神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子是一類對(duì)神經(jīng)元的發(fā)育、存活和凋亡起重要作用的蛋白質(zhì)，其成員包括神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF），腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)等，這些蛋白質(zhì)是治療神經(jīng)損傷等疾病的潛在藥物標(biāo)靶。

生物標(biāo)記物用于支持診斷或檢測(cè)治療效果是神經(jīng)病學(xué)和神經(jīng)精神病領(lǐng)域尚未滿足的主要臨床需求。盡管已經(jīng)發(fā)表了大量關(guān)于腦疾病與生物液體中存在的分子標(biāo)記物之間關(guān)系的研究，但只有少數(shù)臨床上有用的生物標(biāo)記物被成功地驗(yàn)證用于常規(guī)臨床實(shí)踐。

腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）是腦疾病中最有前景的生物標(biāo)志物之一，但目前尚缺乏確切的臨床驗(yàn)證。BDNF是一種分泌性的二聚體生長(zhǎng)因子，存在于大多數(shù)人體組織中，包括大腦和血液。已知BDNF對(duì)特定神經(jīng)元種群發(fā)育過程中的存活和分化以及成年期神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)的維持和可塑性中起著重要作用。與其他神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素類似，BDNF首先被合成為一種32 kDa的前體蛋白，稱為的前體BDNF，然后被不同的蛋白酶剪切，產(chǎn)生14 kDa的成熟形式或28 kDa的截短形式。有趣的是，人體內(nèi)不同形式BDNF的動(dòng)態(tài)改變與認(rèn)知障礙和精神紊亂有著密切的關(guān)系。

腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）作為一種潛在的生物標(biāo)志物，越來越受到人們的關(guān)注，以支持對(duì)腦疾病的診斷或監(jiān)測(cè)治療效果。循環(huán)的BDNF可在血清、血漿或全血中測(cè)定。然而，由于樣品采集和BDNF分析方法的多樣性，導(dǎo)致結(jié)果的再現(xiàn)性較差，限制了BDNF作為生物標(biāo)志物的使用。

為了克服這些局限性，Alessio等人使用40名健康成人的血清，比較了市面上常見的五種ELISA測(cè)定試劑盒（Aviscera Bioscience、Biosensis、Millipore ChemiKine（^TM）、Promega Emax（^®）、R&D-System-Quantikine（^®））和一種多重分析（Millipore Milliplex（^®））對(duì)人血清中BDNF的檢測(cè)效果。所有試劑盒均顯示100%樣品回收率，然而，它們?cè)?%到20%之間表現(xiàn)出非常不同的分析間差異。實(shí)際實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示的組間差異高于制造商公布的組間差異，只有Biosensis例外，它具有最佳的總體性能。斑點(diǎn)雜交分析顯示，其中兩個(gè)試劑盒選擇性地識(shí)別成熟的BDNF，而其他試劑盒同時(shí)與前體BDNF和成熟的BDNF反應(yīng)。具體的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：

不同廠家BDNF ELISA試劑盒公布的性能與實(shí)際檢測(cè)的性能的比較

圖1. 兩次不同時(shí)間重復(fù)測(cè)定，組間差異如圖所示，Biosensis的試劑盒變異系數(shù)最小（5%）

圖2. 三次不同時(shí)間重復(fù)測(cè)定，Biosensis試劑盒變異系數(shù)(CV)最小（10%），且各獨(dú)立測(cè)定間差異不顯著。

圖3

A：檢測(cè)每個(gè)ELISA試劑盒中的抗體對(duì)Pro-BDNF和mature-BDNF的特異性（Sigma抗體作為對(duì)照）

B：A中Pro-BDNF和mature-BDNF印跡區(qū)域的放大

C：Biosensis、Promega Emax®PAB和Sigma的抗體在斑點(diǎn)雜交上的反應(yīng)性

結(jié)果顯示：Biosensis、Promega Emax®PAB兩個(gè)試劑盒選擇性地識(shí)別mature-BDNF，而其他試劑盒同時(shí)與pro-BDNF和mature-BDNF反應(yīng)。

圖4. 各品牌BDNF檢測(cè)ELISA實(shí)際總體性能比較

每個(gè)試劑盒在分析內(nèi)差異、分析間差異、檢測(cè)范圍、靈敏度和處理時(shí)間五個(gè)方面的性能如圖4所示。六個(gè)試劑盒中，對(duì)于分別檢測(cè)總BDNF和成熟的BDNF而言， Biosensis和Aviscera-Bioscience表現(xiàn)最為突出，顯示五個(gè)參數(shù)值的最大面積接近的100%（上圖）。尤其是Biosensis，即使在第三次重復(fù)后（10%）的變異系數(shù)最低，三次獨(dú)立測(cè)量之間也沒有顯著差異。

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Scientific Report專題文章賞析：

A method for reproducible measurements of serum BDNF: comparison of the performance of six commercial assays. Sci Rep. 2015; 5: 17989.

Biosensis是一家由生命科學(xué)家和商業(yè)團(tuán)隊(duì)組成的公司，致力于為全球?qū)W術(shù)界和工業(yè)界的研究人員提供支持。該團(tuán)隊(duì)在基礎(chǔ)和應(yīng)用生命科學(xué)研究方面擁有超過100年的經(jīng)驗(yàn)，并在生命科學(xué)研究和診斷市場(chǎng)的生命科學(xué)抗體，試劑和試劑盒的商業(yè)化方面擁有50多年的經(jīng)驗(yàn)。

Biosensis專注于神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的抗體和試劑的開發(fā)，特別是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體。 近30年來，Biosensis一直是該領(lǐng)域的全球領(lǐng)航者和OEM供應(yīng)商。除神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，Biosensis的神經(jīng)科學(xué)產(chǎn)品組合還被廣泛用于神經(jīng)退行性疾病、神經(jīng)發(fā)育和神經(jīng)代謝的研究。重點(diǎn)研究領(lǐng)域包括阿爾茨海默氏癥（AD）、帕金森氏癥（PD）和肌萎縮側(cè)索硬化（ALS）疾病，以及自噬和代謝應(yīng)激障礙，包括肥胖、代謝綜合征的研究、神經(jīng)免疫學(xué)和炎癥。

Biosensis的產(chǎn)品系列不僅包括持續(xù)增長(zhǎng)的神經(jīng)科學(xué)研究抗體系列，還包括200多種定量研究ELISAs試劑盒（1板或2板，自由選擇），組織染色（退化神經(jīng)元染色試劑盒、病理髓鞘染色試劑盒、淀粉樣斑塊染色試劑等）和細(xì)胞可視化試劑（染色）以及針對(duì)神經(jīng)科學(xué)和細(xì)胞疾病研究的純化的蛋白質(zhì)。我們的抗體和試劑已被廣泛應(yīng)用于各種技術(shù)，包括蛋白質(zhì)印跡，免疫組織化學(xué)，流式分析，共聚焦顯微鏡實(shí)時(shí)成像，生物抑制和細(xì)胞培養(yǎng)以及克隆。最后，通過總共340多篇同行評(píng)審的研究出版物和精湛的技術(shù)支持和經(jīng)驗(yàn)，Biosensis能夠?yàn)樯窠?jīng)科學(xué)及其相關(guān)研究領(lǐng)域提供業(yè)內(nèi)無與倫比的客戶支持和科學(xué)專業(yè)知識(shí)。

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