在生命科學領域，病毒載體技術是基因治療、功能研究和細胞轉染的重要工具。然而，病毒的高效濃縮、穩(wěn)定凍存以及在多次凍融循環(huán)中的活性保持，一直是研究人員面臨的挑戰(zhàn)。System Biosciences（SBI）推出的 PEG-it? 技術，正是為了解決這些問題而設計的創(chuàng)新解決方案。

產(chǎn)品概述

PEG-it 是一種革命性的病毒濃縮與凍存技術，專為慢病毒的高效處理而設計。它不僅能夠?qū)⒉《緷饪s 100 倍，還能在濃縮過程中起到保護作用，使病毒在長期儲存和多次凍融循環(huán)中保持高活性。該技術無需超速離心，操作簡便、成本低，且對細胞無毒性，不會干擾后續(xù)實驗。

產(chǎn)品優(yōu)勢

1. 高效濃縮：PEG-it 能夠?qū)⒉《緷饪s 100 倍，顯著提高轉染效率，減少實驗所需病毒量，從而節(jié)省時間和成本。

圖1：PEG-it能將病毒顆粒濃縮10到100倍。使用PEG-it，病毒顆粒可以濃縮到100倍，導致每毫升感染單位高得多。

2. 無細胞毒性：PEG-it 對細胞無毒性，不會影響細胞功能或后續(xù)實驗結果，適用于多種細胞類型。

圖2：PEG-it是無毒的，對干細胞有效。PEG -it處理的病毒對干細胞無毒，并導致高效的轉導。方法：用含有CMV、mOCT4或mNANOG特異性啟動子的pGreenZeo報告細胞轉導H9 hES細胞。細胞在含有1ug/mL Zeocin的MEF條件培養(yǎng)基上，在matrigel包被板上培養(yǎng)8周。圖中所示的細胞被分裂并在MEF飼養(yǎng)層上生長4天。數(shù)據(jù)由Timothy Kamp博士和Chad H. Koonce博士提供，威斯康星大學麥迪遜分校，干細胞和再生醫(yī)學中心。

3. 穩(wěn)定凍存：PEG-it 在濃縮過程中同時起到凍存保護作用，使病毒在冷凍條件下長期保存，且在多次凍融循環(huán)中仍能保持高活性。

圖3：PEG-it保護分離的病毒顆粒免受反復凍融的影響。用PEG-it濃縮的慢病毒即使經(jīng)過四次凍融循環(huán)也能保持高滴度。HepG2細胞（左表組）和HT1080細胞（右表組）經(jīng)1 ~ 4個凍融循環(huán)后用LV605VA-1轉導。即使在第四次解凍后，LV605VA-1病毒顆粒也顯示出強大的轉導效率。

圖4：病毒滴度的定量測量支持從成像數(shù)據(jù)得出的結論，即PEG-it具有低溫保護作用。使用Global UltraRapid 慢病毒滴度試劑盒(貨號 LV961A-1)，裂解圖3中的細胞。使用PEG-it濃縮的病毒顆粒未發(fā)現(xiàn)因反復凍融而導致IFUs（病毒顆粒）的顯著損失。

4. 無需超速離心：與傳統(tǒng)方法相比，PEG-it 簡化了操作流程，避免了超速離心的復雜性和時間消耗。

5. 兼容性強：PEG-it 與 SBI 的 TransDux 轉染試劑配合使用，進一步提升轉染效率，減少對細胞的毒性影響。

6. 廣泛文獻支持：PEG-it 已被數(shù)百篇高影響力論文引用，SBI 的慢病毒技術在行業(yè)內(nèi)享有極高的聲譽。

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產(chǎn)品用途

1. 基因功能研究  

PEG-it 適用于多種細胞系的基因敲除、過表達或報告基因檢測，如 astrocytes、neuroprogenitor cells、hepatocytes 等。例如，研究人員可以使用 PEG-it 濃縮病毒，并將其用于 GFP 或 RFP 報告基因的表達研究。

2. 病毒載體生產(chǎn)與包裝  

SBI 提供定制化的慢病毒包裝服務，支持多種表達載體（如 MSCV、T2A 等）的構建與應用。PEG-it 與 TransDux 結合使用，可實現(xiàn)病毒的高效濃縮與穩(wěn)定凍存。

3. 細胞凍存與復蘇  

在細胞凍存與復蘇實驗中，PEG-it 保護病毒免受凍融損傷，確保病毒在多次凍融后仍能保持高感染性。例如，HT1080 或 HepG2 細胞在多次凍融后仍能高效表達 GFP 和 RFP 報告基因。

4. 高通量實驗與大規(guī)模生產(chǎn)  

PEG-it 的高效性使其適用于大規(guī)模實驗和生產(chǎn)，減少病毒制備時間，提高實驗重復性與一致性。

應用場景案例

-神經(jīng)科學：用于研究神經(jīng)前體細胞的分化與功能，如 astrocyte 分化、神經(jīng)元自更新等。

-心血管研究：用于動脈壁細胞的基因調(diào)控研究，如 miR-33 對膽固醇穩(wěn)態(tài)的影響。

-腫瘤研究：用于肝癌細胞（HepG2）或成纖維細胞（HT1080）的基因功能研究。

-干細胞研究：用于 CNS 干細胞的分化與命運決定研究。

技術優(yōu)勢總結

在生命科學研究中，高效、穩(wěn)定、低成本的病毒處理技術是推動科研進步的關鍵。SBI 的 PEG-it 技術不僅解決了病毒濃縮與凍存的難題，還為研究人員提供了更高效、更可靠的實驗工具。無論您是從事基因功能研究、病毒載體開發(fā)，還是細胞凍存與復蘇，PEG-it 都是您不可或缺的科研伙伴。