降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）是一種強效的血管擴張劑，同時也引發(fā)多種其他生物效應(yīng)。

在正常人群中，CGRP的平均血漿水平報告為0.8 pmol/L至71 pmol/L（3 pg/mL至269 pg/mL）。在進(jìn)行血液透析、懷孕、哮喘加重以及髓樣甲狀腺癌病例中，觀察到了循環(huán)CGRP水平的增加。

酶免疫測定（EIA）是一種檢測和定量樣本中抗原（蛋白質(zhì)、激素等）或抗體的技術(shù)。它依賴于抗體結(jié)合特定抗原的能力。

艾美捷Bertin Instruments-RCGRP（人）ELISA試劑盒（A05481）檢測原理：

酶聯(lián)免疫分析（EIA/ELISA）基于一種夾心技術(shù)。提供的試劑盒孔板被涂覆有特異性單克隆抗體，以捕捉降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）。引入孔板中的CGRP（標(biāo)準(zhǔn)品或樣本）與涂覆在板上的單克隆抗體結(jié)合，然后通過特異性針對CGRP的乙酰膽堿酯酶（AChE）-Fab’偶聯(lián)物進(jìn)行檢測。

這兩種抗體通過結(jié)合在CGRP的不同表位上形成一個夾心結(jié)構(gòu)。夾心結(jié)構(gòu)固定在孔板上，剩余的試劑被洗去。CGRP的濃度通過測量固定標(biāo)記物的酶活性來確定，使用Ellman試劑。AChE標(biāo)記物與Ellman試劑反應(yīng)生成一種在405 nm或414 nm處強烈吸收的黃色化合物。

顏色的強度通過分光光度法進(jìn)行測定，與免疫反應(yīng)過程中孔內(nèi)存在的CGRP的量成正比。

所需材料和設(shè)備：

除了標(biāo)準(zhǔn)實驗室設(shè)備外，還需要以下材料：

樣本準(zhǔn)備（并非所有樣本類型都需要）：

C-18反相色譜柱或Oasis? HLB提取柱

甲醇

醋酸

檢測所需：

精密微量移液器（20至1000 μL）

分光光度計讀板儀（405 nm或414 nm濾光片）

微孔板洗滌機（或洗滌瓶）

搖床微孔板

多通道移液器及一次性吸頭（30-300 ?L）

UltraPure水 #A07001.1L

聚丙烯管

用于制備所有ELISA試劑和緩沖液的水必須是UltraPure水（去離子水且不含有機污染物痕跡）。

請勿使用蒸餾水、HPLC級水或滅菌水。

典型的CGRP（人）標(biāo)準(zhǔn)曲線：

Bertin Instruments 典型的RCGRP（人）ELISA試劑盒參考文獻(xiàn)：

1. Grassi J. & Pradelles Ph.Compounds labelled by the acetylcholinesterase of Electrophorus electricus. Its preparation process and its use as a tracer or marquer in enzymo-immunological determinations.

United States patent, N° 1,047,330. September 10, 1991

2. J. Grassi and P. Pradelles The use of Acetylcholinesterase as a Universal marker in Enzyme-Immunoassays

Proceedings of the Third International Meeting on Cholinesterases, American Chemical Society (1991)

3. Philippe Pradelles, Jacques Grassi, and Jacques Maclouf Enzyme Immunoassays of Eicosanoids Using

Acetylcholinesterase Methods in enzymology, vol. 187, p24, 1990

艾美捷科技是Bertin Instruments的特約合作代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。