脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)是一種用于定量檢測人血清和血漿（EDTA或檸檬酸鹽）中脫氫表雄酮（DHEA）的酶聯(lián)免疫吸附測定。該設(shè)備旨在用于診斷具有腎上腺功能減退、男性化、21-羥化酶缺乏癥或多毛癥跡象的個(gè)體。該設(shè)備不用于檢測腎上腺腺瘤和腎上腺癌。僅用于研究目的。

艾美捷脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)【#ALP-11-HEAHU-E01】檢測原理：

DHEA ELISA試劑盒是一種基于競爭結(jié)合原理的固相酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）。微孔板表面涂有一層針對DHEA分子抗原位點(diǎn)的多克隆（兔）抗體。在第一次孵育過程中，樣本中的內(nèi)源性DHEA與DHEA-辣根過氧化物酶結(jié)合物競爭與包被抗體的結(jié)合位點(diǎn)。孵育完成后，未結(jié)合的結(jié)合物被洗去，固相部分再與底物溶液孵育。通過加入終止液停止顯色反應(yīng)，測量生成的黃色產(chǎn)物的吸光度（OD）。顏色的強(qiáng)度與樣本中分析物的濃度成反比。通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（以O(shè)D值為縱軸，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫軸），可以確定未知樣本的濃度。

所需材料（未提供）：

校準(zhǔn)的微孔板讀數(shù)儀（450 nm，參考波長為620至630 nm）

校準(zhǔn)的可變精度微量移液管

手動或自動微孔板清洗設(shè)備

吸水紙

蒸餾水

計(jì)時(shí)器

半對數(shù)坐標(biāo)紙或數(shù)據(jù)處理軟件

結(jié)果計(jì)算：

樣本濃度可以直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。

對于重復(fù)測定，必須取每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣本的兩個(gè)吸光度（OD）值的平均值。如果兩個(gè)值差異較大，ALPCO建議重新檢測樣本。

濃度超過最高標(biāo)準(zhǔn)的樣本可以用標(biāo)準(zhǔn)0進(jìn)一步稀釋，并按照“檢測程序”重新檢測，或者報(bào)告為>30 ng/mL。計(jì)算濃度時(shí)，必須考慮稀釋倍數(shù)。

（例如：1:10稀釋：10 ?L樣本 + 90 ?L標(biāo)準(zhǔn)0）

自動化方法：

說明書中給出的結(jié)果是通過四參數(shù)邏輯（4PL）曲線擬合自動計(jì)算得出的（4PL Rodbard或4PL Marquardt是首選方法）。其他數(shù)據(jù)處理方法可能會得出略有不同的結(jié)果。

手動方法：

使用半對數(shù)坐標(biāo)紙，通過繪制每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的（平均）OD值與其濃度的關(guān)系來構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線（以O(shè)D值為縱軸，濃度為橫軸）。通過每個(gè)樣本的（平均）OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定相應(yīng)的樣本濃度。

典型標(biāo)準(zhǔn)曲線示例

以下數(shù)據(jù)僅用于演示，不能替代實(shí)際檢測時(shí)生成的數(shù)據(jù)。

脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)文獻(xiàn)參考：

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