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Biosensis示蹤試劑--可視化神經(jīng)退行性疾病的發(fā)展路徑!

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2024-11-28     
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Biosensis提供多種已建立且經(jīng)過良好特性化的追蹤試劑,用于檢測退化的神經(jīng)元(Fluoro-Jade B和C)、淀粉樣斑塊(Amylo-Glo和HQ-O)以及正常和病理性髓鞘(Black Gold II)。這些染色試劑是卓越的研究工具,提供了最大的靈活性,以研究神經(jīng)退行性疾病的途徑和疾病修飾藥物。

 

Biosensis追蹤試劑展示出幾個(gè)關(guān)鍵優(yōu)勢:

△在高影響力期刊上發(fā)表豐富——質(zhì)量由您的同行驗(yàn)證

△詳細(xì)的協(xié)議——保證易于使用的試劑有效

△卓越的技術(shù)支持——確保您的實(shí)驗(yàn)成功

△靈活性——與各種組織類型、染色技術(shù)和現(xiàn)有的抗體免疫染色協(xié)議兼容

 

用熒光玉B和C識(shí)別退化神經(jīng)元

神經(jīng)元退化的原因和影響引起了眾多神經(jīng)科學(xué)家的極大興趣。與這種興趣并行的是越來越多的適用于檢測神經(jīng)元退化的方法。熒光玉B(FJB)和C(FJC)示蹤試劑對(duì)所有退化的神經(jīng)元進(jìn)行染色,無論其受到何種損傷或細(xì)胞死亡機(jī)制。

FJB.jpgFJC.jpg


左圖:老年糖尿病大鼠海馬CA3區(qū)退化神經(jīng)元的Fluoro-Jade C(FJC)染色(綠色)。藍(lán)色:DAPI核染色。圖片由王博士及其同事提供(Wang S. et al. (2020))。

右圖:使用結(jié)合藍(lán)色和紫外線上熒光照明的雙重曝光,展示了暴露于卡因酸的大鼠扣帶回皮層表層。第一層含有明顯的Fluoro-Jade C陽性退化軸突末梢。第二層含有密集的DAPI陽性存活顆粒細(xì)胞。第三層含有FJC陽性退化錐體細(xì)胞和DAPI陽性存活錐體細(xì)胞的混合。照片由Larry Schmued博士提供。

 

FJC展現(xiàn)出最高的信噪比和最高的分辨率。這意味著它對(duì)退化神經(jīng)元的染色具有最大的對(duì)比度和親和力,使其成為定位不僅退化的神經(jīng)細(xì)胞體,還有遠(yuǎn)端樹突、軸突和末梢的理想選擇。該染料對(duì)褪色高度抵抗,并且與幾乎所有的組織學(xué)處理和染色協(xié)議兼容。

 

熒光染料Fluoro-Jade B(FJB),與其更純凈的兄弟FJC一樣,是一種陰離子熒光素衍生物,適用于正在退化的神經(jīng)元的組織學(xué)染色。FJB與FJC的不同之處在于,它是一種稍欠精煉的化學(xué)配方,因此它不提供與FJC相同的信噪比或高分辨率。盡管如此,F(xiàn)JB仍然被廣泛使用,并且作為退化神經(jīng)元甚至膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)記物效果非常好(見Damjanac M et al., 2007)。FJB的操作協(xié)議與FJC幾乎相同,并且FJB與包括免疫熒光和熒光尼氏技術(shù)在內(nèi)的幾種其他標(biāo)記程序兼容。

 

Biosensis Fluoro-Jade B和C追蹤試劑提供以下規(guī)格:

貨號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格
TR-100-FJ用于鑒定退化神經(jīng)元的 Fluoro-Jade C (FJC) 即用型稀釋染色試劑盒40 mL
TR-100-FJT用于鑒定退化神經(jīng)元的 Fluoro-Jade C (FJC) 即用型稀釋染色試劑盒20 mL
TR-150-FJ用于識(shí)別退化神經(jīng)元的 Fluoro-Jade B (FJB) 粉末30 mg
TR-160-FJ用于識(shí)別退化神經(jīng)元的 Fluoro-Jade C (FJC) 粉末30 mg

注意:TR-150-FJ 相當(dāng)于 Merck-Millipore 的停產(chǎn)產(chǎn)品 AG310,R-160-FJ相當(dāng)于 Merck-Millipore 的停產(chǎn)產(chǎn)品 AG325。


使用Amylo-Glo和HQ-O識(shí)別淀粉樣斑塊

Amylo-Glo即用型(RTD)染色試劑(TR-300-AG)旨在對(duì)組織切片中的淀粉樣斑塊進(jìn)行染色。由于其獨(dú)特的化學(xué)和光譜特性,這種標(biāo)記物比其它傳統(tǒng)標(biāo)記物如Thioflavin S和Congo Red具有多個(gè)優(yōu)勢(Schmued L et al., 2012)。使用Amylo-Glo在生理?xiàng)l件下會(huì)產(chǎn)生非常明亮的藍(lán)色紫外線激發(fā)染色,在使用其他濾光片照明時(shí)不會(huì)發(fā)生滲色。其亮度使其非常適合低放大倍數(shù)的定量研究,而其獨(dú)特的激發(fā)/發(fā)射特性和溫和的染色條件使其非常適合用于多重免疫熒光標(biāo)記研究。Amylo-Glo RTD與新鮮、冷凍和福爾馬林固定的免疫組化或免疫細(xì)胞化學(xué)兼容,并且由于其高熒光強(qiáng)度、高抗光漂白性和紫外線通道熒光的獨(dú)特特性,特別適合共聚焦和多重標(biāo)記。


Amylo-Glo.jpgHQ-O.jpg

左圖:三重曝光允許在AD/Tg小鼠海馬中同時(shí)定位Amylo-Glo陽性淀粉樣斑塊(藍(lán)色)、GFAP陽性肥大的星形膠質(zhì)細(xì)胞(綠色)和活化的小膠質(zhì)細(xì)胞(紅色)。結(jié)合紫外線、藍(lán)光和綠光照明。

右圖:在AD/Tg小鼠海馬的齒狀回區(qū)域,Amylo-Glo標(biāo)記淀粉樣斑塊(藍(lán)色)與乙二胺溴化物尼氏(細(xì)胞體)對(duì)比染色(紅色)。

 

Biosensis Amylo-Glo RTD淀粉樣斑塊染色試劑與EtBr對(duì)比染色(TR-400-AG)試劑盒利用乙二胺溴化物對(duì)比染色,快速有效地可視化細(xì)胞核和細(xì)胞體,同時(shí)在紫外線照明下允許一步評(píng)估淀粉樣斑塊和細(xì)胞/組織定位。

 

HQ-O即用型(RTD)追蹤試劑旨在標(biāo)記石蠟包埋或新鮮切割的冷凍組織切片中的淀粉樣斑塊。作為一種熒光鋅螯合劑,HQ-O是獨(dú)特的,因?yàn)樗昧艘阎牡矸蹣影邏K中濃縮鋅的存在。HQ-O的研究表明,只有在鋅的存在下合成的Aβx-42聚集時(shí)才會(huì)看到類似斑塊的熒光結(jié)構(gòu)。在藍(lán)光激發(fā)下,腦實(shí)質(zhì)中的斑塊結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)出鮮綠色熒光,與Aβ抗體染色后觀察到的斑塊結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。HQ-O RTD染色試劑與其它熒光團(tuán)兼容,如DAPI、Hoechst和乙二胺溴化物,以及在熒光顯微鏡的藍(lán)色和/或紅色發(fā)射范圍內(nèi)具有發(fā)射光譜的熒光標(biāo)記抗體。由于其鋅螯合特性,HQ-O RTD染色試劑可能會(huì)可視化血管內(nèi)的小球狀結(jié)構(gòu)和血管內(nèi)白細(xì)胞。


 RTD.jpg

 D:在海馬CA4區(qū)域,使用GFAP抗體共標(biāo)記展示了肥大的星形膠質(zhì)細(xì)胞(橙色)與它們通常包圍的淀粉樣斑塊(綠色)之間的關(guān)系。GFAP免疫反應(yīng)性用TRITC熒光團(tuán)可視化。E:在患有阿爾茨海默病的人類皮層中可以看到三個(gè)淀粉樣斑塊(綠色)。F:人類AD患者的皮層中血管斑塊的一個(gè)例子。

 

HQ-O即用型(RTD)染色試劑相比舊的藍(lán)光激發(fā)染色劑如Thioflavin S具有多個(gè)優(yōu)勢:

△HQ-O通過其獨(dú)特的鋅結(jié)合特性,獨(dú)立于構(gòu)象確認(rèn)地結(jié)合到淀粉樣纖維和斑塊上

△與Thioflavin S、Thioflavin T和Congo Red相比,展現(xiàn)出更大的對(duì)比度和分辨率

△具有緊密的激發(fā)和發(fā)射光譜,沒有激發(fā)的滲色,容易進(jìn)行清晰的多重標(biāo)記研究

△使用常見的藍(lán)光(FITC熒光)濾光片(Emax 475 nm)

△與福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)和冷凍組織切片兼容

△比其他任何非紫外線淀粉樣染色劑更容易使用、更清晰、更明亮


Biosensis 淀粉樣蛋白噬菌斑示蹤試劑有以下規(guī)格可供選擇:

產(chǎn)品貨號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格
TR-300-AGAmylo-Glo RTD 淀粉樣蛋白斑塊染色試劑5 mL
TR-400-AG含 EtBr 復(fù)染劑的 Amylo-Glo RTD 淀粉樣蛋白斑塊染色試劑5 mL
TR-700-HQOHQ-O RTD 淀粉樣蛋白斑塊染色試劑40 mL

 

識(shí)別正常和病理性髓鞘的Black-Gold II

Black-Gold II是一種鹵代磷酸金復(fù)合物,它可以在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)定位髓鞘。Black Gold II即用型(RTD)染色試劑盒允許定位髓鞘,包括單個(gè)纖維和纖維束,同時(shí)可以選擇通過甲苯胺藍(lán)對(duì)比染色共定位細(xì)胞體。在明場照明下,Black Gold II標(biāo)記的有髓纖維幾乎呈黑色,而甲苯胺藍(lán)O標(biāo)記的細(xì)胞尼氏體呈藍(lán)色。

Black Gold II能夠展示和表征與多種神經(jīng)毒素暴露相關(guān)的特定髓鞘變化,包括 kainac酸、domoic酸、3-硝基丙酸、Fluoro-Gold和isoniazid。Black Gold II還可以與其他組織化學(xué)標(biāo)記物結(jié)合使用,包括尼氏體染色、逆行轉(zhuǎn)運(yùn)的熒光示蹤劑和神經(jīng)元變性的熒光標(biāo)記物。與Black-Gold II相關(guān)的優(yōu)勢包括高分辨率、高對(duì)比度、短暫的組織化學(xué)處理時(shí)間、多功能性和一致的可重復(fù)性。

 

Black-Gold II.jpgBlack-Gold II-1.jpg

左圖:8個(gè)月大的Ad-Tg小鼠海馬的明場照明(60倍)。可以在淀粉樣斑塊內(nèi)外觀察到髓鞘病理。相鄰顆粒細(xì)胞和多形細(xì)胞的細(xì)胞體呈藍(lán)色,而單個(gè)有髓纖維幾乎呈黑色。照片由L. Schmued博士提供。

右圖:人類腦干下丘腦的鈣調(diào)蛋白基因相關(guān)肽樣免疫反應(yīng)性(黑色)和髓鞘染色(紅色,Black-Gold II染色試劑盒,Biosensis),顯示了背柱核下丘腦和三叉神經(jīng)脊?fàn)铙w的類似的神經(jīng)化學(xué)和結(jié)構(gòu)組織(Del Fiacco M. et al., 2018)。

 

Biosensis正常和致病性髓鞘示蹤試劑有以下大小可供選擇:

產(chǎn)品貨號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格
TR-100-BGBlack Gold II 髓鞘即用型稀釋染色套裝,含甲苯胺藍(lán)O型染色劑
用于識(shí)別正常和致病性髓鞘
10 ml


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