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PSII的PsbA|D1蛋白,C端(兔抗體)(類囊體膜標記物)在光合作用研究中的應(yīng)用

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2025-01-21     
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psbA基因已從許多植物、綠藻和藍藻中克隆出來。psbA基因組位于葉綠體基因組中,編碼D1蛋白,D1蛋白是光系統(tǒng)II的核心成分。在所有含氧光生物中,PsbA/D1在光照下快速循環(huán)。使用Global PsbA抗體跟蹤PsbA池可以顯示光系統(tǒng)II在各種樣本中的功能含量。別名:32kDa類囊體膜蛋白,光系統(tǒng)II蛋白D1

 

艾美捷PSII的PsbA|D1蛋白,C端(兔抗體)(類囊體膜標記物)

貨號:AS05-084

免疫原:與KLH偶聯(lián)的合成肽,源自已知的植物、藻類和藍藻的PsbA序列,包括擬南芥(UniProt:A4QJR4,TAIR:AtCg00020)、水稻(P0C434)、白楊(Q14FH6)、泥炭蘚(Q6YXN7)、萊茵衣藻(P07753)、藍藻(Synechocystis sp.,P14660)以及其他許多物種。

宿主:兔

克隆性:多克隆

純度:血清

形式:凍干粉

數(shù)量:50 ?l

復溶方法:復溶時加入50 ?l無菌水

儲存條件:凍干粉/復溶后于-20°C保存;復溶后請分裝,避免反復凍融。打開管子前請短暫離心,以避免因材料粘附在蓋子或管壁上而導致的損失。

額外信息:

由于PsbA(D1)蛋白的生物學特性,樣本中可能會出現(xiàn)多種降解產(chǎn)物,并在使用抗PsbA抗體時觀察到這些產(chǎn)物,包括表觀分子量為24 kDa和16 kDa的產(chǎn)物。D1的降解是一個復雜的事件集合,觀察到的產(chǎn)物可能受到提取程序和采樣前細胞生理狀態(tài)的影響。此外,D1與細胞色素b559之間可能發(fā)生交聯(lián),導致蛋白在凝膠中位置上移。在藍藻(PCC7942)中,通過用PsbA自由肽預(yù)孵育抗體,競爭出三條不同的條帶,表明所有條帶均為PsbA及其前體或降解產(chǎn)物。類似的競爭實驗也在菠菜和萊茵衣藻中進行,確認了PsbA條帶的身份。

抗PsbA抗體不會檢測到D2蛋白,因為用于生成PsbA抗體的肽與D2序列沒有同源性。

如需含有ProClin的產(chǎn)品,可按要求提供。

推薦稀釋度:1:500(免疫熒光),1:200(免疫組化),1:10,000(Western Blot)

預(yù)期/表觀分子量:38 | 28-30 kDa

額外信息:

該抗體適用于檢測24 kDa或10 kDa C末端片段,具體取決于給定處理條件下的生成產(chǎn)物。在我們的分析中,根據(jù)處理和分離程序的不同,我們觀察到了來自不同樣本的大約24 kDa和大約10 kDa的片段。

與雞抗PsbA抗體(AS01 016)相比,兔抗PsbA抗體可以檢測到PsbA蛋白的多個條帶,例如前體蛋白和成熟蛋白。

該抗體可以在高分辨率凝膠上檢測到D1的磷酸化形式作為主條帶的替代條帶。

該抗體可以結(jié)合交聯(lián)蛋白:D1/D2、D1/細胞色素b559、D1/CP43。

該肽在藍藻D1:1和D1:2中是保守的。

 

應(yīng)用實例:

PSII的PsbA|D1蛋白,C端(兔抗體)(類囊體膜標記物)

圖:從以下來源提取的總蛋白2 ?g:(1)擬南芥葉片,使用蛋白提取緩沖液PEB(AS08 300)提取;(2)大麥葉片,使用PEB提取;(3)萊茵衣藻全細胞,使用PEB提取;(4)藍藻Synechococcus sp. 7942全細胞,使用PEB提取;(5)念珠藻全細胞,使用PEB提取。這些蛋白在4-12% NuPage(Invitrogen)LDS-PAGE上分離后,轉(zhuǎn)印至PVDF膜,轉(zhuǎn)印時間為1小時。轉(zhuǎn)印后,膜立即用2% ECL Advance封閉液(GE Healthcare)在20 mM Tris、137 mM氯化鈉(pH 7.6)和0.1%(體積比)Tween-20(TBS-T)中封閉1小時,室溫下攪拌。膜在1:50,000稀釋的一抗中孵育1小時,室溫下攪拌。棄去一抗溶液后,膜短暫沖洗兩次,然后在室溫下用TBS-T洗滌一次15分鐘,再洗滌三次,每次5分鐘,期間不斷攪拌。膜在二抗(抗兔IgG辣根過氧化物酶偶聯(lián)抗體,推薦的二抗為AS09 602,稀釋至1:50,000)中孵育1小時,室溫下攪拌,二抗溶液中含有2%的封閉液。膜按上述方法洗滌后,用化學發(fā)光檢測試劑顯色5分鐘,按照制造商的說明進行操作。膜的圖像使用CCD成像儀(FluorSMax,Bio-Rad)和Quantity One軟件(Bio-Rad)獲取。

 

PSII的PsbA|D1蛋白,C端(兔抗體)(類囊體膜標記物)文獻參考:
Pica et al. (2024). Functional ecological traits in young and adult thalli of canopy-forming brown macroalga Gongolaria barbata (Phaeophyta) from a transitional water system. PeerJ. 2024 Sep 12:12:e17959. doi: 10.7717/peerj.17959.  

Salazar et al. (2024). SOS1 tonoplast neo-localization and the RGG protein SALTY are important in the extreme salinity tolerance of Salicornia bigelovii. Nat Commun. 2024 May 20;15(1):4279.doi: 10.1038/s41467-024-48595-5.  

Phukan et al. (2024). Externally supplied ascorbic acid moderates detrimental effects of UV-C exposure in cyanobacteria. Photochem Photobiol Sci. 2024 Jul 12. doi: 10.1007/s43630-024-00612-8.

Zhao et al. (2024). Psb28 protein is indispensable for stable accumulation of PSII core complexes in Arabidopsis.Plant J. 2024 May 26. doi: 10.1111/tpj.16844.     


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