Helixyte?Green dsDNA定量檢測試劑盒可用于在ssDNA、RNA和游離核苷酸存在的情況下選擇性檢測低至25 pg/ml的dsDNA。Helixyte?Green在與dsDNA結(jié)合后表現(xiàn)出顯著的熒光增強(qiáng)。該檢測方法在三個數(shù)量級上呈線性，序列依賴性很小，使您能夠準(zhǔn)確測量來自許多來源的DNA，包括基因組DNA、病毒DNA、迷你制備DNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。Helixyte?Green dsDNA定量分析試劑盒的靈敏度比紫外吸光度讀數(shù)高幾個數(shù)量級。它在等摩爾量的RNA存在下對dsDNA具有特異性。該試劑盒具有強(qiáng)大的混合讀取格式，與96孔和384孔熒光微孔板閱讀器兼容。它也可以與臺式熒光計(jì)或手持式熒光計(jì)（如Qubit熒光計(jì)）一起使用。

艾美捷Helixyte綠色熒光dsDNA定量試劑盒：

貨號：AAT-17650

單位大小：200 測試

目錄編號：17650

激發(fā)（納米）：

502

發(fā)射（納米）：

522

H-短語：H303, H313, H340

危險(xiǎn)符號：T

預(yù)期用途：僅限研究使用（RUO）

R-短語：R20, R21, R68

UNSPSC：41116134

激發(fā)：490 納米

發(fā)射：525 納米

截止：515 納米

推薦板：實(shí)心黑色

組分：

組分 A：Helixyte Green?    1 瓶（100 ?L，DMSO 中 200X）

組分 B：測定緩沖液    1 瓶（50 mL）

組分 C：牛胸腺DNA標(biāo)準(zhǔn)   1 瓶（200 ?L，100 ?g/mL）

協(xié)議概要：

加入 100 ?L dsDNA 標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣本

加入 100 ?L Helixyte Green? 工作溶液

在室溫下孵化 5-10 分鐘

在 Ex/Em=490/525 納米監(jiān)測熒光

重要說明：

以下是一個使用 Helixyte Green? 量化 dsDNA 的示例協(xié)議。在打開之前，請讓所有組分升至室溫。目前沒有數(shù)據(jù)涉及 Helixyte Green?dsDNA 染色劑的致突變性或毒性。由于這種試劑與核酸結(jié)合，應(yīng)將其視為潛在的致突變物，并進(jìn)行適當(dāng)處理。DMSO 庫存溶液應(yīng)特別小心處理，因?yàn)?nbsp;DMSO 已知能促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。

dsDNA 標(biāo)準(zhǔn)：

將 2 ?L 的 100 ?g/mL dsDNA 庫存溶液（組分 C）加入到 198 ?L 的測定緩沖液（組分 B）中，以獲得 1 ?g/mL dsDNA 溶液，然后進(jìn)行 1:2 連續(xù)稀釋以獲得連續(xù)稀釋的 dsDNA 標(biāo)準(zhǔn)（DS7 - DS1）。

工作溶液的準(zhǔn)備：

通過將 50 ?L 的 Helixyte Green?（組分 A）加入到 10 mL 的測定緩沖液（組分 B）中來準(zhǔn)備 Helixyte Green? 工作溶液。用箔紙覆蓋或?qū)⑵渲糜诎堤幰员Ｗo(hù)工作溶液不受光線影響。注意：建議在塑料容器而不是玻璃容器中準(zhǔn)備此溶液，因?yàn)槿玖峡赡軙降讲ＡП砻妗榱双@得最佳結(jié)果，應(yīng)在制備后幾小時(shí)內(nèi)使用此溶液。

圖：使用Helixyte Green?（藍(lán)色）和Invitrogen?Quant-iT?PicoGreen?dsDNA試劑（紅色）比較dsDNA劑量反應(yīng)。dsNDA標(biāo)準(zhǔn)品在試管中孵育，并使用varian cary eclipse熒光分光光度計(jì)進(jìn)行測量。

Helixyte綠色熒光dsDNA定量試劑盒文獻(xiàn)參考：

Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay

Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.

Journal: J Biomol Screen (2013): 247

Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures

Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.

Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444

Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding

Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.

Journal: Biophys J (2010): 3010

Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine

Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.

Journal: Parasitol Res (2010): 933

Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation

Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.

Journal: J Immunol Methods (2010): 95