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Jackson專業(yè)從事親和純化的二抗和純化免疫球蛋白,其產(chǎn)品主要銷往到各地的大學(xué)科研所和醫(yī)院里的動物研究以及生物醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)的科學(xué)家。
目前艾美捷Jackson全新推出Alexa Fluor 555和Alexa Fluor 568偶聯(lián)物。
Jackson現(xiàn)提供Alexa Fluor 555和568二抗偶聯(lián)物。隨著橙色通道新增的兩個選擇,組合設(shè)計變得更加簡便。本文將會用案例展示JIR Alexa Fluor 偶聯(lián)物的實用性。
Jackson-Alexa Fluor 555和568應(yīng)用:
用于檢測馬來酰亞胺功能基團(tuán)。
Jackson-Alexa Fluor 555和568關(guān)鍵特點:
準(zhǔn)備和檢測時間少于1小時。快速且易于使用
當(dāng)開發(fā)針對多個靶標(biāo)的免疫熒光實驗時,一系列光譜上不同的熒光染料和經(jīng)過交叉吸附處理以減少與其他物種反應(yīng)的二抗對于每個靶標(biāo)特異性檢測和明確結(jié)果至關(guān)重要。
明亮且易于使用的Alexa Fluor 染料偶聯(lián)的二抗,現(xiàn)在新增了兩種新的偶聯(lián)物:Alexa Fluor 555和568。這兩種新染料補(bǔ)充了我們現(xiàn)有的Alexa Fluor 偶聯(lián)二抗系列,為橙色通道提供了兩個新的選擇。
除了全光譜范圍的熒光染料,Jackson免疫研究公司的Alexa Fluor 偶聯(lián)二抗還提供廣泛的靶標(biāo)特異性。它們與驢或山羊宿主二抗偶聯(lián),這些宿主二抗對許多常見物種的交叉反應(yīng)性最小,以避免多個一抗之間的串?dāng)_。
在這里,我們展示了如何將Alexa Fluor 555或568結(jié)合到您的四色免疫熒光實驗中。
使用DAPI、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647的四色免疫熒光
這個組合中三種Alexa Fluor 染料的光譜特性(圖1),允許它們與DAPI核染色結(jié)合,實現(xiàn)有效的四色免疫熒光。我們通過染色人類上皮細(xì)胞(HEp-2細(xì)胞)以常見的細(xì)胞內(nèi)蛋白標(biāo)記物來展示這種熒光團(tuán)組合。Ki-67蛋白,細(xì)胞增殖的標(biāo)記物(Scholzen和Gerdes., 2000),可以看到呈綠色。細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的方面可以看到呈黃色,通過使用抗α微管蛋白染色微管來可視化。Cis-Golgi基質(zhì)蛋白,參與高爾基體囊泡的堆疊和維持高爾基體結(jié)構(gòu)(Chang等人,2012),使用抗人GM130/GOLGA2進(jìn)行可視化,可以在核邊緣看到呈紅色。核被DAPI染色,可以看到呈藍(lán)色。(圖2)。

圖1:四色免疫熒光DAPI、Alexa Fluor? 488、Alexa Fluor? 555、Alexa Fluor? 647的光譜及激發(fā)和發(fā)射細(xì)節(jié)。
圖2:人類上皮細(xì)胞(HEp-2細(xì)胞)的間接四色免疫染色。使用兔抗Ki-67抗體后跟Alexa Fluor? 488偶聯(lián)的驢抗兔IgG(H+L)(711-545-152),細(xì)胞增殖以綠色顯示。使用鼠抗α微管蛋白后跟Alexa Fluor? 555偶聯(lián)的驢抗鼠IgG(H+L)(715-565-150),微管以黃色顯示。使用羊抗人GM130/GOLGA2后跟Alexa Fluor? 647偶聯(lián)的驢抗羊IgG(H+L)(713-605-147),高爾基結(jié)構(gòu)以紅色顯示。藍(lán)色 - DAPI核染色。
Jackson-Alexa Fluor 555和568文獻(xiàn)參考:
Chang, S. H., Hong, S. H., Jiang, H. L., Minai-Tehrani, A., Yu, K. N., Lee, J. H., Kim, J. E., Shin, J. Y., Kang, B., Park, S., Han, K., Chae, C., & Cho, M. H. (2012). GOLGA2/GM130, Cis-Golgi matrix protein, is a novel target of anticancer gene therapy. Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy, 20(11), 2052–2063.
Scholzen, T., & Gerdes, J. (2000). The Ki-67 protein: from the known and the unknown. Journal of cellular physiology, 182(3), 311–322.
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