背景：

生物素標記通常用于蛋白質(zhì)或其他靶分子的非放射性標記和純化。生物素標記利用了生物素（維生素 H）與親和素或鏈霉親和素之間異常強烈的相互作用。生物素對親和素或鏈霉親和素的親和力是蛋白質(zhì)和配體之間已知的最強的非共價相互作用之一，其解離常數(shù) （Kd） 約為 4x10-14M. BirA 是一種大腸桿菌生物素蛋白連接酶，在需要 ATP 的反應中以高效和特異性的方式將生物素共價添加到 AviTag? 肽中。它的優(yōu)點是產(chǎn)生可用于蛋白質(zhì)捕獲、固定化和功能化的均質(zhì)產(chǎn)品。

大腸桿菌體內(nèi)生物素化試劑盒（含 BirA 感受態(tài)細胞）采用方便易用的形式，包含用大腸桿菌菌株 BL21 中的生物素標記生物素受體肽所需的所有組分，這是一種化學感受態(tài)的大腸桿菌 B 菌株。這些細胞包括一個含有BirA基因的IPTG誘導質(zhì)粒和一個鏈霉素或大觀霉素的抗性基因。該試劑盒包含足夠的試劑，包括 BL21 細胞，用于表達和標記 10 x 1 L 大腸桿菌培養(yǎng)物。

首先使用與AviTag?序列相連的表達目標蛋白的載體（例如：pAN或pAC載體）轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞。轉(zhuǎn)化后，IPTG誘導BirA表達，并將生物素添加到培養(yǎng)物中。BirA 可有效催化生物素與 AviTag? 的特異性結合。

艾美捷大腸桿菌體內(nèi)生物素化試劑盒(BirA感受態(tài)細胞)數(shù)據(jù)案例：

貨號：27461

圖：使用大腸桿菌體內(nèi)生物素化試劑盒進行RAF-1-GST-AviTagM生物素化。

儲存和使用：

儲存/穩(wěn)定性：當材料按照指示儲存時，該檢測試劑盒將在收到之日起長達 6 個月內(nèi)發(fā)揮最佳性能。

應用：含有AviTag?序列的蛋白質(zhì)/肽的特異性生物素標記，用于下游應用。

運輸溫度：-80°攝氏度

科學類別：生物素化

僅供研究使用

大腸桿菌體內(nèi)生物素化試劑盒(BirA感受態(tài)細胞)文獻參考：

Fairhead， M 和 Howarth， M. 方法 Mol Biol. 2015;1266: 171–184.

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