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SBA克隆分型系統(tǒng)AP試劑盒專為小鼠單克隆抗體的同種型而設(shè)計。它含有2.5毫克的捕獲物抗體和1.0mL AP偶聯(lián)的抗小鼠Ig、小鼠IgA、小鼠IgG1、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b、小鼠IgG3、小鼠IgM,小鼠κ、小鼠λ和pNPP底物。該試劑盒也可用于定量研究樣品中的小鼠免疫球蛋白,如當(dāng)與小鼠免疫球蛋白組(SB目錄號5300-01)結(jié)合使用時,作為血清、上清液和腹水。


艾美捷SouthernBiotech丨SBA克隆分型系統(tǒng)AP試劑盒(5300-04)組成:
山羊抗小鼠Ig,人用ads-UNLB
山羊抗小鼠Ig,人用ads-AP
山羊抗小鼠IgA-AP
山羊抗小鼠IgG1,人用ads-AP
山羊抗小鼠IgG2a,人用ads-AP
山羊抗小鼠IgG2b,人用ads-AP
山羊抗小鼠IgG3,人用ads-AP
山羊抗小鼠IgM,人用ads-AP
山羊抗小鼠Kappa-AP
山羊抗小鼠Lambda-AP
pNPP底物片
處理和儲存:
純化(UNLB)抗體以2.5毫克純免疫球蛋白的形式提供,溶于1.0毫升硼酸緩沖鹽水中,pH值為8.2。未添加防腐劑或含胺的緩沖鹽。儲存于2-8°C。
堿性磷酸酶(AP)偶聯(lián)物以1.0毫升庫存溶液的形式提供,含有50 mM Tris/1 mM MgCl2/50%甘油,pH值為8.0,含有NaN3作為防腐劑。儲存于2-8°C或長期儲存于-20°C。
pNPP底物片以20片×5毫克的形式提供。儲存于2-8°C。避光保存。
如果按照指示儲存,試劑在標(biāo)簽上顯示的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。
建議的同型鑒定方案:
將捕獲抗體稀釋至5-10微克/毫升的濃度,使用硼酸緩沖鹽水(BBS),pH值為8.2或磷酸緩沖鹽水(PBS),pH值為7.4;向ELISA板的每個孔中加入0.1毫升;或者,用于免疫的抗原可以用作包被試劑。
用蓋子或塑料膜覆蓋板子,并在2-8°C的濕潤環(huán)境中至少孵育12小時。
清空孔洞,用含有0.05% Tween 的BBS(或PBS)洗滌3次,清空孔洞,并用含有1%牛血清白蛋白的BBS(BBS/BSA)填充孔洞。
讓抗體包被的板子在室溫下至少放置1小時,以阻斷板上的自由結(jié)合位點。
清空板子并洗滌3次。
向每個孔中加入0.1毫升的雜交瘤上清液,覆蓋板子,并在室溫下輕輕搖動孵育1小時或在2-8°C下過夜。
清空板子并洗滌3次。
將AP標(biāo)記的檢測抗體(s)稀釋至1:250-1:500的比例,在BBS/BSA中加入0.1毫升的偶聯(lián)物到板子的相應(yīng)孔中,覆蓋板子,并在室溫下輕輕搖動孵育1小時或在2-8°C下過夜。
清空板子并洗滌5次。
準(zhǔn)備底物緩沖液 - 向400毫升雙重玻璃蒸餾水中加入24.5毫克MgCl2 6H2O和48毫升二乙醇胺;用5N HCl調(diào)整pH值至9.8,并用蒸餾水補充至500毫升。
準(zhǔn)備1毫克/毫升的底物溶液(例如,一片5毫克的藥片+5毫升底物緩沖液),并向板子的每個孔中加入0.1毫升。
在添加底物后,讀取每個孔的405納米處的光密度。
SouthernBiotech丨SBA克隆分型系統(tǒng)-AP參考文獻:
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SouthernBiotech 致力于高質(zhì)量、高親和純化的二抗的生產(chǎn)、純化和標(biāo)記。 同時,SBA還提供各種親和純化的多克隆和單克隆抗體,其中包括:熒光素和酶標(biāo)記物,低內(nèi)毒素/不含疊氮化物(LE/AF)制劑,F(xiàn)(ab)和 F(ab')2片段化抗體,此外還有純化的免疫球蛋白、血清以及細(xì)胞外基質(zhì)蛋白等產(chǎn)品。艾美捷科技是SouthernBiotech的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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