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在過去的二十年中,SARS和MERS冠狀病毒作為全球健康問題出現(xiàn),導(dǎo)致嚴(yán)重的急性呼吸綜合征。2019年12月,在中國湖北省武漢市發(fā)現(xiàn)了一種新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)。SARS-CoV基因組編碼幾種蛋白酶,包括木瓜樣蛋白酶1(PLP1;PLPro);這種關(guān)鍵酶與3CL蛋白酶和PLP2(PLPro2)一起,通過將一個(gè)大的病毒多肽加工成功能酶,推動(dòng)感染的早期階段。SARS-CoV PLPro與SARS-CoV-2的PLPro有82%的同源性。因此,這種針對(duì)SARS-CoV PLPro的抗體是檢測(cè)SARS-CoV-2表達(dá)的PLPro的有價(jià)值診斷工具。
艾美捷PLPro多克隆抗體:
貨號(hào):AB602
物種交叉反應(yīng)性:SARS-CoV(檢測(cè)重組PLPro為35 kDa蛋白)
宿主:雞
應(yīng)用:Western Blotting(推薦抗體稀釋度1 ug/ml)
緩沖液:含10%甘油的磷酸鹽緩沖液
儲(chǔ)存:-20°C保存。不要分裝抗體。
免疫
通過用重組蛋白SARS-CoV PLPro免疫雞來產(chǎn)生多克隆抗體,該蛋白對(duì)應(yīng)于PLPro的1-315位殘基。抗體從蛋黃中純化。

將指示蛋白(100 ng)在10-20%梯度SDS-PAGE凝膠上分離,并轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上。用抗PLPro(1 μg/ml)探針檢測(cè),并使用兔抗雞HRP偶聯(lián)抗體和化學(xué)發(fā)光進(jìn)行可視化。分子量標(biāo)記在左側(cè)標(biāo)明。
文獻(xiàn)參考:
1. Wang D, Hu B, Hu C, et al. Clinical Characteristics of 138 Hospitalized Patients With 2019 Novel
Coronavirus–Infected Pneumonia in Wuhan, China. JAMA. 2020;323(11):1061.
2. Zhou P, Yang X-L, Wang X-G, et al. A pneumonia outbreak associated with a new coronavirus of
probable bat origin. Nature. 2020;579(7798):270–273.
3. Zhu N, Zhang D, Wang W, et al. A Novel Coronavirus from Patients with Pneumonia in China, 2019. N.Engl. J. Med. 2020;382(8):727–733.
4. Hilgenfeld R. From SARS to MERS: crystallographic studies on coronaviral proteases enable antiviral drug design. FEBS J. 2014;281(18):4085–4096.
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