基質(zhì)膠作為一種重要的細(xì)胞外基質(zhì)，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。它可以用于各種研究領(lǐng)域，如細(xì)胞生物學(xué)、組織工程、腫瘤研究等。基質(zhì)膠的特殊成分和結(jié)構(gòu)為細(xì)胞提供了理想的生長(zhǎng)環(huán)境，促進(jìn)細(xì)胞的黏附、遷移和增殖。同時(shí)，基質(zhì)膠還可以模擬人體組織的結(jié)構(gòu)和功能，為研究人員提供了重要的工具。

Biogradetech類器官專用基底膜基質(zhì)膠是經(jīng)過精選的，用于器官樣結(jié)構(gòu)培養(yǎng)，如果你在使用其他類型的基質(zhì)膠時(shí)遇到無法培養(yǎng)的器官樣結(jié)構(gòu)，使用這款基底膜基質(zhì)系列可以確保實(shí)驗(yàn)的有效性和重復(fù)性。例如，小鼠腸道類器官、肺類器官、人腦類器官等。

基底膜基質(zhì)的應(yīng)用廣泛，不僅可以促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化，還可以模擬真實(shí)的組織環(huán)境，為研究細(xì)胞行為和疾病機(jī)制提供重要工具。無論是進(jìn)行管狀結(jié)構(gòu)形成實(shí)驗(yàn)、器官樣結(jié)構(gòu)形成實(shí)驗(yàn)還是腫瘤器官樣結(jié)構(gòu)形成實(shí)驗(yàn)，基底膜基質(zhì)都能發(fā)揮重要作用。

如果您對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)和類器官研究感興趣，那么Biogradetech類器官專用基質(zhì)膠絕對(duì)是你的得力助手。它將為你的實(shí)驗(yàn)提供可靠的支持，幫助你揭開細(xì)胞行為和組織發(fā)育的奧秘。趕快嘗試Biogradetech類器官專用基質(zhì)膠，開啟細(xì)胞培養(yǎng)的新篇章吧！

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產(chǎn)品英文名稱：For Organoid Culture, Basement Membrane Matrix

產(chǎn)品中文名稱：類器官專用，基質(zhì)膠（腸道/肺/腦/腫瘤類器官等）

貨號(hào)：A-MGL55

規(guī)格：5mL、10mL

儲(chǔ)存條件：≤-20°C

產(chǎn)品描述：

Biogradetech貨號(hào)A-MGL55類器官專用的基質(zhì)膠是一種連續(xù)的特殊細(xì)胞外基質(zhì)薄膜，形成了內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、肌肉細(xì)胞或神經(jīng)細(xì)胞與其相鄰基質(zhì)之間的界面。基質(zhì)膠在發(fā)育和傷口愈合過程中會(huì)被降解和再生。它不僅支持細(xì)胞和細(xì)胞層，還對(duì)組織結(jié)構(gòu)起著重要作用，影響細(xì)胞的粘附、遷移、增殖和分化。基質(zhì)膠能夠成為轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞侵襲的主要屏障。

Biogradetech貨號(hào)A-MGL55類器官專用的基質(zhì)膠是從Engelbreth-Holm-Swarm（EHS）腫瘤中純化得到的可溶性基質(zhì)膠。此基質(zhì)膠在37°C下形成重組基底膜基質(zhì)膠。此基質(zhì)膠的主要成分包括層粘連蛋白、IV型膠原、粘連素和肝素硫酸酯蛋白聚糖。

適用范圍：

這是經(jīng)過精選的被證明用于類器官培養(yǎng)的基底膜基質(zhì)膠。如果你遇到其它類型的基質(zhì)膠無法成功培養(yǎng)器官樣結(jié)構(gòu)，使用這款基質(zhì)膠可以保證實(shí)驗(yàn)的有效性和可重復(fù)性。例如，小鼠腸道類器官、肺類器官、人腦類器官等。  

產(chǎn)品參數(shù)：

來源：小鼠腫瘤；

1.顏色：含酚紅的基質(zhì)膠呈黃粉色，無酚紅的基質(zhì)膠呈半透明淡黃色；

2.形態(tài)：標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠在4°C下溶解為透明液體；高濃度基質(zhì)膠在0°C下溶解后為透明液體，長(zhǎng)時(shí)間放置于4°C后會(huì)半凝膠化。

3.濃度：蛋白質(zhì)濃度范圍為8至26 mg/mL。

4.內(nèi)毒素：≤ 4.5 EU/mL

5.凝膠時(shí)間：室溫下5-30分鐘凝膠，當(dāng)溫度從22°C升至37°C時(shí)，凝膠形成速度加快。

包被涂層方法：

打造成功的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境，關(guān)鍵在于選擇合適的基質(zhì)膠。其中，基質(zhì)膠的包被涂層方法對(duì)于不同的應(yīng)用需求有所不同。下面，我們將介紹基質(zhì)膠的包被涂層步驟，幫助您輕松應(yīng)對(duì)各種細(xì)胞培養(yǎng)挑戰(zhàn)。

首先，讓我們來了解一下基質(zhì)膠的解凍過程。將Biogradetech貨號(hào)A-MGL55高濃度無酚紅的基質(zhì)膠在2-8°C的冰箱中過夜解凍。由于冰箱溫度可能有所不同，因此建議在解凍過程中將基質(zhì)膠放在冰上保持低溫，以防止過早凝膠化。解凍后的基質(zhì)膠在15°C以上的溫度下會(huì)迅速凝固，因此在使用時(shí)要保持冰上狀態(tài)，以避免不必要的凝膠形成。

Biogradetech貨號(hào)A-MGL55類器官專用的基質(zhì)膠有許多應(yīng)用場(chǎng)景，需要不同的厚度和濃度。例如，用于內(nèi)皮細(xì)胞形成類似毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu)（管狀結(jié)構(gòu)形成實(shí)驗(yàn)）、大鼠主動(dòng)脈組織分化為類似毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu)（主動(dòng)脈環(huán)形成實(shí)驗(yàn)）、上皮類器官形成或腫瘤類器官結(jié)構(gòu)形成，需要較厚的凝膠，也就是厚層凝膠法。而一些應(yīng)用，如原代細(xì)胞的傳代培養(yǎng)，需要薄層涂層而不是厚凝膠，因此應(yīng)采用薄層凝膠法。

厚層凝膠法：

1.按上述方法解凍基質(zhì)膠；

2.緩慢上下移液將基質(zhì)膠混勻，注意不要引入空氣泡；

3.向細(xì)胞培養(yǎng)板表面加入200-300μL/cm²基質(zhì)膠，平鋪均勻，注意避免產(chǎn)生氣泡；

4.將培養(yǎng)板放置在 37 ℃，等待 30 min 形成凝膠即可使用。

薄層包被法：

1.按上述方法解凍基質(zhì)膠；

2.緩慢上下移液將基質(zhì)膠混勻，注意不要引入空氣泡；

3.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求使用預(yù)冷的培養(yǎng)基稀釋。建議將基質(zhì)膠稀釋為1:100以用于原代細(xì)胞的擴(kuò)增。對(duì)于您的應(yīng)用，可能需要經(jīng)驗(yàn)性地確定最佳涂層濃度；

4.加入適量體積的該溶液覆蓋整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)板表面。建議加入300μL/cm²的溶液；

5.將培養(yǎng)板放置在室溫，孵育至少1h；

6.吸去上清即可使用。不要讓涂層表面干燥。

通過以上步驟，您可以根據(jù)不同的細(xì)胞培養(yǎng)需求，靈活選擇適合的基質(zhì)膠涂層方法。無論是厚凝膠還是薄層涂層，都能為您的細(xì)胞研究提供穩(wěn)定的3D培養(yǎng)支持，助您取得優(yōu)異的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。趕快嘗試基質(zhì)膠涂層方法，提升您的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)效果吧！  

類器官建立實(shí)驗(yàn)操作示例：小鼠腸道類器官

小鼠小腸類器官原代的建立

1. 設(shè)備、試劑和耗材

1.1 設(shè)備：生物安全柜、移液器、二氧化碳培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、離心機(jī)（低速）；

1.2 試劑：基質(zhì)膠（貨號(hào)：A-MGL03 / A-MGL55），小鼠腸道類器官試劑盒，DPBS，抗粘附漂洗液，青霉素-鏈霉素溶液，DPBS含0.1% BSA, 0.5M EDTA溶液（pH=8.0）；

1.3 耗材：無菌移液器槍頭、細(xì)胞培養(yǎng)板（例如本方案中的48孔）、細(xì)胞培養(yǎng)皿（直徑：3.5 cm、6 cm、10 cm）、無菌鑷子、無菌組織剪、70 μm濾網(wǎng)、手術(shù)刀、無菌EP管和其它耗材（或根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行調(diào)整）。

2. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

2.1 將Biogradetech貨號(hào)A-MGL55類器官專用的基質(zhì)膠放入冰盒中，在4°C的冰箱中慢慢解凍過夜；（在操作過程中，不要讓產(chǎn)品升溫超過4°C。保持產(chǎn)品冷藏，并使用冰冷的溶液或細(xì)胞懸液稀釋。）

2.2 按照指示準(zhǔn)備小鼠腸道類器官完全培養(yǎng)基。

2.3 準(zhǔn)備充足的含有0.1% BSA的DPBS。

3. 實(shí)驗(yàn)操作步驟

3.1 根據(jù)您實(shí)驗(yàn)室批準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理和操作規(guī)范，處死小鼠。

3.2 準(zhǔn)備6cm培養(yǎng)皿，并加入冰冷的含有0.1% BSA的DPBS，備用。（置于冰上）

3.3 在無菌條件下，取出近胃端3~5cm的腸組織，放入“3.2”預(yù)冷的DPBS中。

3.4 縱向切開腸腔，輕輕刮去表面絨毛，清洗兩次，將小腸組織剪碎至2mm寬，再次清洗兩次，轉(zhuǎn)移到含有5mM EDTA的預(yù)冷DPBS中，消化20min（置于冰上）。

3.5 消化后，將組織碎片轉(zhuǎn)移到含有DPBS的新培養(yǎng)皿中清洗，并重復(fù)兩次以去除EDTA。

3.6 用抗粘附漂洗液沖洗5mL移液管。用含有0.1% BSA的DPBS重新懸浮腸碎片，上下移液3~4次，收集懸浮液，用70 μm濾網(wǎng)過濾。再重復(fù)一次這個(gè)步驟。

3.7 用300 g離心3 min收集隱窩，用1mL含0.1% BSA的DPBS重懸，取20 μL懸液進(jìn)行鏡檢和隱窩計(jì)數(shù)。

3.8 完成計(jì)數(shù)后，吸取所需數(shù)量的隱窩懸液，300 g離心3min。

3.9 棄上清液，將隱窩重懸于基質(zhì)膠中。基質(zhì)膠應(yīng)保持在冰上，以防止其凝固。盡快進(jìn)行此過程。所使用的基質(zhì)膠體積取決于沉淀的大小。大約應(yīng)將70~100個(gè)隱窩懸浮在10μL的基質(zhì)膠中。

注意：不要過度稀釋基質(zhì)膠（基質(zhì)膠稀釋比例應(yīng)大于70%（基質(zhì)膠體積/總體積）），否則可能會(huì)影響其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。

3.10 將含有隱窩的基質(zhì)膠點(diǎn)在48孔細(xì)胞培養(yǎng)板底部，每孔滴12 ~20 μL，位于孔中心。此步驟需盡快完成，因?yàn)榛|(zhì)膠可能會(huì)在管內(nèi)或移液槍頭中室溫凝固。不要讓基質(zhì)膠接觸到孔壁。

不同孔板所需的隱窩-基質(zhì)膠混合物添加量如下表所示：

3.11 將培養(yǎng)板放入37°C二氧化碳培養(yǎng)箱中，孵育15min左右待基質(zhì)膠凝固。

3.12 在基質(zhì)膠完全凝固后，向48孔板中每孔加入250μL小鼠小腸類器官的完全培養(yǎng)基。將培養(yǎng)板置于37℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。可根據(jù)經(jīng)驗(yàn)更換培養(yǎng)基，請(qǐng)密切監(jiān)測(cè)類器官生長(zhǎng)狀態(tài)。

Biogradetech是生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商。他們提供廣泛的產(chǎn)品組合，包括細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域的試劑。Biogradetech的產(chǎn)品受到全球生物研究機(jī)構(gòu)和生物制藥公司的高度追捧，他們以高質(zhì)量、可靠性和服務(wù)而聞名。 

Biogradetech成立于2015年，總部位于美國(guó)加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。其產(chǎn)品均在嚴(yán)格的全球標(biāo)準(zhǔn)下生產(chǎn)，Biogradetech還提供專業(yè)的技術(shù)支持，幫助客戶選擇正確的產(chǎn)品，并正確使用產(chǎn)品。Biogradetech致力于為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品和服務(wù)，是那些尋求高質(zhì)量試劑和可靠結(jié)果的人值得信賴的合作伙伴。 為了更好地滿足亞太地區(qū)客戶的需求并提升交付速度，Biogradetech在香港設(shè)立現(xiàn)貨中心，將能更迅速地滿足客戶的需求，確保訂單的高效處理，并加速產(chǎn)品的交付和配送，從而提供更快速、可靠的服務(wù)。 

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