熱休克蛋白90 kDa（HSP90）是熱休克蛋白家族的成員。 HSP蛋白是分子伴侶蛋白，參與幫助蛋白質(zhì)正確折疊并抵抗熱應激，通過作用于激素受體和激酶參與細胞信號傳導，參與細胞骨架組織、細胞周期和分化（通過作用于CDK4（細胞周期依賴性激酶4）、Wee1和CDK11p110等）。HSP90有3個家族成員，它們在細胞定位上有所不同。HSP90A是細胞質(zhì)蛋白，有兩個可誘導的亞型（HSP90α1和α2）和一個組成性表達的亞型（HSP90β）。HSP90B（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白）存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中，而TRAP（TNF受體相關(guān)蛋白1）存在于線粒體中。它們由四個結(jié)構(gòu)域組成：N端結(jié)構(gòu)域（NTD）、連接區(qū)、中間結(jié)構(gòu)域（MD）和C端結(jié)構(gòu)域（CTD）。NTD具有高親和力的ATP結(jié)合位點，而CTD主要參與靶標結(jié)合、二聚化和定位。HSP90β在轉(zhuǎn)錄水平上受到調(diào)控，通過翻譯后修飾（如磷酸化）和分子輔助伴侶進行調(diào)節(jié)。HSP90通過參與多種癌基因以及在血管生成、炎癥、腫瘤抑制和轉(zhuǎn)移中起作用的蛋白的穩(wěn)定化，促進癌癥進展。因此，HSP90已成為癌癥治療的有吸引力的靶點。除了癌癥，HSP90還在阿爾茨海默病、帕金森病和病毒感染中發(fā)揮作用。從其多種和關(guān)鍵功能來看，開發(fā)針對HSP90的抑制劑對于治療多種嚴重且致命的疾病是有益的。

HSP90β（N端結(jié)構(gòu)域）測定試劑盒是一種熒光偏振（FP）均質(zhì)96孔板試劑盒，專為篩選和鑒定HSP90β（熱休克蛋白90 kDa beta）抑制劑而設(shè)計。 該測定利用了熒光標記的加丹霉素。試劑盒包含足夠的純化重組HSP90β、熒光探針和測定緩沖液，可供100次反應使用。

該測定需要一臺能夠測量熒光偏振（FP）并配備讀取FP信號所需部件的熒光微孔板讀取器。

艾美捷BPS Bioscience-HSP90βN端結(jié)構(gòu)域檢測試劑盒：

貨號：50294

同義詞：HSP90b、熱休克蛋白90b、HSP90beta、HSP90β

試劑盒格式：熒光偏振

物種：人

提供方式：HSP90β N端結(jié)構(gòu)域測定試劑盒采用便捷的96孔板格式，包含足夠的純化HSP90β酶、FITC標記的加丹霉素以及HSP90β測定緩沖液，可供100次酶反應使用。

所需材料但未提供

40 mM DTT

2 mg/ml牛血清白蛋白（BSA）

可調(diào)節(jié)微量移液器及無菌吸頭

旋轉(zhuǎn)或搖動平臺

能夠測量熒光偏振的熒光微孔板讀取器（λex=470（5 nm帶寬）和在λem=528（10 nm帶寬）處檢測）

靶標：HSP90b

儲存/穩(wěn)定性：當按照指示儲存時，該測定試劑盒在收到之日起6個月內(nèi)表現(xiàn)最佳。

應用：用于研究酶動力學，并在藥物發(fā)現(xiàn)和高通量篩選（HTS）應用中篩選小分子抑制劑。

運輸溫度：-80°C

注意：截至2025年4月，該操作步驟已重新優(yōu)化以提高性能。

僅供研究使用   

檢測結(jié)果示例：

圖：加丹霉素對HSP90β與其配體結(jié)合的抑制作用。

在加丹霉素（#27008）的不同濃度存在下，評估了HSP90β與FITC標記的加丹霉素的結(jié)合情況。使用Bio-Tek熒光微孔板讀取器測量熒光。結(jié)果以活性百分比表示，其中在沒有抑制劑的情況下，結(jié)合活性被設(shè)定為100%。

文獻參考：

Allan R.K., et al., 2006 J. Biol. Chem. 281(11): 7161-71.

Hoter A., et al., 2018 Int J Mol Sci. 19(9):2560.