PDE4AIsoform4檢測試劑盒是一種熒光偏振（FP）均相96孔板檢測試劑盒，專為篩選和鑒定PDE4AIsoform4（磷酸二酯酶4AIsoform4）抑制劑而設(shè)計。該檢測利用了一種特異性的熒光磷酸鹽結(jié)合納米顆粒。試劑盒包含足夠用于100次反應(yīng)的純化重組PDE4AIsoform4、熒光探針、PDE檢測緩沖液、結(jié)合劑和稀釋液。

檢測中使用了帶有熒光素標(biāo)記的環(huán)磷酸腺苷（cAMP-FAM，用于PDE4A），其中磷酸基團(tuán)嵌入在環(huán)核苷酸中。這是一個非常小的分子，旋轉(zhuǎn)速度快（熒光偏振值低）。PDE4AIsoform4催化環(huán)核苷酸中磷酸二酯鍵的水解，釋放出磷酸基團(tuán)。在第二步中，自由的磷酸基團(tuán)被一種特異性的磷酸鹽結(jié)合納米珠（結(jié)合劑）識別，形成一個大復(fù)合物，其運動受限（熒光偏振值高）。熒光偏振值與PDE4AIsoform4的活性成正比。

艾美捷BPS Bioscience-PDE4A1A檢測試劑盒：

貨號：60340

同義詞：抑制劑篩選、檢測試劑盒、PDE4A、PDE4-A1A、PDE

試劑盒格式：熒光偏振

物種：人

所需材料（但未提供）：

-可調(diào)節(jié)微量移液器及無菌吸頭

-旋轉(zhuǎn)或搖動平臺

-能夠測量熒光偏振的熒光微孔板讀取器（激發(fā)波長λex=470nm，帶寬5nm；發(fā)射波長λem=528nm，帶寬10nm）

靶點：PDE4AIsoformA

儲存/穩(wěn)定性：按照說明儲存時，該試劑盒在收到之日起6個月內(nèi)表現(xiàn)最佳。

應(yīng)用：用于研究酶動力學(xué)以及在高通量篩選（HTS）應(yīng)用中篩選小分子抑制劑以發(fā)現(xiàn)藥物。

運輸溫度：-80°C

僅限研究使用

禁忌事項：

-檢測中DMSO的最終濃度不應(yīng)超過1%。

-熒光化合物可能會根據(jù)其光譜激發(fā)和發(fā)射特性干擾結(jié)果。

-建議單獨測試化合物以確定其對檢測結(jié)果的潛在干擾。

檢測結(jié)果示例：

圖：PDE4A在200nMFAM-Cyclic-3',5'-AMP底物存在下與Roflumilast的不同濃度共同孵育。使用TecanM1000熒光微孔板讀取器測量熒光偏振。結(jié)果以活性百分比表示，其中在沒有抑制劑（陽性對照）的情況下，F(xiàn)P值設(shè)為100%。

文獻(xiàn)參考：

Ahmed W., et al., 2021 Biomedicine & Pharmacotherapy 134:111128.

Huang W., et al., 2020 Nat Commun 11:3191.