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Biotium:微生物(細(xì)菌,真菌&酵母)熒光染色及活力檢測(cè)全套工具

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2023-05-04     
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1、酵母和真菌染色

用于酵母細(xì)胞染色的熒光染料和試劑盒,包括活性染料、組合染色試劑盒和細(xì)胞器染色劑。在多色顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)中結(jié)合這些染料可實(shí)現(xiàn)最大的實(shí)驗(yàn)多功能性。  


  • 酵母活力染色

Biotium提供了一系列不同的熒光活力染料和試劑盒,以允許通過(guò)顯微鏡或流式細(xì)胞區(qū)分活酵母細(xì)胞和死酵母細(xì)胞(參見(jiàn)下面的活力PCR部分,了解通過(guò)qPCR檢測(cè)活酵母)。  

  • 酵母細(xì)胞器染色

我們的許多細(xì)胞器和細(xì)胞染色劑可用于對(duì)酵母細(xì)胞進(jìn)行染色。我們還提供可以染色發(fā)芽酵母細(xì)胞壁和出芽痕的染色劑。  



更多介紹及產(chǎn)品詳情請(qǐng)參見(jiàn):


2、細(xì)菌熒光染色

對(duì)于細(xì)菌,我們提供熒光染料來(lái)染色活細(xì)胞、死細(xì)胞和革蘭氏陽(yáng)性細(xì)胞,在多色顯微鏡或流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中結(jié)合這些染料可以同時(shí)評(píng)估多個(gè)參數(shù)。


  • 細(xì)菌活細(xì)胞染色

通常,可視化或檢測(cè)樣本中存在的所有細(xì)菌非常有用,無(wú)論其種類(lèi)或代謝狀態(tài)如何。為此,我們提供了一系列染料,這些染料通常可以染色所有細(xì)菌,包括革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌。這些染料有多種顏色和區(qū)域可供選擇:

  • 熒光革蘭氏染色

傳統(tǒng)的比色革蘭氏染色方案非常費(fèi)力,需要多達(dá)5種不同的溶液來(lái)染色細(xì)胞,包括有毒酒精和丙酮來(lái)使樣品脫色,并且需要精確的時(shí)間安排。相比之下,小麥胚芽凝集素 (WGA) 已被證明與革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁肽聚糖層中的N-乙酰氨基葡萄糖特異性結(jié)合,并且可以用多種不同的熒光染料進(jìn)行標(biāo)記,用于一步熒光細(xì)胞標(biāo)簽。我們提供13種顏色選項(xiàng)的熒光WGA偶聯(lián)物,以及組合革蘭氏染色/活性試劑盒和 DNA 染料。

  • 細(xì)菌活力染色

Biotium 提供一系列不同的熒光活力染料和試劑盒,以允許通過(guò)顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞(參見(jiàn)下面的活力PCR 部分, 了解通過(guò)qPCR檢測(cè)活細(xì)菌)



3、活力PCR (Viability PCRv-PCR)通過(guò)PCR定量測(cè)定微生物活性

Viability PCR 是一種靈敏、快速檢測(cè)活微生物的強(qiáng)大技術(shù)。與耗時(shí)的培養(yǎng)方法不同,qPCR 是一種快速且靈敏的檢測(cè)方法。然而,正常的 qPCR 不能區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。通過(guò)使用PMAxx?或PMA的v-PCR,您可以獲得PCR的速度、靈敏度和特異性,以及對(duì)細(xì)胞活性水平進(jìn)行量化。由于不需要培養(yǎng),您甚至可以檢測(cè)活的但不可培養(yǎng)的細(xì)菌 (VBNC) 。v-PCR技術(shù)不僅可以應(yīng)用于細(xì)菌,還可以應(yīng)用于酵母、病毒、真核生物和古細(xì)菌等其他生物。  


  • v-PCR 是如何工作的?

下面的信息圖顯示了v-PCR的作用機(jī)制,PMAxx?和PMA是對(duì)DNA具有高親和力的光反應(yīng)染料,染料嵌入dsDNA并在強(qiáng)烈的可見(jiàn)光下形成共價(jià)鍵。該反應(yīng)通過(guò)在純化過(guò)程中去除修飾的DNA和抑制DNA聚合酶的模板擴(kuò)增的組合來(lái)抑制修飾的DNA的PCR 擴(kuò)增。因?yàn)槿玖鲜羌?xì)胞膜不滲透性的,所以當(dāng)用染料處理含有活細(xì)菌和死細(xì)菌的樣品時(shí),只有細(xì)胞膜受損的死細(xì)菌的DNA才能夠被修飾,在后續(xù)的qPCR反應(yīng)中,死細(xì)胞DNA將表現(xiàn)出延遲擴(kuò)增同時(shí)比活細(xì)胞顯示出更高的Ct值。


 


  • 用于活性PCR的PMA和PMAxx?染料

PMA是Biotium為v-PCR開(kāi)發(fā)的原始染料,它已在多種細(xì)菌菌株以及酵母和病毒中得到驗(yàn)證(參見(jiàn)PMA引用文獻(xiàn))。然而,雖然PMA通常可通過(guò)qPCR有效區(qū)分活細(xì)菌和死細(xì)菌,但它并不能完全消除死細(xì)胞 DNA 中的 PCR 產(chǎn)物。這可能會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。 

PMAxx?由Biotium科學(xué)家設(shè)計(jì),旨在成為PMA的卓越替代品。PMAxx?在消除死細(xì)胞DNA的PCR擴(kuò)增方面更有效,因此可以最好地區(qū)分活細(xì)菌和死細(xì)菌。  


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