Apricell 3 合 1 板是一種水凝膠插入物，可安裝在六孔板的每個孔中。該插入物將球體/類器官形成、細(xì)胞外基質(zhì)整合和藥物測試全部結(jié)合在一個平臺上。水凝膠預(yù)先插入標(biāo)準(zhǔn)六孔板的每個孔中。每個插入物包含 4 個象限，允許每個象限形成 6 個球體/類器官。六孔板可用于 144 個球體/類器官。每個象限彼此分開，因此研究人員可以在一個插入件上運(yùn)行 4 種不同的實驗條件。該水凝膠是一種非細(xì)胞粘附性水凝膠。該板具有無干擾介質(zhì)更換的優(yōu)點，消除了更換介質(zhì)時吸入或破壞球體的風(fēng)險。此外，該板還可以進(jìn)行原位 IHC 分析。研究人員可以執(zhí)行 IHC 分析的所有步驟——從脫水到蠟包埋和切片——而無需從平臺上取出球體。

艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Advanced BioMatrix熱銷產(chǎn)品Apricell 3 合 1 板，6 孔板，帶 6 個水凝膠插入物，用于球狀體和類器官培養(yǎng)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

接種方案：

1- 細(xì)胞接種和球體形成*根據(jù)您期望的球體大小和微孔直徑，每個象限中接種的細(xì)胞數(shù)量可以在50K到350K細(xì)胞之間變化。可能需要優(yōu)化接種細(xì)胞數(shù)量。每次接種可以產(chǎn)生六個球體或器官樣體。該方案經(jīng)過優(yōu)化，適用于癌細(xì)胞球體*

1-1- 在層流罩內(nèi)使用無菌技術(shù)，打開密封袋，在插入物的每個隔間的細(xì)胞/ECM加載區(qū)（圖1）中加入25微升培養(yǎng)基。

1-2- 2分鐘后，在每個插入物的細(xì)胞/ECM加載區(qū)中加入50微升細(xì)胞懸液1，并在細(xì)胞培養(yǎng)條件下孵育10分鐘，讓細(xì)胞沉淀到微孔中。確保將細(xì)胞懸液靠近凝膠滴入，以避免氣泡困住。該過程如圖2所示。

1-2-1- 可選的直接共培養(yǎng)：微環(huán)境中存在的任何類型的次級細(xì)胞可以與主細(xì)胞一起懸浮準(zhǔn)備，并可以接種到每個隔間的細(xì)胞/ECM加載區(qū)中。

1-3- 當(dāng)細(xì)胞沉降到微孔中后，通過向細(xì)胞/ECM加載區(qū)中加入70-100微升預(yù)熱培養(yǎng)基輕輕沖洗任何卡在通道中的額外細(xì)胞。然后，通過將吸頭盡可能靠近微孔，將介質(zhì)吸出。從次級儲液槽中移除任何額外介質(zhì)（見圖1）。如果觀察到細(xì)胞/ECM加載區(qū)通道中仍有任何殘留的單個細(xì)胞，請重復(fù)沖洗步驟。

1-4- 最后，在培養(yǎng)基槽中和每個象限的細(xì)胞/ECM加載區(qū)中加入80微升預(yù)熱新鮮培養(yǎng)基。在細(xì)胞培養(yǎng)條件下孵育。

1-5- 每天監(jiān)測球體形成和生長，并定期更換培養(yǎng)基，直到球體達(dá)到您期望的大小。

細(xì)胞外基質(zhì)應(yīng)用

2-1- 在插入物的每個象限的微孔中形成球體后，輕輕吸出培養(yǎng)基槽中的介質(zhì)5，然后向細(xì)胞/ECM加載區(qū)6中加入40-60微升所需的水凝膠溶液。

2-1-1- 可選共培養(yǎng)：微環(huán)境中存在的任何類型的正常（基質(zhì)）細(xì)胞可以以一定濃度懸浮并與ECM水凝膠溶液混合，然后再應(yīng)用到球體上7。

2-1-2- 次級ECM應(yīng)用：如有必要，可以通過將其加入次級儲液槽（儲液體積：20微升）作為主要ECM的覆蓋層來添加次級ECM。在應(yīng)用次級ECM之前，請確保吸出所有介質(zhì)。

2-1-3- 免疫細(xì)胞共培養(yǎng)：免疫細(xì)胞可以與一定濃度的次級ECM混合，并加入次級儲液槽8。

2-2- 在添加ECM但在固化之前9，將培養(yǎng)皿放置在層流罩下2-5分鐘（休息時間）10，讓水凝膠溶液填滿每個隔間的微通道和微孔。

2-3- 在交聯(lián)水凝膠后，輕輕向培養(yǎng)基槽中加入80微升預(yù)熱新鮮培養(yǎng)基，并向插入物的每個隔間的細(xì)胞/ECM加載區(qū)中加入80微升。在細(xì)胞培養(yǎng)條件下孵育。

2-4- 每天監(jiān)測球體并定期更換培養(yǎng)基4，直到球體達(dá)到您期望的大小。

2-5- 對于藥物測試，只需將化合物與培養(yǎng)基混合至所需濃度，然后加入培養(yǎng)基槽。

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