支原體污染在生物制藥的生產中構成了重大挑戰(zhàn)，包括細胞治療和疫苗，因為它可能會影響產品的數(shù)量和質量。一些支原體菌株甚至是致病的，能夠引起呼吸和泌尿道感染。傳統(tǒng)上，直接培養(yǎng)方法和指示細胞培養(yǎng)方法已被用于支原體檢測。然而，由于培養(yǎng)時間長（28天）和培養(yǎng)不同支原體菌株的困難，這些方法在細胞和基因治療的生產中應用時存在局限性。核酸擴增技術（NAT）正作為傳統(tǒng)培養(yǎng)方法的替代品被使用，特別是在進行了適當?shù)尿炞C后，用于生物制藥的鑒定，如先進治療藥物產品（ATMPs）。為了根據(jù)歐洲藥典（EP 2.6.7）和韓國食品藥品安全部（MFDS）等指南替代傳統(tǒng)培養(yǎng)方法，需要具備高水平的靈敏度和特異性，能夠檢測到每毫升10個菌落形成單位（CFU/mL）的支原體。

艾美捷CellSafe支原體10CFU標準：

通過標準測試方法定量的支原體10 CFU標準

產品濃度：100 CFU/ml

滅活支原體產品，無需擔心細胞系污染（不適用于基于培養(yǎng)的方法）

從支原體培養(yǎng)的對數(shù)生長期提取

GC/CFU比率：每批檢查COA（合格證書）。

應用：與基于培養(yǎng)的方法和NAT（核酸檢測）方法的比較測試，

驗證NAT方法的檢測限。

CellSafe-MycopQSearch支原體qPCR檢測試劑盒用于通過實時定量PCR（qPCR）檢測細胞培養(yǎng)中的支原體污染，使用水解探針。試劑盒中包含的引物和探針混合液含有針對支原體屬特異性的FAM標記探針和HEX標記的內控DNA探針。引物組特異性針對支原體基因組中高度保守的16S rRNA編碼區(qū)。這允許檢測M.orale、M.hyorhinis、M.arginini、M.fermentans、Acholeplasma laidlawi和M.hominis，這些是細胞培養(yǎng)中的主要污染物，以及包括M.pneumoniae、M.salivarium、M.synoviae、Spiroplasma citri和Ureaplasma在內的大多數(shù)其他支原體種。然而，不會擴增來自原核細胞如大腸桿菌的細菌DNA。該試劑盒可以在3小時內檢測出細胞培養(yǎng)中的支原體污染，并滿足當前指南設定的靈敏度要求（10 CFU/mL）。

CellSafe支原體10CFU靈敏度：

核酸擴增技術（NAT）系統(tǒng)需要能夠檢測到每種支原體菌株的10 CFU/mL以替代傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法。然而，PCR技術僅能檢測到基因組拷貝（GC），而每個菌落形成單位（CFU）的基因組拷貝數(shù)因不同種類和不同的培養(yǎng)條件而異。雖然各種商業(yè)化的支原體檢測試劑盒的檢測限可能看起來都是10 CFU/mL，但實際上，實時PCR的靈敏度實際上會根據(jù)基因組拷貝/CFU比率的不同而有所變化。

使用CellSafe的MycopQSearchTM支原體qPCR檢測試劑盒進行的PCR的靈敏度為1-10個拷貝/反應（1-10 CFU/mL）。我們使用支原體參考菌株和基因組DNA參考標準來確定靈敏度，并確保試劑盒的質量。

CellSafe致力于提供支原體全面解決方案，可以有效檢測、消除和預防影響細胞培養(yǎng)的支原體。作為CellSafe在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的CellSafe產品。