ALPCO EPO(促紅細胞生成素)EIA*， 96孔，IVD使用方案

促紅細胞生成素（EPO）是一種重度糖基化的蛋白質，分子量約為30-34千道爾頓。人類EPO是一種由165個氨基酸組成的多肽，包含一個O-連接和三個N-連接的糖鏈。重組EPO是天然蛋白的良好替代品，可用于免疫測定。血清EPO水平取決于蛋白質的產生速率和清除速率。90%的EPO是在成年腎臟的近曲小管細胞中產生的，這是對組織氧合減少的反應。有證據表明，這些細胞上檢測血液氧飽和度的蛋白質是一個含有血紅素的基團。隨著血漿中pO2的降低，作為紅細胞比容的函數，EPO濃度將會增加。觀察結果也表明，正常情況下，血清EPO水平與紅細胞質量之間存在負相關。血清促紅細胞生成素濃度的定量檢測作為診斷輔助手段，用于確定貧血或紅細胞增多癥的原因。再生障礙性貧血、溶血性貧血和缺鐵性貧血都會導致血清EPO升高。然而，由于腎臟疾病如腎衰竭和其他疾病（如獲得性免疫缺陷綜合征AIDS）導致的繼發性貧血患者，其EPO水平通常不適當地低于貧血程度。這很可能是由于患病腎臟產生足夠數量EPO的能力受損。低濃度的EPO可能提供腎臟移植排斥反應的早期警告。EPO也可用于監測接受齊多夫定（AZT）治療的AIDS患者。EPO濃度的增加證實了與AZT治療相關的貧血是由于紅細胞生成減少或缺失。真性紅細胞增多癥，或原發性紅細胞增多癥（紅細胞質量增加）是由于紅細胞過度生產而未受刺激的結果。因此，血紅蛋白的增加導致EPO產生減少，從而導致血清EPO水平低于正常。繼發性紅細胞增多癥，也以總紅細胞質量增加為特征，是由于組織缺氧引起的循環EPO水平升高的生理反應。缺氧可能是由于肺纖維化、心血管疾病、長期暴露于高海拔、異常血紅蛋白形式或藥物治療等因素。一些腫瘤會產生EPO，在這些情況下，EPO可用作腫瘤標志物，以監測治療的有效性。EPO ELISA用于定量測定人血清中的促紅細胞生成素（EPO）。該測定用于體外診斷，檢測EPO水平升高或降低，作為貧血和紅細胞增多癥診斷的輔助手段。

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EPO(促紅細胞生成素)EIA*， 96孔，IVD使用使用檢測原理：

促紅細胞生成素免疫測定是一種雙位點酶聯免疫吸附測定（ELISA），用于測量生物活性的165個氨基酸鏈的EPO。它利用兩種不同的針對人EPO的明確區域的鼠單克隆抗體。一種鼠單克隆抗體對人EPO進行生物素標記，另一種鼠單克隆抗體對人EPO進行辣根過氧化物酶（HRP）標記以進行檢測。在這種測定中，校準品、對照品或患者樣本與酶標記的抗體和生物素偶聯抗體在鏈霉親和素包被的微孔板孔中同時孵育。在測定孵育結束時，洗滌微孔以去除未結合的成分，并將固相上的酶與底物四甲基聯苯胺（TMB）孵育。然后加入酸性終止溶液以停止反應，并將顏色變為黃色。黃色的強度與樣本中EPO的濃度直接成正比。使用校準品獲得的結果生成吸光度單位與濃度的劑量反應曲線。對照品和患者樣本中存在的EPO濃度可以直接從這個曲線中確定。這些標準品已經與世界衛生組織（WHO）的重組DNA衍生的促紅細胞生成素國際標準進行了校準。使用的WHO參考標準是促紅細胞生成素第一國際標準（87/684）。

組成：

樣本收集和儲存：

EPO的測定應使用人血清進行。為了對樣本進行雙重測定，需要400微升的人血清。強烈建議在上午7:30至中午12:00之間收集樣本，因為文獻中已經報告了促紅細胞生成素的日間變化。11,12 收集未加抗凝劑的全血，并在2°C至8°C下讓血液凝固，如果可能的話。有報道稱，在室溫（22°C至28°C）下凝固的血清樣本，通過放射免疫測定法評估，EPO值在冰上凝固后大約降低了30%。13 然后，應盡快分離出血清，最好在冷藏離心機中進行，并將血清儲存在-15°C或更低的溫度下。血清樣本可在2-8°C下儲存長達24小時。在-15°C下冷凍的血清樣本可穩定保存長達12個月。不要在自動除霜的冷凍柜中儲存樣本。避免樣本反復冷凍和解凍。對于樣本的長期儲存，建議在冷凍前將樣本分裝到樣本管或瓶中。使用前，讓所有樣本恢復至室溫（22°C至28°C）并輕輕倒置或旋轉混合。避免使用明顯溶血或明顯脂血的樣本。

文獻參考：

1. Sawyer, S.T., Krantz, S.B., Sawada, K. Receptors for Erythropoietin in Mouse and HumanErythroid Cells and Placenta. Blood 1989; 74: 103-109.

2. Imai, N., Kawamura, A., Higuchi, M., et al. Physicochemical and Biological Comparison ofRecombinant Human Erythropoietin with Human Urinary Erythropoietin. J Biochem 1990; 107:352-359.

3. Jacobson, L.O., Goldwasser, E., Fried, W., Pizak, L.F. The Role of the Kidney inErythropoiesis. Nature 1957; 179: 633-634. 

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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