在分子生物學(xué)研究中，準(zhǔn)確、高效地檢測和定量RNA分子是至關(guān)重要的。隨著技術(shù)的發(fā)展，逆轉(zhuǎn)錄定量PCR（RT-qPCR）已成為研究基因表達(dá)、病毒載量和RNA干擾效果的金標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。本文將詳細(xì)介紹一種新型的RT-qPCR試劑——qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX，它以其高靈敏度、高特異性和操作簡便性在分子生物學(xué)領(lǐng)域引起了廣泛關(guān)注。

應(yīng)用領(lǐng)域

基因表達(dá)分析：RT-qPCR是研究基因表達(dá)模式和調(diào)控機(jī)制的常用工具，可以幫助科學(xué)家理解不同條件下基因表達(dá)的變化。

病毒載量測定：在傳染病研究中，RT-qPCR用于定量病毒RNA，從而評估病毒載量和感染進(jìn)程。

RNA干擾（RNAi）效果評估：通過RT-qPCR可以評估RNAi技術(shù)對特定基因表達(dá)的抑制效果。

疾病診斷和預(yù)后：在臨床診斷中，RT-qPCR可以用于檢測特定的疾病相關(guān)基因表達(dá)，有助于疾病的早期診斷和預(yù)后評估。

藥物開發(fā)和篩選：在藥物開發(fā)過程中，RT-qPCR可以幫助評估藥物對基因表達(dá)的影響，從而篩選出潛在的有效藥物。

qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX簡介

鏈接：

https://www.quantabio.com/product/qscript-xlt-1-step-rt-qpcr-toughmix/

qScript? XLT One-Step RT-qPCR ToughMix, ROX?, QuantaBio

貨號(hào)：95133

95133-100 100R

95133-500 500R

95133-02K 2000R

qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX是一種即用型、高靈敏度的RT-qPCR主混合試劑，適用于使用TaqMan 5’-水解探針等雜交探針檢測化學(xué)方法的實(shí)時(shí)PCR系統(tǒng)，且不需要被動(dòng)參考染料。該試劑允許在不打開試管的情況下，在同一管中進(jìn)行第一鏈cDNA合成和PCR擴(kuò)增。

該試劑特別適用于高靈敏度定量RNA病毒或低豐度RNA靶標(biāo)，以及高通量基因表達(dá)研究。系統(tǒng)經(jīng)過優(yōu)化，能夠在減少的反應(yīng)體積和快速循環(huán)時(shí)間內(nèi)提供最大的RT-PCR效率、靈敏度和特異性。

組成成分

qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix包含除了RNA模板和探針之外的所有RT-qPCR所需成分，并且與所有雙標(biāo)記探針化學(xué)兼容。

qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX（2X）包含2X反應(yīng)緩沖液，含有dATP、dCTP、dGTP、dTTP、氯化鎂、qScript XLT逆轉(zhuǎn)錄酶、RNase抑制蛋白、熱啟動(dòng)DNA聚合酶、AccuVue藍(lán)色qPCR染料、ROX和穩(wěn)定劑。

逆轉(zhuǎn)錄酶的特性

qScript XLT是一種經(jīng)過工程改造的M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶，具有降低的RNase H活性和在更高溫度下改善的活性和穩(wěn)定性。在50至55°C的較高溫度下進(jìn)行一步RT-qPCR的第一鏈步驟，可以提高引物退火的特異性，并破壞可能干擾cDNA合成的RNA二級結(jié)構(gòu)。

高抗PCR抑制劑能力

ToughMix的一個(gè)關(guān)鍵成分是一種超純、高度進(jìn)程性的熱穩(wěn)定DNA聚合酶，與高親和力單克隆抗體結(jié)合。這提供了一個(gè)極其嚴(yán)格的自動(dòng)熱啟動(dòng)，最小化引物二聚體和其他非特異性PCR偽影的可能性。AccuVue?示蹤染料的淺藍(lán)色簡化了在白色或透明板中的反應(yīng)組裝，并有助于最小化移液或混合錯(cuò)誤。它不會(huì)干擾qPCR性能或影響產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

實(shí)時(shí)PCR儀器兼容性

qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX與多種實(shí)時(shí)PCR儀器兼容，包括但不限于：

- Applied Biosystems 5700

- Applied Biosystems 7000

- Applied Biosystems 7300

- Applied Biosystems 7700

- Applied Biosystems 7900

- Applied Biosystems 7900HT

- Applied Biosystems 7900 HT Fast

- Applied Biosystems StepOne

- Applied Biosystems StepOnePlus

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性

qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX在-20°C的恒溫冷凍室中避光保存時(shí)，穩(wěn)定性可達(dá)一年。反復(fù)凍融不會(huì)影響RT-qPCR性能。

qScript XLT One-Step RT-qPCR ToughMix ROX作為一種新型的RT-qPCR試劑，以其高靈敏度、高特異性和操作簡便性，在分子生物學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用前景。無論是在基礎(chǔ)研究還是在臨床診斷中，它都能提供可靠的數(shù)據(jù)支持，是科研人員和臨床工作者的重要工具。

本產(chǎn)品僅供研究使用。不適用于任何動(dòng)物或人類的治療或診斷用途。