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生物研究中,蛋白質(zhì)的翻譯修飾對(duì)于磷酸化結(jié)果至關(guān)重要。特別是在分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,磷酸化是一種蛋白質(zhì)的翻譯后修飾,涉及將磷酸基團(tuán)添加到蛋白質(zhì)中。磷酸化可以調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的活性、定位和與其他分子的相互作用。
AIFM1,全稱為誘導(dǎo)凋亡因子1(Apoptosis-Inducing Factor 1),是一種普遍表達(dá)的黃素蛋白,參與程序性細(xì)胞死亡(凋亡)和線粒體功能的蛋白質(zhì)。AIFM1 (Ser-116)磷酸化特異性是指AIFM1蛋白在絲氨酸116位點(diǎn)的磷酸化特異性。在AIFM1(Ser-116)中,絲氨酸116位點(diǎn)的磷酸化可能對(duì)其在凋亡和線粒體功能中的作用具有功能上的影響。這種特異性使得研究人員能夠研究AIFM1蛋白在特定位點(diǎn)的磷酸化狀態(tài),并進(jìn)一步探究其在細(xì)胞過程中的功能和調(diào)節(jié)作用。
凋亡誘導(dǎo)因子(AIFM1, AIF, PDCD8)在caspase不依賴型細(xì)胞凋亡中起關(guān)鍵作用。AIFM1在n端裂解為62 kDa并定位于線粒體膜間隙之前以66 kDa的前體蛋白表達(dá)。作為對(duì)凋亡刺激的反應(yīng),AIFM1從線粒體膜間釋放為一個(gè)57 kDa的片段,可以轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核。用重組AIFM1處理離體細(xì)胞核可導(dǎo)致早期凋亡事件,如染色質(zhì)凝聚和大規(guī)模DNA斷裂。對(duì)AIFM1敲除小鼠的研究表明,AIFM1的凋亡活性是細(xì)胞類型和刺激依賴性的。AIFM1與氧化性凋亡有關(guān),氧化性凋亡是一種由氧化應(yīng)激引起的非炎性、不依賴于caspase的細(xì)胞死亡途徑。在氧沉過程中,活性氧的增加導(dǎo)致KEAP1釋放磷酸酶PGAM5,導(dǎo)致AIFM1 (Ser-116)的去磷酸化和隨后的細(xì)胞死亡。因此,AIFM1 Ser-116位點(diǎn)的磷酸化狀態(tài)可能是細(xì)胞凋亡的重要標(biāo)志。
【有關(guān)AIFM1參考文獻(xiàn)】
[1] Vahsen N, et al. AIF deficiency compromises oxidative phosphorylation. EMBO J. 2004;23(23):4679-4689.
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[3] Li LY, et al. AIF: not just an apoptosis-inducing factor. Ann N Y Acad Sci. 2005;1053:1-15. 研究人員可以使用這種磷酸化特異性抗體通過Western blotting或免疫組織化學(xué)等技術(shù)檢測(cè)和定量AIFM1在絲氨酸116位點(diǎn)的磷酸化形式。磷酸化特異性抗體的應(yīng)用(Applications of Phospho-Specific Antibody),并進(jìn)一步研究其與細(xì)胞凋亡和線粒體功能相關(guān)的調(diào)控機(jī)制。
艾美捷生物科技公司代理Phosphosolutions推出AIFM1 (Ser-116)磷酸化特異性抗體。
【基本信息】
貨號(hào):AP5501
規(guī)格:100ul
抗體類型:一抗
物種反應(yīng)性:人
應(yīng)用類型:WB
宿主:兔子
基因名稱:AIFM1
分子量: 57/62/66
UniProt (Human): O95831
UniProt (Immunogen Species): O95831
抗原:Phospho-AIFM1 (Ser-116)合成肽(偶聯(lián)載體),與人AIFM1中Ser-116周圍氨基酸相對(duì)應(yīng)。該位點(diǎn)在大鼠和小鼠AIFM1中是保守的,但該位點(diǎn)周圍的氨基酸并沒有很好地保守。AIFM2和AIFM3中未發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)。
我們的AIFM1 (Ser-116)兔多克隆磷特異性一抗由PhosphoSolutions公司自主生產(chǎn)。它檢測(cè)人AIFM1 (Ser-116),是抗原親和純化的。它非常適合用于WB。

未經(jīng)處理的人jurkat細(xì)胞的Western blot圖像 (lanes 1 & 3)或用calyculin A處理(100 nM, 30 min) (lanes 2 and 4)。用兔多克隆抗aifm1 (c端區(qū))按1:500進(jìn)行印跡檢測(cè) (lanes 1 & 2)抗AIFM1 (Ser-116)磷酸化特異性抗體1:10000 (lanes 3 & 4)。

Western blot結(jié)果顯示ALT對(duì)KEAP1-PGAM5-AIFM1通路蛋白水平有24小時(shí)的調(diào)節(jié)作用 (0, 16, 32 and 64 uM) 。特別是 AIFM1, P-AIFM1(Ser-116) (cat. AP5501), KEAP1, Nrf2, 和 PGAM5 檢測(cè)水平. B-Actin 作為正常對(duì)照。圖像出自出版物 CC-BY-4.0. PMID: 37712005
【參考文獻(xiàn)】
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| 34872005 | Wang, CX, et al. 2022. Auriculasin enhances ROS generation to regulate colorectal cancer cell apoptosis, ferroptosis, oxeiptosis, invasion and colony formation. Biochemical and Biophysical Research Communications, 99-106. |
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