GLP-1（活性7-36）ELISA試劑盒高靈敏度試劑盒用于定量測(cè)定血漿樣本中的生物活性胰高血糖素樣肽-1（7-36）[GLP-1（7-36）]水平。GLP-1肽的主要氨基酸序列在哺乳動(dòng)物物種中是相同的，即大鼠、小鼠、豬、人等。該試劑盒僅供研究使用。不用于診斷程序。

艾美捷GLP-1（活性7-36）ELISA試劑盒（ALP-43-GP1HU-E01）檢測(cè)原理：

本ELISA試劑盒旨在用于定量測(cè)量血漿樣本中的生物活性GLP-1（7-36）。該檢測(cè)采用雙位點(diǎn)“夾心”技術(shù)，使用兩種選定的GLP-1（7-36）特異性抗體。標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和測(cè)試樣本直接加入到已涂有鏈霉親和素的微孔板孔中。隨后，向每個(gè)孔中加入生物素標(biāo)記的GLP-1（7-36）特異性抗體和辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的GLP-1（7-36）特異性抗體的混合物。在第一次孵化期后，形成“鏈霉親和素 – 生物素抗體 – GLP-1(7-36) – HRP標(biāo)記抗體”的“夾心”免疫復(fù)合物，并附著在板壁上。在隨后的洗滌步驟中去除未結(jié)合的HRP標(biāo)記抗體。為了檢測(cè)這種免疫復(fù)合物，每個(gè)孔隨后與底物溶液孵育，在定時(shí)反應(yīng)后，使用分光光度計(jì)微孔板閱讀器進(jìn)行測(cè)量。與微孔板孔壁上GLP-1（7-36）結(jié)合的免疫復(fù)合物的酶活性與樣本中GLP-1（7-36）的含量成正比。

試劑：配制和儲(chǔ)存

試劑盒在收到后必須存放在2-8°C。有關(guān)試劑盒的有效期，請(qǐng)參考試劑盒盒上的標(biāo)簽。所有組分在有效期前都是穩(wěn)定的。

1. 鏈霉親和素包被微孔板（10040B）

涂有鏈霉親和素的微孔板。

數(shù)量：1 x 96孔微孔板

儲(chǔ)存：2-8°C

配制：即用型

2. GLP-1追蹤抗體（30229）

穩(wěn)定蛋白質(zhì)基質(zhì)中HRP標(biāo)記的抗GLP-1特異性抗體。

數(shù)量：1 x 0.6 mL

儲(chǔ)存：2-8°C

配制：使用前必須與GLP-1（7-36）捕獲抗體（30230）和追蹤抗體稀釋液（30017）混合。

3. GLP-1（7-36）捕獲抗體（30230）

生物素標(biāo)記的GLP-1（7-36）特異性抗體。

數(shù)量：1 x 0.6 mL

儲(chǔ)存：2-8°C

配制：使用前必須與GLP-1追蹤抗體（30229）和追蹤抗體稀釋液（30017）混合。

4. ELISA洗滌濃縮液（10010）

含有非氮化物防腐劑的磷酸鹽緩沖液中的表面活性劑。

數(shù)量：1 x 30 mL

儲(chǔ)存：2-8°C

配制：30倍濃縮。使用前必須用870 mL的蒸餾水稀釋并充分混合。

5. ELISA HRP底物（10020）

含有穩(wěn)定過(guò)氧化氫的四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。

數(shù)量：1 x 24 mL

儲(chǔ)存：2-8°C

配制：即用型

6. 終止溶液（30357）

1.0 M 硫酸。

數(shù)量：1 x 12 mL

儲(chǔ)存：2-8°C

配制：即用型

7. GLP-1校準(zhǔn)品1至6級(jí)（30441 – 30446）

含有非氮化物、非汞基防腐劑的液體蛋白質(zhì)基質(zhì)中凍干的GLP-1（7-36）。

數(shù)量：6 x 瓶

儲(chǔ)存：2-8°C（凍干），<-20°C（重組）。不要超過(guò)三次凍融周期。

配制：必須用1 mL的蒸餾水重組，靜置10分鐘，然后通過(guò)翻轉(zhuǎn)或輕輕渦旋混合。使用前確保所有固體完全溶解。

8. GLP-1對(duì)照品（30447 – 30448）

含有非氮化物、非汞基防腐劑的液體蛋白質(zhì)基質(zhì)中凍干的GLP-1（7-36）。

數(shù)量：2 x 瓶

儲(chǔ)存：2-8°C（凍干），<-20°C（重組）。不要超過(guò)三次凍融周期。

配制：必須用1 mL的蒸餾水重組，靜置10分鐘，然后通過(guò)翻轉(zhuǎn)或輕輕渦旋混合。使用前確保所有固體完全溶解。

9. 追蹤抗體稀釋液（30017）

用于追蹤抗體稀釋

數(shù)量：1 x 12 mL

儲(chǔ)存：2-8°C

配制：即用型。

操作注意事項(xiàng)：

1. 未能按照上述方法收集樣本可能會(huì)導(dǎo)致由于內(nèi)源性DPP4活性而出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果。

2. 建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和未知樣本都要進(jìn)行雙份檢測(cè)。應(yīng)使用每份重復(fù)的平均吸光度讀數(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和結(jié)果計(jì)算。

3. 對(duì)于濃度高于6級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品的樣本，建議使用適當(dāng)?shù)臒o(wú)GLP-1緩沖基質(zhì)（例如標(biāo)準(zhǔn)零）進(jìn)行稀釋，以獲得更準(zhǔn)確的結(jié)果。

4. 光敏感試劑應(yīng)保存在原始的琥珀色瓶中。

5. 將未使用的鏈霉親和素包被條存放在帶有干燥劑的鋁箔拉鏈袋中，以防止受潮。

6. 仔細(xì)的技術(shù)和正確校準(zhǔn)的移液設(shè)備對(duì)于確保測(cè)試的可重復(fù)性是必要的。

7. 與本說(shuō)明書中所述不同的孵化時(shí)間或溫度可能會(huì)影響結(jié)果。

8. 避免在微孔中產(chǎn)生氣泡，因?yàn)檫@可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)合效率降低和重復(fù)讀數(shù)的變異系數(shù)（%CV）增加。

9. 使用前應(yīng)輕輕且徹底地混合所有試劑，避免產(chǎn)生泡沫。