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在現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)研究中,免疫熒光技術(shù)已成為檢測(cè)特定蛋白表達(dá)、定位和相互作用的重要工具。作為這一技術(shù)的核心材料之一,二抗的選擇至關(guān)重要。其中,Alexa Fluor 647-conjugated AffiniPure Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L) (min X Bov,Ck,Gt,Sy Hms,Hrs,Hu,Ms,Rb,Rat,Shp Sr Prot) 是一款性能卓越、應(yīng)用廣泛的熒光標(biāo)記二抗,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)等多個(gè)研究領(lǐng)域。
該產(chǎn)品由Jackson公司生產(chǎn),貨號(hào)為JAC-706-605-148,由艾美捷科技代理。其獨(dú)特的設(shè)計(jì)與優(yōu)良的性能使其成為科研人員的理想選擇。
一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Alexa Fluor 647是一種高性能的熒光染料,具有出色的光穩(wěn)定性、強(qiáng)熒光強(qiáng)度和良好的水溶性,適用于多種熒光成像系統(tǒng)。AffiniPure是Jackson公司專為提高抗體純度和特異性而開(kāi)發(fā)的一套技術(shù),通過(guò)精細(xì)的親和層析技術(shù),去除了可能引起非特異性結(jié)合的雜質(zhì),從而顯著提升了抗體的信噪比和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
本產(chǎn)品為驢源抗豚鼠IgG(H+L),即針對(duì)豚鼠IgG的重鏈和輕鏈進(jìn)行特異性識(shí)別。其“最小交叉反應(yīng)”(min X)特性表明,該抗體經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選,對(duì)包括牛、雞、羊、兔、豬、馬、小鼠、大鼠、山羊等在內(nèi)的多種物種的IgG具有極低的交叉反應(yīng)性,確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的高度特異性。
二、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 高靈敏度與強(qiáng)熒光信號(hào)
Alexa Fluor 647作為一種紅色熒光染料,發(fā)射波長(zhǎng)約為668 nm,適合與多種其他熒光探針(如FITC、PE、Cy3等)進(jìn)行多色標(biāo)記。其高量子產(chǎn)率和強(qiáng)熒光強(qiáng)度使得即使在低濃度下也能獲得清晰的信號(hào),極大提高了檢測(cè)靈敏度。
2. 優(yōu)秀的特異性
AffiniPure技術(shù)的應(yīng)用顯著減少了非特異性結(jié)合,使該二抗在復(fù)雜的樣本中仍能保持高度的靶向性。尤其在使用多克隆抗體時(shí),這種特性尤為重要,因?yàn)槎嗫寺】贵w往往存在一定的非特異性結(jié)合風(fēng)險(xiǎn)。
3. 廣泛的適用性
由于其“最小交叉反應(yīng)”特性,該產(chǎn)品可廣泛用于多種動(dòng)物來(lái)源的一抗,如豚鼠、小鼠、大鼠、兔、山羊、牛、豬、馬等。這意味著研究人員可以在同一實(shí)驗(yàn)中使用不同物種來(lái)源的一抗,而不必?fù)?dān)心二抗的交叉反應(yīng)問(wèn)題,大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
4. 穩(wěn)定性強(qiáng),易于保存
Alexa Fluor 647具有優(yōu)異的光穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性,使得該二抗在長(zhǎng)期儲(chǔ)存或多次使用過(guò)程中仍能保持良好的性能。此外,其水溶性良好,便于在各種緩沖液中使用,適應(yīng)多種實(shí)驗(yàn)條件。
三、應(yīng)用場(chǎng)景
1. 免疫熒光顯微鏡(IF)
在細(xì)胞或組織切片中,利用Alexa Fluor 647標(biāo)記的二抗可以實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白的精確定位。其強(qiáng)熒光信號(hào)和高特異性使得研究人員能夠清晰地觀察到細(xì)胞內(nèi)特定蛋白的分布情況,有助于揭示其功能和調(diào)控機(jī)制。
2. 流式細(xì)胞術(shù)(FCM)
在流式細(xì)胞術(shù)中,該二抗可用于標(biāo)記細(xì)胞表面或胞內(nèi)蛋白,幫助研究人員分析細(xì)胞群體中的分子表達(dá)水平。其良好的熒光特性與低背景噪聲使其成為流式實(shí)驗(yàn)中的理想選擇。
3. 蛋白質(zhì)印跡(Western Blot)
雖然二抗主要用于免疫熒光,但在某些情況下也可用于蛋白質(zhì)印跡。該產(chǎn)品在Western Blot中同樣表現(xiàn)出良好的特異性和靈敏度,適用于多種樣品類型。
4. 多色標(biāo)記實(shí)驗(yàn)
由于Alexa Fluor 647的發(fā)射波長(zhǎng)與其他常見(jiàn)熒光染料(如FITC、PE、Cy5)不重疊,因此非常適合用于多色標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。研究人員可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)蛋白,提高實(shí)驗(yàn)效率和數(shù)據(jù)豐富性。
四、使用建議
在使用該產(chǎn)品時(shí),建議根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整稀釋比例。通常推薦起始稀釋比例為1:200至1:1000,具體可根據(jù)實(shí)際信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)行優(yōu)化。同時(shí),應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于強(qiáng)光下,以防止熒光淬滅。
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,建議使用適當(dāng)?shù)姆忾]劑(如BSA或血清)來(lái)減少非特異性結(jié)合,提高信號(hào)的特異性。此外,每次使用后應(yīng)妥善保存,避免反復(fù)凍融,以延長(zhǎng)產(chǎn)品的使用壽命。
Alexa Fluor 647-conjugated AffiniPure Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L) (min X Bov,Ck,Gt,Sy Hms,Hrs,Hu,Ms,Rb,Rat,Shp Sr Prot) 是一款集高靈敏度、強(qiáng)特異性與廣泛應(yīng)用性于一體的優(yōu)質(zhì)二抗產(chǎn)品。其卓越的性能不僅提升了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性,也為研究人員提供了更高效、更便捷的研究工具。
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