重組表達(dá)載體設(shè)計(jì)用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)人工程 T 細(xì)胞受體 (TCR) 激活劑和人 PD-L2（GenBank 登錄號 #NM_025239）。轉(zhuǎn)染細(xì)胞可與 PD-1/NFAT Reporter/Jurkat T 細(xì)胞 (BPS #60535) 結(jié)合使用，研究細(xì)胞環(huán)境中 PD-1 與 PD-L2 配體的相互作用，并篩選該信號通路的調(diào)節(jié)劑。

在此測定中，PD-1/NFAT Reporter/Jurkat T 細(xì)胞用作效應(yīng)細(xì)胞；過表達(dá) PD-L1（或 PD-L2）和工程 T 細(xì)胞受體 (TCR) 激活劑的 HEK293 細(xì)胞用作靶細(xì)胞。當(dāng)這兩種細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，效應(yīng)細(xì)胞上的 TCR 復(fù)合物被靶細(xì)胞上的 TCR 激活劑激活，導(dǎo)致 NFAT 熒光素酶報(bào)告基因的表達(dá)。然而，PD1 和 PD-L1 或 PD-L2 連接會(huì)阻止 TCR 激活并抑制 NFAT 響應(yīng)性熒光素酶活性。這種抑制可以被抗 PD1 或抗 PD-L1 抗體特異性逆轉(zhuǎn)。PD1、PD-L1 或 PD-L2 中和抗體可阻斷 PD1:PD-L1 和/或 PD1:PD-L2 相互作用并促進(jìn) T 細(xì)胞激活，從而導(dǎo)致 NFAT 響應(yīng)性熒光素酶報(bào)告基因重新激活。

艾美捷PD-L2/TCR激活劑哺乳動(dòng)物表達(dá)試劑盒：

貨號：60620

英文名稱：PD-L2/TCR Activator Mammalian Expression Kit   

規(guī)格：500 rxns.

同義詞：程序性細(xì)胞死亡 2 配體 2、PDL2、PD-L2、CD273、PDCDL1G2、B7-DC

物種：人類

儲(chǔ)存/穩(wěn)定性：按照指示保存時(shí)，自收到之日起至少可穩(wěn)定 6 個(gè)月。

運(yùn)輸溫度：-20℃，避免冷凍/解凍循環(huán)。

需要但未提供的材料：

? HEK293 細(xì)胞及其生長培養(yǎng)基或其他細(xì)胞系

? 用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染試劑

? PD-1/NFAT 報(bào)告 Jurkat T 細(xì)胞（BPS 目錄號 #60535）

? Opti-MEM I 低血清培養(yǎng)基（life Technologies #31985-062）

?解凍培養(yǎng)基 2：RPMI1640 + 10% FBS + 1% 青霉素/鏈霉素（BPS 貨號#60184）

?抗 PD-1 中和抗體（BPS 貨號#71120）

?抗 PD-L1 中和抗體（BPS 貨號#71213）

? 96 孔組織培養(yǎng)處理的白色透明底檢測板

?一步式熒光素酶檢測系統(tǒng)（BPS 目錄號# 60690）或其他用于測量螢火蟲熒光素酶活性的熒光素酶試劑 ? 發(fā)光計(jì)

PD-L2/TCR激活劑哺乳動(dòng)物表達(dá)試劑盒組分：

BPS bioscience總部坐落于世界最大之一的美國圣地亞哥生命科學(xué)研究機(jī)構(gòu)和公司集中地的中心。公司主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶。BPS公司為藥物研發(fā)用重組酶類的提供了最大選擇之一。