LIVE Step?細胞檢測系統(tǒng)專為高通量、均勻、靈敏的發(fā)光定量代謝活性活哺乳動物細胞而設計。它由一種即用型溶液組成，可一步裂解細胞并測量培養(yǎng)物中存在的ATP量。檢測在>100000個懸浮細胞和>50000個貼壁細胞之間呈線性，R2值大于0.99。信號穩(wěn)定時間超過5小時（T1/2>300分鐘），允許實驗靈活性。該產(chǎn)品與多種介質(zhì)配方和酚紅的存在相容，在多次凍融循環(huán)后穩(wěn)定。

圖1:ATP存在下的螢光素活性。

在Mg2+、O2和ATP存在下，從裂解的代謝活性細胞釋放的熒光素會產(chǎn)生發(fā)光信號。產(chǎn)生的信號與裂解前培養(yǎng)物中存在的代謝活性活細胞的數(shù)量成正比。

艾美捷LIVE-Step細胞活力檢測試劑盒：

貨號：82648

同義詞：細胞活性試劑盒、細胞活性測定、熒光素酶

未提供但需要的材料

與所使用的儀器兼容的透明底部白色多孔組織培養(yǎng)板

感興趣的哺乳動物細胞培養(yǎng)

細胞培養(yǎng)基

旋轉搖床

熒光素酶測定儀

ATP溶液（可選）

儲存/穩(wěn)定性：

如果按照說明儲存材料，試劑在收到后6個月內(nèi)將表現(xiàn)最佳。首次解凍后，分裝儲存于-20°C。試劑可以經(jīng)受幾次凍融循環(huán)而不影響功能，但建議盡可能避免凍融循環(huán)。

應用：

使用標準曲線，通過測定ATP水平來確定哺乳動物培養(yǎng)中代謝活躍、存活的細胞值。

運輸溫度：-80°C

禁忌癥：

培養(yǎng)中有機溶劑或其他化合物的存在可能導致熒光素酶抑制并影響讀數(shù)。

如果使用有機溶劑或其他化合物，建議先進行初步測試以確定化合物單獨的影響。例如，準備一個反應包含LIVE-Step?細胞測定溶液、1 ?M ATP和用于準備化合物的稀釋試劑，以及一個反應包含LIVE-Step?細胞測定溶液、1 ?M ATP和感興趣的化合物在稀釋試劑中的最大濃度。如果觀察到信號減少，可能需要對化合物進行滴定，以評估無影響的值，或?qū)γ總€測試濃度使用對照。

建議不要使用板的邊緣孔，以避免可能影響信號的溫度梯度。

在進行測定時使用無菌技術，避免在培養(yǎng)基中添加細胞外ATP，以避免ATP污染。

避免在儲存過程中將試劑暴露于光線和過度熱量。

LIVE-Step細胞活力檢測試劑盒相關產(chǎn)品：

ONE-Step? Luciferase Assay System

TWO-Step Luciferase (Firefly & Renilla) Assay System

In Vivo-Luc? Imaging Solution

Luciferase, His-Tag (Firefly) Recombinant