白蛋白檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定法（ELISA），用于檢測犬血清、血漿和尿液樣本中白蛋白的定量測定。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品白蛋白(犬)ELISA試劑盒，96孔。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

白蛋白(犬)ELISA試劑盒，96孔檢測原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定的原理在圖1中表示。在這種測定中，樣品中的白蛋白與已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗白蛋白抗體發(fā)生反應(yīng)。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合的抗白蛋白抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的白蛋白形成復(fù)合物。經(jīng)過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測定免疫吸附劑上結(jié)合的酶。結(jié)合的酶量與測試樣品中白蛋白的濃度直接相關(guān)；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中白蛋白濃度的量度。測試樣品中白蛋白的量可以從標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值得到，并根據(jù)樣品稀釋進行校正。

需要但未提供的材料

? 精密移液器（2微升至1000微升）用于制作和分發(fā)稀釋液

? 試管

? 噴霧瓶或微孔板洗滌/抽吸器

? 蒸餾或去離子水

? 微孔板讀取器

? 用于準(zhǔn)備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿

? 計時器

? 抗凝劑（用于血漿樣品收集）

? 樣品收集用離心機

樣品收集和處理

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險。

處理和處置時遵循通用預(yù)防措施。

如果血液樣品出現(xiàn)凝塊、嚴(yán)重溶血、脂血，或樣品的完整性受到關(guān)注，請做記錄，并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。

下面列出的樣品收集和儲存條件是一般性指導(dǎo)。

尚未評估樣品的穩(wěn)定性。

? 血清樣品：應(yīng)通過靜脈采血。血凝塊形成后通過離心分離血清。取出血清立即進行測定或分裝并儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

? 血漿樣品：血液應(yīng)收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即進行測定或分裝并儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

? 尿液樣品：使用無菌或干凈的尿液收集器收集中段尿液。離心以去除細(xì)胞碎片。立即進行測定或分裝并儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

? 已知干擾物質(zhì)：濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應(yīng)。

樣品稀釋

測定要求每個測試樣品在使用前進行稀釋。每次進行測定時，所有樣品都應(yīng)以雙份進行測定。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋應(yīng)基于未知樣品的預(yù)期濃度，使稀釋后的樣品落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的動態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣品值，在運行整個板之前，強烈建議對一個或兩個代表性樣品進行系列稀釋。

? 血清和血漿樣品：推薦的起始稀釋比例是1:200,000。要準(zhǔn)備1:200,000的樣品稀釋液，將2微升樣品轉(zhuǎn)移到1998微升1倍稀釋液中。這得到1:1000的稀釋。接下來，將1:1000的樣品通過轉(zhuǎn)移2微升到398微升1倍稀釋液中進行稀釋。這得到1:200,000的稀釋。每個階段都要徹底混合。

? 尿液樣品：推薦的起始稀釋比例是1:1000。要準(zhǔn)備1:1000的樣品稀釋液，將5微升樣品轉(zhuǎn)移到495微升1倍稀釋液中。這得到1:100的稀釋。接下來，將1:100的樣品通過轉(zhuǎn)移40微升到360微升1倍稀釋液中進行稀釋。這得到1:1000的稀釋。每個階段都要徹底混合。

結(jié)果計算

1. 從每個孔的測試值中減去平均背景值（標(biāo)準(zhǔn)零的平均吸光度讀數(shù)）。

2. 對每個標(biāo)準(zhǔn)的平均重復(fù)讀數(shù)進行平均，并使用結(jié)果構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過使用能夠生成四參數(shù)邏輯曲線擬合的計算機軟件來減少數(shù)據(jù)，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。也可以使用二階多項式（二次）或其他曲線擬合；然而，它們對數(shù)據(jù)的擬合將不夠精確。

3. 從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值得到測試樣品值。校正稀釋因子，以得到原始樣品中白蛋白的濃度。

附錄A - 參考血清信息

本試劑盒中包含一瓶參考血清。請參閱隨附的產(chǎn)品概況表以獲取特定批次的信息。

請注意以下事項：

1. 收到參考血清后應(yīng)立即冷凍。如果儲存得當(dāng)，它在有效期前都是穩(wěn)定的。

2. 參考血清應(yīng)適當(dāng)稀釋，以適應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍。

3. 有關(guān)說明，請參考協(xié)議中的“樣品稀釋”部分。

4. 在移液樣品（程序部分）的同時，也應(yīng)以雙份移液參考血清。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。