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細(xì)胞毒性(cytotoxic)是由細(xì)胞或化學(xué)物質(zhì)引起的單純細(xì)胞殺傷事件,不依賴(lài)于凋亡或壞死的細(xì)胞死亡機(jī)理。細(xì)胞毒性檢測(cè)主要是根據(jù)細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變來(lái)進(jìn)行的檢測(cè),對(duì)細(xì)胞死亡或細(xì)胞毒性的評(píng)估往往是基于細(xì)胞質(zhì)膜損傷來(lái)定量的。

【首選方法】
LDH(乳酸脫氫酶法)方法:通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的酶活性,來(lái)檢測(cè)細(xì)胞毒性,同時(shí)也是現(xiàn)如今科研工作者最快捷的檢測(cè)方式。 乳酸脫氫酶(LDH,Lactate dehydrogenase)是一種穩(wěn)定的酶,存在于所有細(xì)胞類(lèi)型中,并且在質(zhì)膜損傷后迅速釋放到細(xì)胞培養(yǎng)基中。因此,LDH是細(xì)胞毒性研究中使用最廣泛的標(biāo)記物。
【產(chǎn)品基本信息】
貨號(hào):D-AKE1030
規(guī)格:480T
儲(chǔ)存:-20℃保存6個(gè)月
原理:
該測(cè)定基于在典型的細(xì)胞毒性測(cè)定中,將靶細(xì)胞與細(xì)胞毒性化學(xué)試劑或細(xì)胞毒性細(xì)胞(NK細(xì)胞,細(xì)胞毒性T細(xì)胞)一起培養(yǎng),以誘導(dǎo)靶細(xì)胞死亡和LDH釋放。將含有LDH的上清液轉(zhuǎn)移至新的96孔測(cè)定板的孔中,并與LDH Reaction Solution混合。在LDH的作用下,NADH和四唑鹽MTT反應(yīng)生成NAD+ 和MTT的還原形式,該MTT的還原形式在565 nm處表現(xiàn)出最大吸收,產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度與裂解的細(xì)胞數(shù)直接相關(guān)。在室溫下孵育30分鐘后,使用酶標(biāo)儀讀取565 nm的吸光度。
特點(diǎn):
分析化合物或環(huán)境因素對(duì)細(xì)胞死亡的作用。
LDH從細(xì)胞內(nèi)被釋放到培養(yǎng)基中,形成了一個(gè)可視化的顏色反應(yīng)。
檢測(cè)范圍:10,00-100,0000個(gè)洗細(xì)胞/孔。
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