VitroGel水凝膠系統(tǒng)精確模擬自然的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）環(huán)境，生物功能性良好，操作簡便，為藥物發(fā)現(xiàn)、組織工程、細(xì)胞治療和個(gè)性化醫(yī)療建立了強(qiáng)大的3D細(xì)胞培養(yǎng)平臺和注射給藥系統(tǒng)。無動物源成分系統(tǒng)是3D細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用于臨床研究的關(guān)鍵因素。VitroGel水凝膠能夠高通量應(yīng)用于從細(xì)胞系和患者來源的細(xì)胞建立3D類器官模型。使用水凝膠系統(tǒng)作為注射給藥系統(tǒng)，可以在細(xì)胞治療中更好地保留細(xì)胞和獲得更高的細(xì)胞活力，而且這項(xiàng)突破性的技術(shù)可更加容易從3D水凝膠中回收細(xì)胞。

1、VitroGel是什么？

VitroGel是一種無異源的功能性水凝膠系統(tǒng)，可以精確模擬天然的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)環(huán)境。

VitroGel通過多種細(xì)胞功能配體修飾，提供了一個(gè)強(qiáng)大的3D細(xì)胞培養(yǎng)平臺，可作為藥物研發(fā)、組織工程、細(xì)胞治療和個(gè)體化醫(yī)療的可注射遞送系統(tǒng)。

VitroGel有兩種不同的規(guī)格，即用型和高濃度: 即用型VitroGel 提供了簡單和多功能性的良好平衡。該水凝膠具有優(yōu)化的多功能配體配方和濃度，室溫下穩(wěn)定，可與細(xì)胞/培養(yǎng)基直接混合使用;  高濃度的水凝膠使研究人員能夠完全控制細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的機(jī)械強(qiáng)度和功能性配體。高濃度配方能夠通過調(diào)節(jié)水凝膠溶液的稀釋比例來Z大限度地靈活地控制水凝膠的機(jī)械強(qiáng)度。VitroGel高濃度水凝膠也可以作為一組構(gòu)建模塊，通過混合不同型號水凝膠創(chuàng)建一個(gè)功能性微環(huán)境。

 2、如何選擇VitroGel水凝膠產(chǎn)品？

即用型水凝膠: 對于許多用戶來說，這是S選的水凝膠系統(tǒng)。即用型水凝膠，只需要添加你的細(xì)胞，覆蓋培養(yǎng)基，然后孵育。 對不同的細(xì)胞類型和應(yīng)用方向提供了不同型號的水凝膠：

VitroGel Hydrogel Matrix (cat#VHM01)：一種通用水凝膠，對許多細(xì)胞系和原代細(xì)胞都友好。這種水凝膠可以支持腫瘤團(tuán)塊、間質(zhì)細(xì)胞或成纖維細(xì)胞的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的形成、共培養(yǎng)、侵襲或3D細(xì)胞遷移。

VitroGel ORGANOID (catVHM04)：支持患者來源的樣本，干細(xì)胞，組織，共培養(yǎng)和PDX來源的各種類器官。

VitroGel STEM (cat#VHM02)：生成高質(zhì)量的3D干細(xì)胞（細(xì)胞來源液氮儲存）。非常適合干細(xì)胞擴(kuò)增，3D放大或下游應(yīng)用。

VitroGel MSC (cat#VHM03)：支持2D包被法和3D培養(yǎng)MSC，也可用水凝膠珠替代微載體支持MSC擴(kuò)增。

VitroGel HEK293(cat#VHM05)：支持3D培養(yǎng)和HEK293細(xì)胞的規(guī)模化生產(chǎn)。

VitroGel Angiogenesis Assay Kit (cat#VHM06-K1)：研究人員研究水凝膠性質(zhì)和培養(yǎng)基對血管生成過程的影響的革命性工具。

高濃度水凝膠：對于更高級的用戶，VitroGel高濃度水凝膠使研究人員能夠完全控制細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的生物物理和生物學(xué)特性。VitroGel具有不同配體修飾的多種類型的水凝膠，不同類型的水凝膠可以通過“Mix&Match”進(jìn)而控制水凝膠中的3D細(xì)胞培養(yǎng)物。所有高濃度水凝膠均配有VitroGel Dilution Solution，可將Z終水凝膠強(qiáng)度從10 Pa調(diào)節(jié)至4000Pa。定制水凝膠可達(dá)到20000 Pa以上。

VitroGel 3D High Concentration Kit(cat#TWG001)︰是一種純凈且未經(jīng)修飾的水凝膠，可根據(jù)不同需要Z大限度地靈活地控制3D細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境。未修飾的水凝膠結(jié)構(gòu)適用于細(xì)胞團(tuán)形成，懸浮細(xì)胞或需要低細(xì)胞-基質(zhì)相互作用的細(xì)胞。

VitroGel RGD High Concentration Kit (cat#TWG003)：高濃度的RGD細(xì)胞粘附肽修飾，促進(jìn)3D細(xì)胞培養(yǎng)過程中的細(xì)胞附著和細(xì)胞-基質(zhì)相互作用。即使在水凝膠稀釋后，它也可以保持高水平的整聯(lián)蛋白結(jié)合活性以促進(jìn)形成細(xì)胞間網(wǎng)絡(luò)。

VitroGel ?COL High Concentration Kit (cat#：TWG009）：膠原模擬肽修飾，該肽特異性結(jié)合整合素α2β1，促進(jìn)許多生物活動，如體外成骨細(xì)胞分化和增強(qiáng)體內(nèi)成骨細(xì)胞活性。

VitroGel IKVAV High Concentration Kit (cat#TWG007)︰層粘連蛋白衍生的功能肽修飾，該功能肽積極參與不同的生物活動，如神經(jīng)元祖細(xì)胞分化，促進(jìn)細(xì)胞粘附，神經(jīng)突向外生長，血管生成和腫瘤生長。

VitroGel YIGSR High Concentration Kit (cat#TWG008)︰層粘連蛋白衍生的功能肽修飾，涉及內(nèi)皮細(xì)胞粘附，細(xì)胞增殖和運(yùn)動/遷移。

VitroGel MMP High Concentration Kit (cat#TWG010)︰基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)修飾的生物降解性基質(zhì)。

3、VitroGel的化學(xué)成分是什么？

VitroGel水凝膠是一種無異源的合成多糖基水凝膠系統(tǒng)。

4、VitroGel Dilution Solution Type 1和Type 2有什么區(qū)別？

VitroGel Dilution Solution Type 1含有蔗糖以保持Z佳滲透壓濃度。VitroGel Dilution Solution Type 2不含蔗糖。對于大多數(shù)細(xì)胞系，推薦VitroGel Dilution Solution Type 1。VitroGel Dilution Solution Type 2適用于研究對糖敏感的細(xì)胞。

5、VitroGel是否具有粘彈性？

是的，所有的VitroGel水凝膠都用動態(tài)流變儀進(jìn)行粘彈性性能測試。對于VitroGel高濃度水凝膠，通過VitroGel Dilution Solution改變水凝膠濃度，彈性模量(G')可在10~4000 Pa范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)節(jié)。

6、VitroGel是否含有任何天然的ECM蛋白，如纖維連接蛋白、膠原蛋白或?qū)诱尺B蛋白？

VitroGel不含任何天然ECM蛋白。研究人員可以在水凝膠系統(tǒng)中添加生長因子和蛋白質(zhì)，形成一個(gè)良好的系統(tǒng)。

7、VitroGel的力學(xué)性質(zhì)是什么?可以調(diào)整剛度嗎？

我們用動態(tài)流變儀測試了VitroGel的彈性模量(G')。G'取決于水凝膠稀釋和所用的細(xì)胞培養(yǎng)基。未稀釋的高濃度的VitroGel的G'約為4000 Pa。如果需要更高的水凝膠剛度，可以定制，定制的水凝膠剛度可以達(dá)到20k Pa以上。Biolnk產(chǎn)品(VitrolNK)可以達(dá)到G’超過45k Pa。

 8、水凝膠彈性模量和水凝膠硬度的區(qū)別是什么？

彈性模量(G')來表示VitroGel的強(qiáng)度，用動態(tài)流變儀對其進(jìn)行測試。彈性模量和剛度之間的一個(gè)簡單轉(zhuǎn)換是按1：3的比例計(jì)算。舉個(gè)例子，如果水凝膠的G'是100 Pa，也就是300 Pa的剛度。因此，高濃度VitroGel G’ 4000 Pa的剛度在12000 Pa左右。

 9、調(diào)節(jié)溫度會誘導(dǎo)VitroGel形成水凝膠嗎?

調(diào)節(jié)溫度不會誘導(dǎo)水凝膠的形成。VitroGel可在室溫下保持液體形態(tài)。可以通過與離子溶液(如細(xì)胞培養(yǎng)基)混合來誘導(dǎo)水凝膠的形成。升高溫度可能會降低水凝膠溶液的粘度。

10、分子能透過VitroGel滲透或擴(kuò)散嗎？

可以的，VitroGel支持不同大小的分子，從小分子到大蛋白質(zhì)的擴(kuò)散(例如lgG)。藥物化合物、抗體、染料可以添加在覆蓋培養(yǎng)基上以穿透水凝膠。VitroGel可與分子混合用于控釋實(shí)驗(yàn)。

11、VitroGel有自體熒光嗎？

沒有，VitroGel是一種無異源的系統(tǒng)。我們在各種影像學(xué)檢查中沒有檢測到任何自體熒光。

建議研究人員進(jìn)行對照實(shí)驗(yàn)來確定背景熒光。

12、用VitroGel培養(yǎng)后可以收獲細(xì)胞嗎？

可以，研究人員可以在20 min內(nèi)用無酶、即用的VitroGel Cell Recovery Solution輕松收獲細(xì)胞。VitroGelCell Recovery Solution室溫下穩(wěn)定，pH為中性，工作溫度為37℃。VitroGel Cell Recovery Solution在回收過程中可保持較高的細(xì)胞活力。收獲的細(xì)胞可以進(jìn)一步進(jìn)行2D和3D傳代培養(yǎng)。

13、VitroGel可以同時(shí)用于3D培養(yǎng)和2D包被培養(yǎng)嗎？

可以，VitroGel可以支持3D細(xì)胞培養(yǎng)，2D厚凝膠包被和2D薄凝膠包被培養(yǎng)。將細(xì)胞包埋在水凝膠基質(zhì)中(3D細(xì)胞培養(yǎng))可以Z大限度地提高細(xì)胞-基質(zhì)相互作用和潛在的細(xì)胞-細(xì)胞交流，以響應(yīng)水凝膠不同的生物物理和生物特性。有些細(xì)胞很難用3D培養(yǎng)，因此，2D包被是細(xì)胞培養(yǎng)的另一種方法。2D厚凝膠包被用一層厚的水凝膠來改變物質(zhì)的性質(zhì)，它是一種介于傳統(tǒng)的2D培養(yǎng)和真正的3D細(xì)胞培養(yǎng)之間的方法。如果研究人員不想進(jìn)入3D細(xì)胞培養(yǎng)，而是想看到細(xì)胞在不同物質(zhì)下的不同表現(xiàn)，那么2D厚凝膠包被是一種替代方法。這也是一種很好的分層共培養(yǎng)的方法。2D薄凝膠包被作為一層薄的水凝膠來改變物質(zhì)的表面性質(zhì)，這可能會改變細(xì)胞附著的能力，但不會改變物質(zhì)的硬度。

14、應(yīng)該選擇哪種培養(yǎng)方法？

VitroGel水凝膠系統(tǒng)適用于許多應(yīng)用。該水凝膠適用于多種培養(yǎng)方法，如3D細(xì)胞培養(yǎng)，2D包被法，靜態(tài)懸浮培養(yǎng)，水凝膠珠法，也可用作可注射載體。

3D細(xì)胞培養(yǎng)：在水凝膠基質(zhì)中進(jìn)行完整的細(xì)胞包埋，增強(qiáng)細(xì)胞-水凝膠基質(zhì)的相互作用

2D包被法：允許細(xì)胞與功能性水凝膠物質(zhì)相互作用/浸沒到功能性水凝膠物質(zhì)中，并保持良好的表面暴露在頂部培養(yǎng)基中。這種方法非常適合在傳統(tǒng)的2D培養(yǎng)和3D細(xì)胞包埋培養(yǎng)之間架起橋梁。

靜態(tài)懸浮培養(yǎng)：這是VitroGel水凝膠系統(tǒng)的獨(dú)特培養(yǎng)方法。通過簡單地混合VitroGel溶液和細(xì)胞以形成軟水凝膠，研究人員可以進(jìn)一步直接將水凝膠-細(xì)胞混合物與其他培養(yǎng)基混合，以制成水凝膠-細(xì)胞懸浮液。這種方法非常適合懸浮和放大培養(yǎng)。

水凝膠珠法：水凝膠溶液可以與細(xì)胞混合形成軟水凝膠，然后可以作為液滴添加到細(xì)胞培養(yǎng)基中，形成水凝膠-細(xì)胞珠。這種培養(yǎng)方法不僅將細(xì)胞包埋在水凝膠基質(zhì)內(nèi)以增強(qiáng)細(xì)胞-基質(zhì)相互作用，而且還允許整個(gè)水凝膠-細(xì)胞珠在細(xì)胞培養(yǎng)基中懸浮，以實(shí)現(xiàn)Z佳的培養(yǎng)基滲透。研究人員可以通過改變添加到培養(yǎng)基中的液滴的體積來調(diào)整水凝膠珠的大小。

注射用載體：只需在室溫下將水凝膠溶液與細(xì)胞/化合物混合，水凝膠在20min內(nèi)即可注射。在機(jī)械剪切力(例如通過注射器注射）下，水凝膠經(jīng)過凝膠-溶膠過渡并變?yōu)樽杂闪鲃訝顟B(tài)。然而，一旦剪切力停止，水凝膠的機(jī)械強(qiáng)度可以通過溶膠–凝膠轉(zhuǎn)變迅速恢復(fù)并再次成為水凝膠狀態(tài)。具有這種可注射的性質(zhì)，VitroGel可用于體內(nèi)細(xì)胞/藥物遞送，用于細(xì)胞治療或控釋。

15、VitroGel在體內(nèi)研究中是否具有生物相容性？

可以，研究人員可以在20 min內(nèi)用無酶、即用的VitroGel Cell Recovery Solution輕松收獲細(xì)胞。VitroGelCell Recovery Solution室溫下穩(wěn)定，pH為中性，工作溫度為37℃。VitroGel Cell Recovery Solution在回收過程中可保持較高的細(xì)胞活力。收獲的細(xì)胞可以進(jìn)一步進(jìn)行2D和3D傳代培養(yǎng)。

16、是否應(yīng)該使用特定類型的細(xì)胞培養(yǎng)板？

不需要特定的培養(yǎng)板。任何常規(guī)的組織培養(yǎng)處理板都可以使用。

17、VitroGel的孔徑大小是多少？

VitroGel的孔徑約為200~500 nm。水凝膠具有彈性、柔軟性，因此細(xì)胞可以將水凝膠基質(zhì)頂出，分子可以很容易地穿透水凝膠基質(zhì)。

18、即用型水凝膠的彈性模量是多少？

即用型VitroGel的彈性模量約為100-300 Pa。請記住，彈性模量(G’)是用動態(tài)流變儀測試的。G '不同于剛度(楊氏模量)。G '和剛度之間的簡單轉(zhuǎn)換是1：3(100 Pa的G '約為300 Pa的剛度)。因此，即用型VitroGel的剛度約為300-900 Pa。

19、高濃度/不同稀釋倍數(shù)的VitroGel的彈性模量是多少？

對于VitroGel高濃度水凝膠，通過VitroGel Dilution Solution改變水凝膠濃度，彈性模量(G')可在10-4000Pa范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)節(jié)。G'在1：0稀釋約為4000 Pa，1：1稀釋約為1200-2000 Pa，1：2稀釋約為600-1000 Pa，1：3稀釋約為200-500 Pa;高于1：3的稀釋度為500 Pa。

20、不同型號的VitroGel有什么不同？

VitroGel ORGANOID有四種不同的型號，它們由不同的生物功能配體、機(jī)械強(qiáng)度和降解性組成，以滿足不同的類器官培養(yǎng)條件的需要。

21、不同型號的VitroGel的機(jī)械強(qiáng)度有什么不同？

不同VitroGel ORGANOID水凝膠的機(jī)械強(qiáng)度順序如下：

VitroGel ORGANOID-3 > VitroGel ORGANOID-4≥ VitroGel ORGANOID-2 >VitroGel ORGANOID-1.

22、應(yīng)該選擇哪種類型的VitroGel ORGANOID水凝膠？

VitroGel ORGANOID Discovery Kit包括4種不同配方的1~4型VitroGel ORGANOID，這些水凝膠具有不同的生物功能配體、機(jī)械強(qiáng)度和可降解性，以滿足不同類器官培養(yǎng)條件的需要。由于類器官有來自干細(xì)胞、患者來源組織、共培養(yǎng)和PDX的廣泛細(xì)胞資源，因此很難判斷哪種類器官水凝膠Z適合研究人員的實(shí)驗(yàn)。因此，VitroGelORGANOID Discovery Kit有助于進(jìn)行4種不同配方的快速篩選并確定后續(xù)實(shí)驗(yàn)的Z佳型號。根據(jù)我們研究發(fā)現(xiàn)，1、2或3型適用于胃類器官。1或3型適用于肺類器官。2或3型適用于腦類器官，3或4型適用于癌癥類器官。盡管如此，仍然建議使用Discovery kit進(jìn)行快速篩選，找到Z適合研究目標(biāo)類型的水凝膠。