min，轉(zhuǎn)移上清到新的離心管；

*對(duì)無細(xì)胞的樣品，可以跳過此步驟。

2） 去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片。4℃，2000g，離心 10min，轉(zhuǎn)移上清到新的離心管；

3） 去除大體積顆粒。步驟 2）得到的上清，4℃，14000g，離心 30min，轉(zhuǎn)移上清到新的離心管。

2、富集外泌體

1）取經(jīng)預(yù)處理后的樣品500μL（如果不足500μL，可用Solution A補(bǔ)足）到1.5mL離心管，加入10mg（加入量±10%均可） ExoMag Exosome Beads，離心管固定在側(cè)擺搖床上，17rpm，室溫旋轉(zhuǎn)孵育30min；

2）將上述離心管放置在磁力架上，靜置5s，棄上清；

3）加入1mL Solution A，上下顛倒混勻，置于磁力架上，靜置5s，棄上清；

4）重復(fù)上述步驟3）2次，保留磁顆粒。

3、分離外泌體

1）向磁顆粒中加入100μL Elution Buffer，渦旋振蕩30s；固定在側(cè)擺搖床上，17rpm，室溫旋轉(zhuǎn)30min；

2）置于磁力架上，靜置5s，轉(zhuǎn)移上清到新的1.5mL離心管，該上清為外泌體。

*外泌體不能長(zhǎng)時(shí)間保存在Elution Buffer中。若長(zhǎng)時(shí)間保存，使用超濾管（MWCO 10kDa）將溶液置換為PBS。

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Biogradetech是全球生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商。他們提供廣泛的產(chǎn)品組合，包括細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域的試劑。Biogradetech的產(chǎn)品受到全球生物研究機(jī)構(gòu)和生物制藥公司的高度追捧，他們以高質(zhì)量、可靠性和服務(wù)而聞名。   

Biogradetech成立于2015年，總部位于美國(guó)加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。其產(chǎn)品均在嚴(yán)格的全球標(biāo)準(zhǔn)下生產(chǎn)，Biogradetech還提供專業(yè)的技術(shù)支持，幫助客戶選擇正確的產(chǎn)品，并正確使用產(chǎn)品。Biogradetech致力于為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品和服務(wù)，是那些尋求高質(zhì)量試劑和可靠結(jié)果的人值得信賴的合作伙伴。   

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