Cayman的Caspase-3/7細(xì)胞活性檢測試劑盒提供了一種方便的方法來檢測細(xì)胞裂解物中caspase-3和caspase-7的活性。使用caspase-3/7特異性底物N-Ac-DEVD-AFC監(jiān)測活性。活性酶的裂解作用會產(chǎn)生一種高熒光產(chǎn)物，可以使用400納米的激發(fā)波長和505納米的發(fā)射波長進(jìn)行測量。試劑盒中包含活性caspase-3作為陽性對照，還含有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的staurosporine。caspase-3/7抑制劑N-Ac-DEVD-CHO作為對照，以確認(rèn)熒光信號對酶活性的特異性。

需要但未提供的：請下載試劑盒手冊，以驗(yàn)證是否需要超純水（Milli-Q或等效物）或其他任何組分進(jìn)行此檢測。

警告：本產(chǎn)品不適用于人類或獸醫(yī)用途。

艾美捷Cayman Chemical血清鐵測定試劑盒：

貨號：702790

同義詞：Apopain、Apoptotic Protease Mch-3、CASP-3/7、CMH-1、Cysteine Protease CPP32、ICE-LAP3、ICE-like Apoptotic Protease 3、Protein Yama、SCA-1、SREBP Cleavage Activity 1

發(fā)射：505納米

激發(fā)：400納米

儲存：-80°C

運(yùn)輸：在美國本土使用干冰運(yùn)輸；其他地區(qū)可能有所不同

穩(wěn)定性：≥ 1年

執(zhí)行檢測：

最佳的種植密度將取決于細(xì)胞類型和處理時(shí)間。過度擁擠的細(xì)胞可能導(dǎo)致高非特異性熒光。建議對所有測試化合物包括可選的用Staurosporine凋亡誘導(dǎo)劑處理，都包含適當(dāng)?shù)膶φ战M。

1. 在96孔板中培養(yǎng)細(xì)胞，并按照典型的實(shí)驗(yàn)程序用測試化合物和對照組進(jìn)行處理。每種處理都要進(jìn)行六次重復(fù)，其中三個(gè)結(jié)果的細(xì)胞裂解物將被加入到樣本孔中，另外三個(gè)加入到樣本+抑制劑孔中。

a. 建議在實(shí)驗(yàn)中使用前，將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)至80%的密度。

b. 建議在實(shí)驗(yàn)中使用前，將懸浮細(xì)胞的密度培養(yǎng)至5x10?至5x10?。

2. 以800 x g的速度離心板5分鐘，并小心地吸去培養(yǎng)基。

3. 用200μl/孔的基于細(xì)胞的檢測緩沖液輕輕洗滌細(xì)胞。

4. 以800 x g的速度離心板5分鐘，并小心地吸去緩沖液。

5. 向每個(gè)孔中加入100μl的基于細(xì)胞的檢測裂解緩沖液。

6. 在室溫下，用軌道搖床輕輕搖晃孵育30分鐘。

性能特征分析：

文獻(xiàn)參考：

1.Cohen,G.M.Caspases:The executioners ofapoptosis.Biochem.J.326(Pt 1),

1-16(2007).

2.Mcllwain,D.R,Berger,T,and Mak,TW.Caspase functions in cell death anddisease.Cold Spring Harb.Perspect.Biol.5(4),a008656(2013).

3.Sun,G.Death and survival from executioner caspase activation.Semin.CellDev.Biol.156,66-73(2024).

4.Sahoo,G.,Samal,D.,Khandayataray,P,et al.A review on caspases:Keyregulators of biological activities and apoptosis.Mol.Neurobiol.60(10),5805-5837(2023).

艾美捷科技是Cayman Chemical的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。