干細(xì)胞（Stem Cell）研究

無(wú)論您是研究造血、間充質(zhì)、胚胎還是神經(jīng)干細(xì)胞，Cell Biolabs提供各種工具來(lái)支持這些細(xì)胞的培養(yǎng)和表征。

1.堿性磷酸酶檢測(cè)

堿性磷酸酶（AP）是一種廣泛應(yīng)用于小鼠和人胚胎干細(xì)胞（ES）和胚胎生殖細(xì)胞（EG）的標(biāo)志物。Cell Biolabs的StemTAG 堿性磷酸酶試劑盒提供了一個(gè)有效的系統(tǒng)，使用AP標(biāo)記來(lái)監(jiān)測(cè)細(xì)胞分化或未分化。

StemTAG 堿性磷酸酶檢測(cè)試劑盒提供試劑，通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)染色或96孔板定量，比色或熒光讀數(shù)監(jiān)測(cè)堿性磷酸酶活性。

Alkaline Phosphatase Activity Assays, 96-Well

堿性磷酸酶AP活性檢測(cè)試劑盒

貨號(hào)：CBA-301

規(guī)格：100 assays

檢測(cè)方法：比色法

△測(cè)量胚胎干細(xì)胞和胚胎生殖細(xì)胞中普遍存在的堿性磷酸酶標(biāo)記物

△通過(guò)比色或熒光板閱讀器定量活性

Alkaline Phosphatase Activity Assays, ICC Staining

堿性磷酸酶AP活性檢測(cè)試劑盒，ICC染色

貨號(hào)：CBA-300、CBA-306

規(guī)格：100 assays

檢測(cè)方法：ICC染色法

△測(cè)量胚胎干細(xì)胞和胚胎生殖細(xì)胞中普遍存在的堿性磷酸酶標(biāo)記物

△ICC染色檢測(cè)

使用StemTAG?堿性磷酸酶染色試劑盒對(duì)未分化和分化的胚胎干細(xì)胞進(jìn)行染色。小鼠胚胎干細(xì)胞（ES-D3）在LIF存在的明膠包被培養(yǎng)皿中保持未分化狀態(tài)。為了誘導(dǎo)分化，在幾天內(nèi)停用LIF；觀察到不同的分化事件（細(xì)胞變平、變大，增殖減少）。在第5天結(jié)束時(shí)，根據(jù)StemTAG 堿性磷酸酶染色試劑盒檢測(cè)方案對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色。

2.造血CFC檢測(cè)

△甲基纖維素培養(yǎng)基支持造血細(xì)胞菌落的生長(zhǎng)

△完全定量造血干細(xì)胞，無(wú)需人工細(xì)胞計(jì)數(shù)

△試驗(yàn)周期7-10天，而不是3周

造血干細(xì)胞（HSC）是一種具有良好特征的組織特異性干細(xì)胞，負(fù)責(zé)造血系統(tǒng)的終身維持。造血干細(xì)胞或造血祖細(xì)胞被稱為集落形成細(xì)胞（CFC），當(dāng)在合適的3D環(huán)境中培養(yǎng)時(shí)，如補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)和細(xì)胞因子的甲基纖維素，會(huì)增殖形成離散的集落。

Cell Biolabs的CytoSelect 96孔造血集落形成細(xì)胞試驗(yàn)可在7-10天內(nèi)促進(jìn)HSC集落的形成。然后可以在熒光板讀取器中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行定量，或者從CFC檢測(cè)培養(yǎng)基中回收細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步的下游分析。

CytoSelect 96孔造血集落形成細(xì)胞測(cè)定原理

使用CytoSelect 96孔造血集落形成細(xì)胞試驗(yàn)形成集落。

3. 飼養(yǎng)細(xì)胞Feeder Cells

干細(xì)胞在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)需要一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)支持細(xì)胞處于未分化狀態(tài)。諸如白血病抑制因子（LIF）之類的添加物對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)起作用，但對(duì)人類胚胎干細(xì)胞可能沒(méi)有同樣的效果。在這種情況下，通常使用饋線單元層。

我們提供兩種類型的飼養(yǎng)細(xì)胞：

△MEF飼養(yǎng)細(xì)胞是小鼠胚胎纖維母細(xì)胞，多年來(lái)一直用于促進(jìn)干細(xì)胞培養(yǎng)。我們的MEF細(xì)胞不是原代細(xì)胞，通常可以傳代大約6周而不會(huì)衰老。

△SNL 76/7飼養(yǎng)細(xì)胞克隆來(lái)源于小鼠成纖維細(xì)胞STO細(xì)胞系，該細(xì)胞系已轉(zhuǎn)化為新霉素抗性和小鼠LIF基因。這種永生化細(xì)胞系已被證明可作為胚胎干細(xì)胞生長(zhǎng)的飼養(yǎng)細(xì)胞，也可用于培養(yǎng)人和小鼠的iPS細(xì)胞。

MEF Feeder Cells

△小鼠胚胎成纖維細(xì)胞允許無(wú)LIF的干細(xì)胞培養(yǎng)

△以5 × 10^6個(gè)細(xì)胞在1ml中呈現(xiàn)

△在添加ES細(xì)胞之前必須進(jìn)行有絲分裂滅活

SNL 76/7 Passage-Independent Feeder Cells

△永生化細(xì)胞系來(lái)源于小鼠成纖維細(xì)胞STO細(xì)胞，轉(zhuǎn)化小鼠LIF和新霉素耐藥基因

△用于培養(yǎng)人或小鼠iPS細(xì)胞以及胚胎干細(xì)胞生長(zhǎng)

△在添加干細(xì)胞之前必須進(jìn)行有絲分裂滅活

堿性磷酸酶試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題：

問(wèn)題1：Cell Biolabs的堿性磷酸酶試劑盒是否依賴于物種或細(xì)胞類型？

答：Cell Biolabs所有的堿性磷酸酶試劑盒可用于任何表達(dá)堿性磷酸酶的細(xì)胞類型，如成骨細(xì)胞。試劑盒不依賴于細(xì)胞類型或物種。

問(wèn)題2：我用Cell Biolabs的StemTAG?堿性磷酸酶試劑盒來(lái)鑒定我的分化細(xì)胞和未分化細(xì)胞。我驚訝地發(fā)現(xiàn)，與未分化的細(xì)胞相比，我的分化細(xì)胞實(shí)際上顯示出更高水平的堿性磷酸酶。為什么會(huì)發(fā)生這種情況？

答：與干細(xì)胞相比，絕大多數(shù)成年細(xì)胞的堿性磷酸酶活性要低得多。然而，也有少數(shù)細(xì)胞，如成骨細(xì)胞，在分化后實(shí)際上表達(dá)更高水平的堿性磷酸酶。

問(wèn)題3：兩種堿性磷酸酶染色試劑盒有什么區(qū)別？

答：Cell Biolabs的兩款堿性磷酸酶染色試劑盒通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)未分化細(xì)胞的AP活性，使用紅色（#CBA-300）或紫色（#CBA-306）染料。紅色染料通常比紫色染料的效果更清晰。

問(wèn)題4：堿性磷酸酶染色試劑盒可以用于組織切片染色嗎？

答：是的，Cell Biolabs的染色試劑盒適用于任何具有AP活性的組織或細(xì)胞類型，只要它們沒(méi)有石蠟包埋，就可以與組織切片兼容，因?yàn)槭灠駮?huì)殺死活性。

【干細(xì)胞研究高效工具】堿性磷酸酶檢測(cè)試劑盒、造血CFC快速定量、MEF/SNL飼養(yǎng)細(xì)胞——Cell Biolabs助您精準(zhǔn)表征干細(xì)胞分化與培養(yǎng)！ #干細(xì)胞研究 #科研工具 #細(xì)胞培養(yǎng)