一、產(chǎn)品概述

PML（早幼粒細(xì)胞白血病蛋白）是一種多功能蛋白，屬于RBCC/TRIM家族成員，具有RING指結(jié)構(gòu)域、B-box和卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域。PML參與腫瘤生長(zhǎng)抑制、造血分化、基因轉(zhuǎn)錄、凋亡誘導(dǎo)及病毒免疫等多種生物學(xué)過(guò)程。PML基因常與視黃酸受體α基因發(fā)生染色體易位，形成的PML-視黃酸受體融合蛋白與急性早幼粒細(xì)胞白血病的發(fā)生密切相關(guān)。

本文介紹的由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的兔抗PML抗體（親和純化）（貨號(hào)：A301-167A）是一款針對(duì)人源PML蛋白的高特異性多克隆抗體，適用于免疫組化、免疫沉淀和免疫印跡等多種應(yīng)用場(chǎng)景。

二、產(chǎn)品規(guī)格

參數(shù) 詳細(xì)信息

靶標(biāo) PML

反應(yīng)種屬 人

宿主 兔

克隆類型 多克隆

抗體形式 完整IgG

免疫原 PML蛋白400-450位氨基酸區(qū)域內(nèi)的表位（具體映射至NP_150241.2編號(hào)下殘基375-425之間）

同種型 IgG

偶聯(lián)物 未偶聯(lián)

純度 抗原親和純化

抗原種屬 人

濃度 200 ug/mL

儲(chǔ)存條件 2–8°C

保質(zhì)期 自收到之日起1年

緩沖液 Tris緩沖鹽水，含0.1% BSA及0.09% 疊氮化鈉 |

生產(chǎn)流程 使用固定在固相載體上的PML特異性表位進(jìn)行親和純化 |

濃度測(cè)定方法：采用比爾定律測(cè)定免疫球蛋白濃度，其中1 mg/mL IgG在A280下的吸光度為1.4。

三、推薦應(yīng)用與實(shí)驗(yàn)條件

本抗體經(jīng)驗(yàn)證可用于以下三種應(yīng)用類型，推薦稀釋比例及關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)條件如下。

3.1 免疫印跡（Western Blot, WB）

推薦稀釋范圍：1:2,000 – 1:10,000

封閉及抗體稀釋液：5% 牛奶-TBST

一抗孵育條件：過(guò)夜孵育

二抗選擇：

檢測(cè)細(xì)胞裂解液：使用山羊抗兔IgG（重鏈+輕鏈）抗體（貨號(hào)A120-101P）

檢測(cè)免疫沉淀樣品：使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯(lián)抗體，封閉緩沖液中需添加5%正常豬血清（貨號(hào)S100-020）

3.2 免疫組化（Immunohistochemistry, IHC）

推薦稀釋范圍：1:500 – 1:2,000

抗原修復(fù)：推薦使用pH 6.0的檸檬酸緩沖液進(jìn)行熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)（適用于福爾馬林固定、石蠟包埋組織切片）

3.3 免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）

推薦用量：6 ug 抗體 / mg 細(xì)胞裂解物總蛋白

四、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性

儲(chǔ)存溫度：2–8°C

有效期：自收到之日起1年內(nèi)，按照指示條件儲(chǔ)存可保持最佳性能

緩沖液成分說(shuō)明：含0.09%疊氮化鈉作為防腐劑。請(qǐng)注意，疊氮化鈉會(huì)干擾某些酶標(biāo)記檢測(cè)系統(tǒng)（如HRP），若后續(xù)使用HRP偶聯(lián)二抗，需在實(shí)驗(yàn)前通過(guò)透析或脫鹽去除疊氮化鈉

避免反復(fù)凍融：建議分裝保存，避免多次凍融導(dǎo)致抗體活性下降

五、背景信息

5.1 PML蛋白的結(jié)構(gòu)與功能

PML（早幼粒細(xì)胞白血病蛋白）是RBCC/TRIM家族成員，其結(jié)構(gòu)特征包括：

RING指結(jié)構(gòu)域：介導(dǎo)蛋白-蛋白相互作用及E3泛素連接酶活性

B-box結(jié)構(gòu)域：參與鋅離子結(jié)合和蛋白折疊

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域：介導(dǎo)同源或異源二聚體形成

PML在細(xì)胞核內(nèi)形成名為“PML核體”的亞核結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)是多種信號(hào)通路的整合平臺(tái)。PML參與以下關(guān)鍵生物學(xué)過(guò)程：

腫瘤生長(zhǎng)抑制

造血細(xì)胞分化

基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控（作為轉(zhuǎn)錄共調(diào)節(jié)因子）

凋亡誘導(dǎo)

抗病毒免疫應(yīng)答

5.2 PML與疾病的關(guān)系

急性早幼粒細(xì)胞白血病：PML基因與視黃酸受體α基因發(fā)生染色體易位t(15;17)(q24;q21)，產(chǎn)生PML-RARA融合蛋白。該融合蛋白干擾正常PML核體形成及視黃酸信號(hào)通路，導(dǎo)致早幼粒細(xì)胞分化阻滯和惡性增殖。全反式維甲酸和三氧化二砷可通過(guò)靶向降解PML-RARA融合蛋白實(shí)現(xiàn)治療作用。

其他疾病：PML功能異常也見(jiàn)于實(shí)體瘤、自身免疫性疾病及病毒感染等病理狀態(tài)。