通用術語“自噬”包括溶酶體獲得細胞溶質貨物的幾個過程，文獻中發(fā)現(xiàn)了三種類型的自噬：（1）巨自噬，其特征在于形成新月形結構（吞噬團），該結構膨脹形成雙膜自噬體，能夠與溶酶體融合;（2）微自噬，其中溶酶體內陷并直接螯合胞質成分;（3）伴侶介導的自噬（CMA），涉及未折疊蛋白在溶酶體膜上的易位。

自噬途徑的上調是對細胞外或細胞內應激和信號（如饑餓、生長因子剝奪、ER 應激和病原體感染）的反應。這些途徑的故障與各種人類病理有關，包括癌癥、神經變性和傳染病。
選擇性巨自噬描述了整個細胞成分、蛋白質聚集體或異常長壽命蛋白質的自我降解途徑;其中雙膜自噬體螯合細胞器、泛素化蛋白或泛素化蛋白聚集體，隨后與溶酶體融合，通過常駐水解酶分解。蛋白質聚集體的自噬清除需要泛素結合受體p62和NBR1。
p62蛋白，也稱為隔離體1（SQSTM1），具有雙重功能，既是支架蛋白，又有助于運輸?shù)鞍踪|降解。它可以通過PB1（Phox和Bem1）結構域聚合并與NBR-1結合，通過UBA（泛素相關）結構域與泛素化蛋白質相互作用，將它們連接到自噬機制，并通過LIR（LC3相互作用區(qū)）基序與自噬途徑的LC3II蛋白結合。p62通過促進泛素蛋白的自噬降解，減少細胞內錯誤折疊和非功能蛋白質的聚集，從而增強細胞存活特征，從而在泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（UPS）和自噬之間提供關鍵聯(lián)系。由于p62在自噬被抑制時積累，并且在誘導自噬時可以觀察到水平降低，因此p62可用作研究自噬通量的生物標志物。此外，p62已在神經退行性疾病（如帕金森氏癥和阿爾茨海默氏癥）以及骨骼疾病佩吉特骨病中實施，將p62蛋白確立為潛在的治療靶點。

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p62 ELISA kit參數(shù)詳情：

替代名稱：隔離體 1

敏感性：100pg/ml（范圍 625 - 40，000pg/ml）

檢測時間：3小時

應用：酶聯(lián)免疫吸附法，比色檢測

應用說明：用于定量測定細胞裂解物樣品中的人、大鼠和小鼠p62。引用的樣品類型包括在PBMC裂解物中。

波長：450 納米

物種反應性：人類， 老鼠， 大鼠

交叉反應性：無交叉反應。

使用/穩(wěn)定性：將所有組件儲存在 +4?C 下，標準組件在 -80?C 下儲存。

航運：干冰

內容：微量滴定板、抗體、偶聯(lián)物、測定緩沖液 13、洗滌緩沖液濃縮物、標準品、TMB 底物、終止液 2、RIPA 細胞裂解緩沖液 2

p62（產品編號ADI-900-212）和NBR1（產品編號ADI-900-211）免疫測定與自噬誘導的相關性。MDA-MB-231人乳腺癌細胞用2μM自噬誘導藥物withaferin A（WA）處理。在處理后6、12和24小時收獲細胞，并在含有蛋白酶抑制劑和DNA酶的RIPA細胞裂解緩沖液2中裂解。通過離心澄清細胞裂解物，并在p62測定（圖3A）和NBR1測定（圖3B）中進行分析。抗原濃度歸一化為總細胞蛋白。通過SDS-PAGE分離細胞裂解物，并使用來自細胞信號的抗p62抗體CN #5114（圖3C）或來自細胞信號的抗LC3抗體CN #2775（圖3D）通過蛋白質印跡進行分析。將兩種蛋白質印跡中的信號強度與肌動蛋白水平進行比較，條帶以上的數(shù)字表示蛋白質水平相對于相應DMSO處理的對照的變化。

特點：

高靈敏度檢測，可測量低至 100 pg/ml 的 p62

全定量結果優(yōu)于半定量蛋白質印跡分析

更高的通量形式，可在短短 40 小時內檢測多達 3 個樣品一式兩份

易于使用的液體顏色編碼試劑可減少錯誤

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