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阿爾茨海默病(AD)最早由德國(guó)神經(jīng)病理學(xué)家 A. Alzheimer 于 1907 年報(bào)道,是癡呆的主要原因之一。關(guān)于其發(fā)病機(jī)制,“淀粉樣級(jí)聯(lián)假說”得到廣泛支持:腦內(nèi) β-淀粉樣肽(Aβ)的沉積觸發(fā)神經(jīng)元死亡。Aβ 由 β-分泌酶和 γ-分泌酶先后切割膜蛋白——淀粉樣前體蛋白(APP,含 695、751 或 770 個(gè)氨基酸)而產(chǎn)生。由于 β-分泌酶切割后生成的可溶性 APPβ(sAPPβ)與 Aβ 的生成量直接相關(guān),因此建議同時(shí)檢測(cè) sAPPβ 與 Aβ。
另一方面,APP 的正常代謝途徑通常由 α-分泌酶先切割,產(chǎn)生可溶性 APPα(sAPPα),再由 γ-分泌酶切割生成 P3 片段。目前阿爾茨海默病藥物研發(fā)主要基于淀粉樣級(jí)聯(lián)假說,尤其關(guān)注通過調(diào)控分泌酶活性來抑制 Aβ 的生成。因此,在研究或評(píng)估分泌酶抑制劑時(shí),同時(shí)檢測(cè) sAPPα、sAPPβ 與 Aβ 具有重要意義。
本試劑盒僅用于檢測(cè)小鼠樣本中的可溶性sAPPβ。
艾美捷IBL-小鼠sAPPβ-w檢測(cè)試劑盒:
貨號(hào):27416-96Well
預(yù)期用途:僅供研究使用
檢測(cè)方法:ELISA
標(biāo)記酶:HRP
種屬:小鼠
可測(cè)樣本:血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清
檢測(cè)范圍:13–800 pg/mL
第一步反應(yīng):2–8 ℃ 過夜
第二步反應(yīng):2–8 ℃ 60 分鐘
靈敏度:2.87 pg/mL
特異性:與小鼠 sAPPα 交叉反應(yīng) <1 %
儲(chǔ)存條件:2–8 ℃
有毒有害物質(zhì):不適用
卡塔赫納議定書:不適用
檢測(cè)服務(wù):不提供
包裝規(guī)格:96 孔板 ×1
※“預(yù)期用途”欄中注明為“研究試劑”的產(chǎn)品不能使用用于診斷或任何醫(yī)療目的。
※本頁(yè)所列數(shù)據(jù)表僅為示例。
試劑盒組成:
1. 預(yù)包被微孔板:抗 sAPPβ-w 兔 IgG,96 孔 ×1
2. 標(biāo)記抗體濃縮液(30×):HRP 標(biāo)記抗小鼠 N-APP 兔 IgG Fab',0.4 mL ×1
3. 標(biāo)準(zhǔn)品:重組小鼠 sAPPβ-w,0.5 mL ×2
4. EIA 緩沖液,30 mL ×1
5. 標(biāo)記抗體稀釋液,12 mL ×1
6. 顯色底物:TMB 溶液,15 mL ×1
7. 終止液,12 mL ×1
8. 濃縮洗滌液,50 mL ×1
檢測(cè)原理:
本試劑盒采用固相夾心 ELISA。微孔板已包被捕獲抗體,加入樣本及標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行第一次反應(yīng);反應(yīng)后,加入 HRP 標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行第二次反應(yīng)。洗去未結(jié)合的抗體后,加入四甲基聯(lián)苯胺(TMB)顯色。
結(jié)果計(jì)算:
1. 以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、吸光度(O.D.)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,可采用二次回歸或雙對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換等合適模型。
2. 將樣本吸光度代入標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取濃度。
3. 將所得濃度乘以樣本稀釋倍數(shù),即為最終濃度。

文獻(xiàn)參考:
1. Selkoe DJ. Normal and abnormal biology of the beta-amyloid precursor protein.Annu Rev Neurosci. 1994;17:489-517.
2. Citron M, Oltersdorf T, Haass C, McConlogue L, Hung AY, Seubert P, Vigo Pelfrey C, Lieberburg I, Selkoe DJ. Mutation of the beta-amyloid precursor protein in familial Alzheimer's disease increases beta-protein production. Nature.1992 Dec 17;360(6405):672-4.
3. Hsiao K, Chapman P, Nilsen S, Eckman C, Harigaya Y, Younkin S, Yang F,Cole G. Correlative memory deficits, Abeta elevation, and amyloid plaques in transgenic mice. Science. 1996 Oct 4;274(5284):99-102.
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