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Biogradetech:高濃度,低生長因子,無酚紅,基質(zhì)膠(體內(nèi)血管生成)

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2023-09-13     
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基質(zhì)膠作為一種重要的細(xì)胞外基質(zhì),具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。它可以用于各種研究領(lǐng)域,如細(xì)胞生物學(xué)、組織工程、腫瘤研究等。基質(zhì)膠的特殊成分和結(jié)構(gòu)為細(xì)胞提供了理想的生長環(huán)境,促進(jìn)細(xì)胞的黏附、遷移和增殖。同時(shí),基質(zhì)膠還可以模擬人體組織的結(jié)構(gòu)和功能,為研究人員提供了重要的工具。

這種生長因子減少的高濃度無酚紅的基底膜基質(zhì)膠在細(xì)胞培養(yǎng)和研究中有廣泛的應(yīng)用。它為各種實(shí)驗(yàn)提供了理想的基質(zhì)環(huán)境,如體內(nèi)血管生成實(shí)驗(yàn),PDX/CDX 異種移植和腫瘤成瘤模型的實(shí)驗(yàn)等。通過使用高濃度基質(zhì)膠,研究人員可以更好地模擬體內(nèi)細(xì)胞與基質(zhì)之間的相互作用,進(jìn)一步了解細(xì)胞行為和組織發(fā)育的機(jī)制。

高濃度基質(zhì)膠的應(yīng)用非常靈活。可以使用厚層凝膠法或薄層包被法將基質(zhì)膠涂覆在培養(yǎng)表面上,具體操作可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行選擇。該產(chǎn)品經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量認(rèn)證,確保無病原體污染,并通過多種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其生物功能。

無論您是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)、組織工程研究還是腫瘤研究,Biogradetech基質(zhì)膠都是您的理想選擇。它為您的實(shí)驗(yàn)提供了可靠的3D培養(yǎng)基質(zhì)支持,幫助您更好地理解細(xì)胞行為和組織發(fā)育的奧秘。立即嘗試高濃度低生長因子無酚紅的基質(zhì)膠,開啟您的細(xì)胞研究新篇章!


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產(chǎn)品貨號(hào)英文名稱中文名稱應(yīng)用類型


A-MGL23

HC Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced, Phenol Red-free (For in vivo angiogenesis)

高濃度,低生長因子,無酚紅,基質(zhì)膠(體內(nèi)血管生成)

藍(lán)海領(lǐng)域:3D培養(yǎng),類器官培養(yǎng),干細(xì)胞培養(yǎng)


產(chǎn)品英文名稱:HC Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced, Phenol Red-free (For in vivo angiogenesis)

產(chǎn)品中文名稱:高濃度,低生長因子,無酚紅,基質(zhì)膠(體內(nèi)血管生成)

貨號(hào):A-MGL23

規(guī)格:5mL、10mL

儲(chǔ)存條件:≤-20°C

A-MGL23.png

產(chǎn)品描述:

Biogradetech貨號(hào)A-MGL23高濃度低生長因子無酚紅的基質(zhì)膠是一種連續(xù)的特殊細(xì)胞外基質(zhì)薄膜,形成了內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、肌肉細(xì)胞或神經(jīng)細(xì)胞與其相鄰基質(zhì)之間的界面。基質(zhì)膠在發(fā)育和傷口愈合過程中會(huì)被降解和再生。它不僅支持細(xì)胞和細(xì)胞層,還對(duì)組織結(jié)構(gòu)起著重要作用,影響細(xì)胞的粘附、遷移、增殖和分化。基質(zhì)膠能夠成為轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞侵襲的主要屏障。

Biogradetech貨號(hào)A-MGL23高濃度低生長因子無酚紅的基質(zhì)膠是從Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)腫瘤中純化得到的可溶性基質(zhì)膠。此高濃度低生長因子無酚紅的基質(zhì)膠在37°C下形成重組基底膜基質(zhì)膠。高濃度低生長因子無酚紅的基質(zhì)膠的主要成分包括層粘連蛋白、IV型膠原、粘連素和肝素硫酸酯蛋白聚糖。

 

適用范圍:

該系列分為標(biāo)準(zhǔn)型高濃度和低生長因子高濃度,其濃度和粘度均高于普通濃度的基質(zhì)膠,更適合于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)(動(dòng)物模型),如PDX、CDX、體內(nèi)血管生成測定等。

 

產(chǎn)品參數(shù):

1. 來源:小鼠腫瘤;

2. 顏色:含酚紅的基質(zhì)膠呈黃粉色,無酚紅的基質(zhì)膠呈半透明淡黃色;

3. 形態(tài):標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠在4°C下溶解為透明液體;高濃度基質(zhì)膠在0°C下溶解后為透明液體,長時(shí)間放置于4°C后會(huì)半凝膠化。

4. 濃度:蛋白質(zhì)濃度范圍為8至26 mg/mL。

5. 內(nèi)毒素:≤ 4.5 EU/mL

6. 凝膠時(shí)間:室溫下5-30分鐘凝膠,當(dāng)溫度從22°C升至37°C時(shí),凝膠形成速度加快。

 

包被涂層方法:

打造成功的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境,關(guān)鍵在于選擇合適的基質(zhì)膠。其中,基質(zhì)膠的包被涂層方法對(duì)于不同的應(yīng)用需求有所不同。下面,我們將介紹基質(zhì)膠的包被涂層步驟,幫助您輕松應(yīng)對(duì)各種細(xì)胞培養(yǎng)挑戰(zhàn)。

首先,讓我們來了解一下基質(zhì)膠的解凍過程。將Biogradetech貨號(hào)A-MGL23高濃度低生長因子無酚紅的基質(zhì)膠在2-8°C的冰箱中過夜解凍。由于冰箱溫度可能有所不同,因此建議在解凍過程中將基質(zhì)膠放在冰上保持低溫,以防止過早凝膠化。解凍后的基質(zhì)膠在15°C以上的溫度下會(huì)迅速凝固,因此在使用時(shí)要保持冰上狀態(tài),以避免不必要的凝膠形成。

Biogradetech貨號(hào)A-MGL23高濃度低生長因子無酚紅的基質(zhì)膠有許多應(yīng)用場景,需要不同的厚度和濃度。例如,用于內(nèi)皮細(xì)胞形成類似毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu)(管狀結(jié)構(gòu)形成實(shí)驗(yàn))、大鼠主動(dòng)脈組織分化為類似毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu)(主動(dòng)脈環(huán)形成實(shí)驗(yàn))、上皮器官樣結(jié)構(gòu)形成或腫瘤器官樣結(jié)構(gòu)形成,需要較厚的凝膠,也就是厚層凝膠法。而一些應(yīng)用,如原代細(xì)胞的傳代培養(yǎng),需要薄層涂層而不是厚凝膠,因此應(yīng)采用薄層凝膠法。

 

厚層凝膠法:

1. 按上述方法解凍基質(zhì)膠;

2. 緩慢上下移液將基質(zhì)膠混勻,注意不要引入空氣泡;

3. 向細(xì)胞培養(yǎng)板表面加入200-300μL/cm2基質(zhì)膠,平鋪均勻,注意避免產(chǎn)生氣泡;

4. 將培養(yǎng)板放置在 37 ℃,等待 30 min 形成凝膠即可使用。

 

薄層包被法:

1. 按上述方法解凍基質(zhì)膠;

2. 緩慢上下移液將基質(zhì)膠混勻,注意不要引入空氣泡;

3. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求使用預(yù)冷的培養(yǎng)基稀釋。建議將基質(zhì)膠稀釋為1:100以用于原代細(xì)胞的擴(kuò)增。對(duì)于您的應(yīng)用,可能需要經(jīng)驗(yàn)性地確定合適涂層濃度;

4. 加入適量體積的該溶液覆蓋整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)板表面。建議加入300μL/cm2的溶液;

5. 將培養(yǎng)板放置在室溫,孵育至少1h;

6. 吸去上清即可使用。不要讓涂層表面干燥。

 

通過以上步驟,您可以根據(jù)不同的細(xì)胞培養(yǎng)需求,靈活選擇適合的基質(zhì)膠涂層方法。無論是厚凝膠還是薄層涂層,都能為您的細(xì)胞研究提供穩(wěn)定的3D培養(yǎng)支持,助您取得優(yōu)異的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。趕快嘗試基質(zhì)膠涂層方法,提升您的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)效果吧!

 

實(shí)驗(yàn)操作示例:小鼠皮下腫瘤形成

1. 設(shè)備、試劑和耗材

1.1 設(shè)備:生物安全柜,細(xì)胞培養(yǎng)箱,低溫臥式離心機(jī),倒置顯微鏡;

1.2 試劑:基質(zhì)膠(貨號(hào):A-MGL21 / A-MGL23 / A-MGL24 / A-MGL26),基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含有10%胎牛血清的培養(yǎng)基,1×PBS,胰蛋白酶溶液;

1.3 耗材:無菌移液器槍頭、10cm細(xì)胞培養(yǎng)皿、無菌EP管、一次性注射器和其它耗材(或根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行調(diào)整)。

 

2. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法

2.1. 將Biogradetech貨號(hào)A-MGL23高濃度低生長因子無酚紅的基質(zhì)膠放入冰盒中,在4°C的冰箱中慢慢解凍過夜;

2.2. 選擇生長狀況良好且呈對(duì)數(shù)生長的細(xì)胞,棄去上清液,加入2 mL 1×PBS溶液輕輕洗滌,棄去液體;

2.3. 在培養(yǎng)皿中加入1 mL 0.25%胰蛋白酶細(xì)胞消化液,靜置10秒鐘,棄去胰蛋白酶,用殘留的胰蛋白酶在室溫下繼續(xù)消化1~3分鐘;

2.4. 當(dāng)細(xì)胞變圓(請(qǐng)記住,不可消化到細(xì)胞邊緣清晰透亮?xí)r),加入1 mL含有10%胎牛血清的培養(yǎng)基終止消化。小心地吹散細(xì)胞,將細(xì)胞懸浮液收集到15 mL塑料離心管中;

2.5. 以1000 rpm離心3分鐘,棄去上清液。用PBS洗滌細(xì)胞一次后,通過加入無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞,并取10 ?L細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);

2.6.

HepG2細(xì)胞:每只小鼠接種500萬個(gè)細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞密度,將所需的細(xì)胞懸液放入無菌的1.5 mL塑料離心管中,以1000 rpm離心3分鐘。棄去上清液,加入無血清培養(yǎng)基或PBS,直到總體積為300 μL;

HCT-116細(xì)胞:每只小鼠接種100萬個(gè)細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞密度,將所需的細(xì)胞懸液放入無菌的1.5 mL塑料離心管中,以1000 rpm離心3分鐘。棄去上清液,加入無血清培養(yǎng)基或PBS,直到總體積為300 μL;

MIA-PaC-2細(xì)胞:每只小鼠接種1000萬個(gè)細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞密度,將所需的細(xì)胞懸液放入無菌的1.5 mL塑料離心管中,以1000 rpm離心3分鐘。棄去上清液,加入無血清培養(yǎng)基或PBS,直到總體積為500 μL;

2.7. 基質(zhì)膠的混合:將細(xì)胞懸液與基質(zhì)膠以1:1的比例在4°C下混合;

2.8. 皮下注射:左手將裸鼠固定住,右手將細(xì)胞懸液皮下注射到裸鼠的右背部。在接種過程中,將針頭稍微插入皮下,約深1cm,以減少注射后細(xì)胞懸液從注射點(diǎn)溢出,注射體積為100 μL。MIA-PaC-2細(xì)胞注射200 μL/個(gè);

2.9. 數(shù)據(jù)記錄:將裸鼠放回籠子繼續(xù)飼養(yǎng),根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求定期測量腫瘤體積,記錄數(shù)據(jù)并繪制曲線,在腫瘤體積小于2000 mm3之前,安樂死裸鼠,取出腫瘤并拍照記錄。


Biogradetech是生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商。他們提供廣泛的產(chǎn)品組合,包括細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域的試劑。Biogradetech的產(chǎn)品受到生物研究機(jī)構(gòu)和生物制藥公司的高度追捧,他們以高質(zhì)量、可靠性和服務(wù)而聞名。 

Biogradetech成立于2015年,總部位于美國加利福尼亞州,早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家,逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線,并將其商業(yè)化銷售,包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。其產(chǎn)品均在嚴(yán)格的全球標(biāo)準(zhǔn)下生產(chǎn),Biogradetech還提供專業(yè)的技術(shù)支持,幫助客戶選擇正確的產(chǎn)品,并正確使用產(chǎn)品。Biogradetech致力于為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品和服務(wù),是那些尋求高質(zhì)量試劑和可靠結(jié)果的人值得信賴的合作伙伴。 

為了更好地滿足亞太地區(qū)客戶的需求并提升交付速度,Biogradetech在香港設(shè)立現(xiàn)貨中心,將能更迅速地滿足客戶的需求,確保訂單的高效處理,并加速產(chǎn)品的交付和配送,從而提供更快速、可靠的服務(wù)。 


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