AAT Bioquest：ReadiLink/ReadiLink xtra/Buccutite快速抗體標(biāo)記試劑盒

發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時(shí)間：2025-03-31

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在生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，抗體標(biāo)記已成為一項(xiàng)重要且常規(guī)的操作。標(biāo)記物的種類繁多，從熒光染料等視覺標(biāo)記到生物素等半抗原分子，可用于增強(qiáng)免疫復(fù)合物和蛋白-蛋白相互作用的可見性，或用于蛋白質(zhì)的分離與純化。選擇哪種標(biāo)記物，取決于抗體的下游應(yīng)用。熒光標(biāo)記主要用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)、熒光印跡和免疫熒光應(yīng)用；酶標(biāo)記（如辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶）常用于印跡、ELISA和免疫組化應(yīng)用；生物素等半抗原標(biāo)記則是一種更靈活的標(biāo)記選項(xiàng)，可用于蛋白質(zhì)分離、純化以及上述所有應(yīng)用。

AAT Bioquest提供了一系列全面的抗體和蛋白標(biāo)記試劑盒，這些試劑盒專為新手科學(xué)家設(shè)計(jì)，操作簡單，無需太多實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。

抗體標(biāo)記試劑盒概覽:

表1. 抗體標(biāo)記試劑盒對比:

項(xiàng)目	ReadiLink試劑盒	ReadiLink xtra試劑盒	Buccutite試劑盒
每次反應(yīng)標(biāo)記的抗體量	50 ug	50 ug	25 ug、50 ug或1 mg
標(biāo)記化學(xué)	通過胺反應(yīng)性染料靶向自由胺基	通過胺反應(yīng)性染料靶向自由胺基	使用兩個(gè)專有連接子促進(jìn)蛋白-蛋白偶聯(lián)
可用標(biāo)記物	iFluor染料、mFluor染料、Alexa Fluor等效AF染料、FITC、Cy3、Cy5、Cy7、生物素	iFluor染料、Alexa Fluor等效AF染料、FITC、Cy3、Cy5、Cy7	PE、APC、串聯(lián)染料、HRP、AP
標(biāo)記物與抗體之間的鍵類型	共價(jià)鍵	共價(jià)鍵	共價(jià)鍵
是否兼容BSA或其他穩(wěn)定劑	否	是	否
是否需要純化	否	否	否
偶聯(lián)所需時(shí)間	1小時(shí)	1小時(shí)	2小時(shí)
手動(dòng)操作時(shí)間	約10分鐘	約10分鐘	約15分鐘
批次間差異	最小	最小	最小
應(yīng)用	成像、流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光、WB	成像、流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光、WB	流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光、免疫組化、WB、ELISA

一．ReadiLink快速抗體標(biāo)記試劑盒:

AAT Bioquest的ReadiLink快速抗體標(biāo)記試劑盒為研究人員提供了一種快速便捷的方法，用于將微小體積的抗體與我們的優(yōu)質(zhì)iFluor染料、mFluor染料或其他標(biāo)記物進(jìn)行標(biāo)記。ReadiLink試劑盒的獨(dú)特化學(xué)性質(zhì)使研究人員能夠在無需純化步驟的情況下輕松標(biāo)記并回收100%的抗體。由于ReadiLink偶聯(lián)物是共價(jià)標(biāo)記的，因此它們適合長期儲(chǔ)存。它們適用于包括熒光顯微鏡、多色成像、多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)、原位檢測、免疫組化、熒光原位雜交、ELISA等在內(nèi)的多種應(yīng)用。

ReadiLink快速抗體標(biāo)記試劑盒的關(guān)鍵特點(diǎn):

1可標(biāo)記單克隆抗體、多克隆抗體或其他蛋白

2快速簡便的兩步標(biāo)記協(xié)議，無需化學(xué)或偶聯(lián)經(jīng)驗(yàn)

3適用于標(biāo)記100 ?g抗體（兩次單獨(dú)的50 ?g抗體標(biāo)記反應(yīng)）

4100%抗體回收，**無需**對產(chǎn)品進(jìn)行純化

5偶聯(lián)物1小時(shí)內(nèi)即可使用，手動(dòng)操作時(shí)間僅需約10分鐘

6可選擇iFluor染料、mFluor染料、Alexa Fluor等效XFD染料、FITC、Cy3、Cy5、Cy7、BSA、KLH或生物素;

7避免使用任何含胺緩沖液（如Tris或甘氨酸）

8必須在標(biāo)記前去除穩(wěn)定蛋白（如BSA或明膠）；若需使用兼容BSA的抗體標(biāo)記試劑盒，請選擇ReadiLink xtra快速抗體標(biāo)記試劑盒

ReadiLink xtra.png

ReadiLink抗體標(biāo)記工作流程

ReadiLink快速抗體標(biāo)記試劑盒利用胺反應(yīng)性標(biāo)記物制備共價(jià)標(biāo)記的偶聯(lián)物。這些反應(yīng)性標(biāo)記物選擇性地靶向并結(jié)合到抗體上的自由胺基，如賴氨酸殘基。要標(biāo)記您的抗體，將抗體溶液（濃度約為1 mg/mL）與ReadiLink反應(yīng)緩沖液混合，將混合物加入預(yù)配方標(biāo)記物的小瓶中，并孵育30至60分鐘。最后，將TQ-Dyed猝滅緩沖液加入到您的混合物中并充分混合。這一步是關(guān)鍵，因?yàn)樗吮尘案蓴_以及柱純化步驟。孵育10分鐘后，您的偶聯(lián)物即可使用。

流式細(xì)胞術(shù)分析人PBMC細(xì)胞。使用ReadiLink快速iFluor488抗體標(biāo)記試劑盒（貨號1255）或Lightning-Link快速Alexa Fluor488標(biāo)記的抗人CD4抗體。使用ACEA NovoCyte流式細(xì)胞儀在FITC通道監(jiān)測熒光信號。

標(biāo)記試劑盒	CD4（SK3）-偶聯(lián)物	染色指數(shù)
ReadiLink試劑盒	CD4-iFluor488偶聯(lián)物	43
Lightning-Link試劑盒	CD4-Alexa Fluor488偶聯(lián)物	26

表2. ReadiLink快速抗體標(biāo)記試劑盒選擇指南

熒光	等效替代	Ex/Em (nm)	成像	流式	貨號
mFluor Violet 420	Cascade Blue	398/411	-	Yes	1105
iFluor 350	AMCA, Alexa Fluor 350	345/442	Yes	-	1220
mFluor Violet 450	Pacific Blue	403/454	-	Yes	1100
mFluor Violet 510	-	414/508	-	Yes	1110
iFluor 488	FITC, Alexa Fluor 488	491/514	Yes	Yes	1255
FITC	-	494/520	Yes	Yes	1299
mFluor Violet 540	Pacific Orange	405/537	-	Yes	1114
Cy3	-	555/565	Yes	-	1290
iFluor 555	Cy3, Alexa Fluor 555	552/567	Yes	-	1227
mFluor Blue 570	R-PE	553/570	-	Yes	1120
iFluor 594	Texas Red, Alexa Fluor 594	592/614	Yes	-	1230
mFluor Green 620	-	522/617	-	Yes	1123
iFluor 633	Cy5, Alexa Fluor 633	638/655	Yes	Yes	1260
Cy5	-	644/665	Yes	Yes	1292
iFluor 647	Cy5, Alexa Fluor 647	654/674	Yes	Yes	1235
mFluor Red 700	APC-Alexa Fluor 700 Tandem	657/700		Yes	1130
iFluor 680	Cy5.5, Alexa Fluor 680, IRDye 700	682/701	Yes	Yes	1240
iFluor 700	Alexa Fluor 700	693/713	Yes	Yes	1245
Cy7	-	749/776	Yes	-	1294
iFluor 750	Cy7, Alexa Fluor 750	753/779	Yes	-	1250
mFluor Red 780	APC-Alexa Fluor 750 Tandem	629/780	-	Yes	1131
iFluor 790	IRDye 800, Alexa Fluor 790	782/811	Yes	-	1265

二．兼容BSA的ReadiLink xtra快速抗體標(biāo)記試劑盒：

ReadiLink xtra快速抗體標(biāo)記試劑盒具有BSA兼容性，將標(biāo)記一抗的便利性提升到了一個(gè)新的水平。利用優(yōu)化的標(biāo)記協(xié)議和特別配方的標(biāo)記物小瓶，ReadiLink xtra試劑盒能夠在存在常見緩沖液添加劑和穩(wěn)定蛋白的情況下，快速且可重復(fù)地標(biāo)記微克量的一抗。只需兩個(gè)簡單的步驟，無需柱純化，即可共價(jià)標(biāo)記適用于任何基于免疫的應(yīng)用的抗體。

ReadiLink xtra快速抗體標(biāo)記試劑盒的關(guān)鍵特點(diǎn):

1與BSA和其他穩(wěn)定蛋白兼容

2可標(biāo)記單克隆抗體、多克隆抗體或其他蛋白

3標(biāo)記100 ?g抗體（兩次單獨(dú)的50 ?g抗體標(biāo)記反應(yīng)）

4100%抗體回收，**無需**對產(chǎn)品進(jìn)行純化

5偶聯(lián)物1小時(shí)內(nèi)即可使用，手動(dòng)操作時(shí)間僅需約10分鐘

6可選擇iFluor染料、mFluor染料、Alexa Fluor等效XFD染料、FITC、Cy3、Cy5或Cy7

表3. ReadiLink xtra Rapid 抗體標(biāo)記試劑盒

產(chǎn)品名稱	Ex (nm)	Em (nm)	規(guī)格	貨號
ReadiLink xtra Rapid iFluor 350 Antibody Labeling Kit	344	448	2 Labelings	1950
ReadiLink xtra Rapid iFluor 488 Antibody Labeling Kit	491	516	2 Labelings	1955
ReadiLink xtra Rapid XFD488 Antibody Labeling Kit	499	520	2 Labelings	1978
ReadiLink xtra Rapid FITC Antibody Labeling Kit	491	516	2 Labelings	1970
ReadiLink xtra Rapid iFluor 555 Antibody Labeling Kit	556	569	2 Labelings	1958
ReadiLink xtra Rapid XFD555 Antibody Labeling Kit	553	568	2 Labelings	1980
ReadiLink xtra Rapid iFluor 594 Antibody Labeling Kit	587	603	2 Labelings	1960
ReadiLink xtra Rapid XFD594 Antibody Labeling Kit	590	618	2 Labelings	1982
ReadiLink xtra Rapid iFluor 647 Antibody Labeling Kit	654	669	2 Labelings	1963
ReadiLink xtra Rapid XFD647 Antibody Labeling Kit	650	671	2 Labelings	1985
ReadiLink xtra Rapid iFluor 750 Antibody Labeling Kit	759	777	2 Labelings	1965
ReadiLink xtra Rapid XFD750 Antibody Labeling Kit	752	776	2 Labelings	1988

三．Buccutite蛋白質(zhì)到蛋白質(zhì)標(biāo)記試劑盒:

Buccutite交聯(lián)技術(shù)提供了一種無故障的方法，可以用辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶（AP）或藻膽蛋白共價(jià)標(biāo)記蛋白質(zhì)和抗體。與傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)偶聯(lián)技術(shù)（如SMCC化學(xué)標(biāo)記法）相比，Buccutite偶聯(lián)明顯更穩(wěn)健，要求更低。這些試劑盒允許在不到兩小時(shí)的時(shí)間內(nèi)對微克量的抗體進(jìn)行最佳標(biāo)記（每次標(biāo)記反應(yīng)僅需25?g），無需純化，產(chǎn)率為100%。使用Buccutite標(biāo)記試劑盒，常規(guī)制備共價(jià)標(biāo)記的偶聯(lián)物，這些偶聯(lián)物能夠承受典型免疫測定（如ELISA、IHC和Western blot）或流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用中通常需要的嚴(yán)格洗滌技術(shù)。

Buccutite快速抗體標(biāo)記試劑盒的主要特點(diǎn):

1標(biāo)記25?g至1mg抗體;

2標(biāo)簽的選擇包括HRP、AP、藻紅蛋白（PE）、別藻藍(lán)蛋白（APC）、PerCP、PE串聯(lián)染料和APC串聯(lián)染料;

3標(biāo)記時(shí)間少于2小時(shí)，無需純化;

4100%抗體回收率;

人PBMC細(xì)胞的流式細(xì)胞分析：用Buccutite快速PE抗體標(biāo)記試劑盒（目錄號1310）或Lightning LinkPE制備的抗人CD4抗體。使用FITC通道中的ACEA-NovoCyte流式細(xì)胞儀監(jiān)測熒光信號。

表 4. Buccutite Rapid 抗體標(biāo)記試劑盒

產(chǎn)品名稱	Ex (nm)	Em (nm)	規(guī)格	貨號
Buccutite Rapid Protein Crosslinking Kit Microscale Optimized for Crosslinking 100 ug Antibody Per Reaction	-	-	2 Labelings	1315
Buccutite Peroxidase (HRP) Antibody Conjugation Kit Optimized for Labeling 1 mg Protein	-	-	1 Kit	5504
Buccutite Peroxidase (HRP) Antibody Conjugation Kit Optimized for Labeling 100 ug Protein	-	-	1 Kit	5503
Buccutite Peroxidase (HRP) Antibody Conjugation Kit Optimized for Labeling 25 ug Protein	-	-	2 Labelings	5505
Buccutite Rapid PE Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	565	575	2 Labelings	1310
Buccutite Rapid PE Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	565	575	2 Labelings	1312
Buccutite Rapid PE-Texas Red Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	565	600	2 Labelings	1318
Buccutite Rapid PE-Texas Red Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	565	600	2 Labelings	1343
Buccutite Rapid PE-Cy5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	565	674	2 Labelings	1322
Buccutite Rapid PE-Cy5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	565	674	2 Labelings	1340
Buccutite Rapid PE-Cy5.5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	565	700	2 Labelings	1316
Buccutite Rapid PE-Cy5.5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	565	700	2 Labelings	1341
Buccutite Rapid PE-Cy7 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	565	780	2 Labelings	1317
Buccutite Rapid PE-Cy7 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	565	780	2 Labelings	1342
Buccutite Rapid PerCP Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	482	677	2 Labelings	1325
Buccutite Rapid PerCP Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	482	677	2 Labelings	1353
Buccutite Rapid APC Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	651	665	2 Labelings	1311
Buccutite Rapid APC Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	651	665	2 Labelings	1313
Buccutite Rapid APC-Cy5.5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	651	700	2 Labelings	1320
Buccutite Rapid APC-Cy5.5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	651	700	2 Labelings	1350
Buccutite Rapid APC-iFluor 700 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	651	713	2 Labelings	1319
Buccutite Rapid APC-iFluor 700 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	651	713	2 Labelings	1347
Buccutite Rapid APC-Cy7 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	651	780	2 Labelings	1321
Buccutite Rapid APC-Cy7 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	651	780	2 Labelings	1351