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H3|組蛋白H3(兔抗體)(核標(biāo)記)在細(xì)胞核功能與染色質(zhì)動(dòng)態(tài)中的應(yīng)用

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2025-01-21     
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組蛋白3(H3)位于細(xì)胞核中,并入染色質(zhì)。與H2A、H2B和H4一起存在于核小體中。

 

艾美捷H3|組蛋白H3(兔抗體)(核標(biāo)記)

貨號(hào):AS10-710

免疫原:與KLH偶聯(lián)的合成肽,源自已知的H3序列,包括擬南芥H3.3(P59169,基因編號(hào)At4g40030、At4g40040、At5g10980)、H3.2(P59226,基因編號(hào)At1g09200、At3g27360、At5g10390、At5g10400、At5g65360)和H3-like 2(Q9FXI7,基因編號(hào)At1g19890)

宿主:兔

克隆性:多克隆

純度:血清

形式:凍干粉

數(shù)量:50 ?l

復(fù)溶方法:復(fù)溶時(shí)加入50 ?l無菌水

儲(chǔ)存條件:凍干粉/復(fù)溶后于-20°C保存;復(fù)溶后請(qǐng)分裝,避免反復(fù)凍融。打開管子前請(qǐng)短暫離心,以避免因材料粘附在蓋子或管壁上而導(dǎo)致的損失。

額外信息:細(xì)胞核(核質(zhì))標(biāo)記物,適用于萊茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)的染色質(zhì)免疫沉淀-定量PCR(ChIP-qPCR)的加載對(duì)照抗體。

推薦稀釋度:1:100-1:500(免疫細(xì)胞化學(xué)),ChIP-qPCR每500 ?l溶液中使用2 ?l抗體,1:500(免疫熒光),1:5000(Western Blot)

預(yù)期/表觀分子量:15 | 17 kDa

已確認(rèn)的反應(yīng)性:擬南芥、灰霉病菌、甘藍(lán)、辣椒、茜草素、衣藻嗜酸菌、萊茵衣藻、蘇育黃瓜、柱狀西葫蘆、大麥

庸俗、人類、煙草屬、蝴蝶蘭、三角褐指藻、斑毛藻,鹽角草屬植物、番茄、茄、馬鈴薯、蠶豆、玉米

預(yù)測(cè)的反應(yīng)性:雙莖苞葉螟、甘藍(lán)型油菜、胡枝子、苦蕎麥。,甘氨酸max,微綠球藻、煙草、蘋果、苜蓿、水稻、Ostreococcus sp。松、豌豆、紫球藻、甘蔗、高粱、小麥、葡萄葡萄,Volvox sp。

未反應(yīng)的生物:目前尚未發(fā)現(xiàn)與預(yù)測(cè)反應(yīng)性不符的已確認(rèn)例外情況

額外信息:在免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)中,已觀察到中期核以及有絲分裂染色體的著絲粒區(qū)域(組蛋白H3的Ser10位點(diǎn)發(fā)生磷酸化)有特異性熒光。

 

應(yīng)用實(shí)例:

H3|組蛋白H3(兔抗體)(核標(biāo)記)

圖:從擬南芥中提取的1.2 ?g染色質(zhì)富集組分(1)和4周齡擬南芥葉片中的3.75 ?g總蛋白(2),在12%的SDS-PAGE上分離后,轉(zhuǎn)印至Immobilon-P(Millipore,半干法)PVDF膜,轉(zhuǎn)印時(shí)間為50分鐘。轉(zhuǎn)印后,膜立即用MTBS-T(5%脫脂奶粉)在室溫下封閉30分鐘,期間不斷攪拌。膜在1:5000稀釋的一抗中孵育1小時(shí),室溫下攪拌。棄去一抗溶液后,膜短暫沖洗兩次,然后在室溫下用TBS-T洗滌3次,每次3分鐘,期間不斷攪拌。膜在二抗(抗IgG辣根過氧化物酶偶聯(lián)抗體,Agrisera,AS09 602,稀釋至1:20,000)中孵育30分鐘,室溫下攪拌。膜按上述方法洗滌后,用ECL檢測(cè)試劑顯色5分鐘,按照制造商的說明進(jìn)行操作。曝光時(shí)間為30秒。染色質(zhì)富集組分(1)中出現(xiàn)的雙條帶在肽中和實(shí)驗(yàn)中被用于誘導(dǎo)H3抗體的肽所競(jìng)爭(zhēng)。染色質(zhì)分離按照Zilberman等(2008)的描述進(jìn)行,略有修改。

感謝Weronika Sura和Adam Mickiewicz大學(xué)生物技術(shù)系的Piotr A. Ziolkowski博士,波蘭波茲南。

 

H3|組蛋白H3(兔抗體)(核標(biāo)記)文獻(xiàn)參考:
Martín-Merchán et al. (2024). Arabidopsis AGO1 N-terminal extension acts as an essential hub for PRMT5 interaction and post-translational modifications. Nucleic Acids Res . 2024 May 20:gkae387.doi: 10.1093/nar/gkae387.

Mosesso et al. (2024). Arabidopsis CaLB1 undergoes phase separation with the ESCRT protein ALIX and modulates autophagosome maturation. Nat Commun. 2024 Jun 19;15(1):5188. doi: 10.1038/s41467-024-49485-6.

Nguyen et al.(2024). The processed C-terminus of AvrRps4 effector suppresses plant immunity via targeting multiple WRKYs.J Integr Plant Biol. 2024 Jun 13.doi: 10.1111/jipb.13710.    


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