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SouthernBiotech丨SBA克隆分型系統(tǒng)-AP解決方案

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2024-12-12     
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SBA克隆分型系統(tǒng)AP試劑盒專為小鼠單克隆抗體的同種型而設(shè)計。它含有2.5毫克的捕獲物抗體和1.0mL AP偶聯(lián)的抗小鼠Ig、小鼠IgA、小鼠IgG1、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b、小鼠IgG3、小鼠IgM,小鼠κ、小鼠λ和pNPP底物。該試劑盒也可用于定量研究樣品中的小鼠免疫球蛋白,如當(dāng)與小鼠免疫球蛋白組(SB目錄號5300-01)結(jié)合使用時,作為血清、上清液和腹水。

SouthernBiotech71.png

艾美捷SouthernBiotech丨SBA克隆分型系統(tǒng)AP試劑盒(5300-04)組成:

山羊抗小鼠Ig,人用ads-UNLB

山羊抗小鼠Ig,人用ads-AP

山羊抗小鼠IgA-AP

山羊抗小鼠IgG1,人用ads-AP

山羊抗小鼠IgG2a,人用ads-AP

山羊抗小鼠IgG2b,人用ads-AP

山羊抗小鼠IgG3,人用ads-AP

山羊抗小鼠IgM,人用ads-AP

山羊抗小鼠Kappa-AP

山羊抗小鼠Lambda-AP

pNPP底物片

 

處理和儲存:

純化(UNLB)抗體以2.5毫克純免疫球蛋白的形式提供,溶于1.0毫升硼酸緩沖鹽水中,pH值為8.2。未添加防腐劑或含胺的緩沖鹽。儲存于2-8°C。

堿性磷酸酶(AP)偶聯(lián)物以1.0毫升庫存溶液的形式提供,含有50 mM Tris/1 mM MgCl2/50%甘油,pH值為8.0,含有NaN3作為防腐劑。儲存于2-8°C或長期儲存于-20°C。

pNPP底物片以20片×5毫克的形式提供。儲存于2-8°C。避光保存。

如果按照指示儲存,試劑在標(biāo)簽上顯示的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。

 

建議的同型鑒定方案:

將捕獲抗體稀釋至5-10微克/毫升的濃度,使用硼酸緩沖鹽水(BBS),pH值為8.2或磷酸緩沖鹽水(PBS),pH值為7.4;向ELISA板的每個孔中加入0.1毫升;或者,用于免疫的抗原可以用作包被試劑。

用蓋子或塑料膜覆蓋板子,并在2-8°C的濕潤環(huán)境中至少孵育12小時。

清空孔洞,用含有0.05% Tween 的BBS(或PBS)洗滌3次,清空孔洞,并用含有1%牛血清白蛋白的BBS(BBS/BSA)填充孔洞。

讓抗體包被的板子在室溫下至少放置1小時,以阻斷板上的自由結(jié)合位點。

清空板子并洗滌3次。

向每個孔中加入0.1毫升的雜交瘤上清液,覆蓋板子,并在室溫下輕輕搖動孵育1小時或在2-8°C下過夜。

清空板子并洗滌3次。

將AP標(biāo)記的檢測抗體(s)稀釋至1:250-1:500的比例,在BBS/BSA中加入0.1毫升的偶聯(lián)物到板子的相應(yīng)孔中,覆蓋板子,并在室溫下輕輕搖動孵育1小時或在2-8°C下過夜。

清空板子并洗滌5次。

準(zhǔn)備底物緩沖液 - 向400毫升雙重玻璃蒸餾水中加入24.5毫克MgCl2 6H2O和48毫升二乙醇胺;用5N HCl調(diào)整pH值至9.8,并用蒸餾水補充至500毫升。

準(zhǔn)備1毫克/毫升的底物溶液(例如,一片5毫克的藥片+5毫升底物緩沖液),并向板子的每個孔中加入0.1毫升。

在添加底物后,讀取每個孔的405納米處的光密度。

 

SouthernBiotech丨SBA克隆分型系統(tǒng)-AP參考文獻:

1. Bergen HR 3rd, Losman MJ, O'Connor T, Zacharias W, Larson JE, Accavitti MA, et al. Specificity of monoclonal anti-Z-DNA antibodies from unimmunized MRL/Mp-lpr/lpr mice. J Immunol. 1987;139:743-8. (ELISA - Isotyping)

2. Hrdli ková R, Nehyba J, Humphries EH. v-rel induces expression of three avian immunoregulatory surface receptors more efficiently than c-rel. J Virol.

1994;68:308-19. (ELISA - Isotyping)

3. Hong JS, Engler JA. Domains required for assembly of adenovirus type 2 fiber trimers. J Virol. 1996;70:7071-8. (ELISA - Isotyping)

4. Beier RC, Ripley LH, Young CR, Kaiser CM. Production, characterization, and cross-reactivity studies of monoclonal antibodies against the coccidiostat nicarbazin. J Agric Food Chem. 2001;49:4542-52. (ELISA - Isotyping)

5. Itoh T, Yoshida M, Chiba T, Kita T, Wakatsuki Y. A coordinated cytotoxic effect of IFN-γ and cross-reactive antibodies in the pathogenesis of Helicobacter pylori gastritis. Helicobacter. 2003;8:268-78. (ELISA - Isotyping)

6. Beelen R, Boyd B, Garavello JC, Pavanelli GC, Ainsworth AJ. Generation, characterisation and applicability of a monoclonal antibody to hybrid surubim catfish Pseudoplatystoma corruscans (Agassiz) × Pseudoplatystoma fasciatum (Linnaeus) immunoglobulin. Comp Clin Path. 2004;12:191-8. (ELISA - Isotyping)

7. Moore-Lai D, Rowland E. Discovery and characterization of an antibody, anti-egressin, that is able to inhibit Trypanosoma cruzi egress in vitro. J Parasitol.

2004;90:524-30. (ELISA - Isotyping)

 

SouthernBiotech 致力于高質(zhì)量、高親和純化的二抗的生產(chǎn)、純化和標(biāo)記。  同時,SBA還提供各種親和純化的多克隆和單克隆抗體,其中包括:熒光素和酶標(biāo)記物,低內(nèi)毒素/不含疊氮化物(LE/AF)制劑,F(xiàn)(ab)和 F(ab')2片段化抗體,此外還有純化的免疫球蛋白、血清以及細(xì)胞外基質(zhì)蛋白等產(chǎn)品。艾美捷科技是SouthernBiotech的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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