替代名稱：MRP8：S100A8，Calgranulin A，CP-10（在小鼠中）；MRP14：S100A9，Calgranulin B；Calprotectin：MRP8/14，L1，（p8,14），p34。遷移抑制因子相關(guān)蛋白（MRP）-8和-14屬于與髓系細(xì)胞分化相關(guān)的S-100家族鈣結(jié)合蛋白。它們?cè)陟o止的中性粒細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞（特別是在銀屑病中）、浸潤(rùn)組織巨噬細(xì)胞以及活躍炎癥性疾病的上皮細(xì)胞中高度表達(dá)。慢性或急性炎癥中巨噬細(xì)胞亞群的異質(zhì)性反映在MRP8和MRP14的不同表達(dá)上。表達(dá)MRP8和MRP14的吞噬細(xì)胞屬于早期浸潤(rùn)細(xì)胞，而單獨(dú)的MRP8則在慢性炎癥組織中發(fā)現(xiàn)。MRP8、MRP14以及Ca2+依賴的MRP8/14異質(zhì)復(fù)合體的部分拮抗功能使它們成為多功能的介質(zhì)。

作為BMA Biomedicals在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BMA Biomedicals熱銷產(chǎn)品鈣粒蛋白 (S100A8/A9, MRP8/14) ELISA 試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

鈣粒蛋白 (S100A8/A9, MRP8/14) ELISA 試劑盒功能：

Calprotectin異質(zhì)復(fù)合體的一個(gè)主要功能是其抗菌活性。Calprotectin通過(guò)與鋅的競(jìng)爭(zhēng)來(lái)抑制病原體的生長(zhǎng)。它還能誘導(dǎo)某些腫瘤細(xì)胞的凋亡。這些活性可被Zn2+和其他二價(jià)陽(yáng)離子所抵消，但不會(huì)被Ca2+或Mg2+所抵消。MRP8/14異質(zhì)復(fù)合體特有的另一個(gè)重要屬性是其作為脂肪酸運(yùn)輸?shù)鞍椎莫?dú)特角色。依賴Ca2+的脂肪酸-MRP8/14復(fù)合體是中性粒細(xì)胞中多不飽和脂肪酸的主要載體。該復(fù)合體在靜止細(xì)胞中表達(dá)，并在受到刺激時(shí)移動(dòng)到膜上。即使在生理濃度的Zn2+下，Zn2+也抑制了MRP8/14的脂肪酸載體能力，因此脂肪酸不在血液循環(huán)中運(yùn)輸。這使得MRP8/14成為鈣信號(hào)和花生四烯酸效應(yīng)之間的重要介質(zhì)。MRP8（以及MRP8/14，但不是單獨(dú)的MRP14）在炎癥介質(zhì)的刺激下分泌。它是中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的強(qiáng)效趨化因子。然而，MRP8并不增加細(xì)胞內(nèi)Ca2+，也不誘發(fā)像C5a那樣的氧化爆發(fā)和顆粒酶釋放。MRP8暴露于次氯酸鹽下，可能由活化的中性粒細(xì)胞產(chǎn)生，會(huì)將其轉(zhuǎn)化為不活躍的二硫鍵連接的二聚體。糖皮質(zhì)激素通過(guò)炎癥介質(zhì)上調(diào)MRP8的誘導(dǎo)。MRP8可能有助于調(diào)節(jié)胎兒-母體相互作用，這將解釋為什么在小鼠中滅活MRP8基因會(huì)導(dǎo)致胚胎致死。MRP14與MRP8在活化的巨噬細(xì)胞中不共表達(dá)，指向它們不同的作用。MRP14的C末端序列與中性粒細(xì)胞固定因子的N末端相同。MRP14可以被磷酸化，這增加了其Ca2+結(jié)合能力。然后它傾向于從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜和細(xì)胞骨架。已經(jīng)證明MRP14與具有轉(zhuǎn)移增強(qiáng)能力的中性粒細(xì)胞亞群相關(guān)聯(lián)。

檢測(cè)原理：

使用一種高度特異性的單克隆抗體作為抗原捕獲，以及一種多克隆雞抗體用于檢測(cè)的一步非競(jìng)爭(zhēng)性?shī)A心法檢測(cè)。試劑限制在辣根過(guò)氧化物酶催化的四甲基聯(lián)苯胺顏色反應(yīng)中，包括在多孔板閱讀器中450/630 nm處的停止反應(yīng)和讀取。

提供的試劑：

S-1011A 即用型預(yù)涂覆并穩(wěn)定的微孔板（Nunc Maxisorb）和板封口器。

S-1011B 1.5 ml的1000 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品，MRP8/14復(fù)合體的制劑。用測(cè)定緩沖液稀釋以獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線所需的濃度。

S-1011C 50 μl的辣根過(guò)氧化物酶偶聯(lián)的檢測(cè)抗體。開啟前短暫離心以收集所有溶液。

S-1011D 50 ml測(cè)定緩沖液（3倍濃縮），一種含有阻斷劑和防腐劑的綠色溶液。

S-1011E 1.5 ml四甲基聯(lián)苯胺（TMB）-H2O2溶液。保持避光。

S-1011F 2×15 ml底物緩沖液（檸檬酸鉀）。

試劑盒在原始包裝中冷藏保存，自交貨之日起穩(wěn)定6個(gè)月。

未提供的物料：停止溶液（1N硫酸，見(jiàn)下文），標(biāo)準(zhǔn)稀釋用的塑料管；移液管和帶有450 nm濾光片的微孔板閱讀器。

準(zhǔn)備事項(xiàng)

嘗試估計(jì)在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中需要的各種溶液的量，并準(zhǔn)備實(shí)際所需的體積。強(qiáng)烈建議對(duì)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行雙重測(cè)試。讓試劑預(yù)熱至室溫，并在使用前立即準(zhǔn)備以下稀釋液：

測(cè)定緩沖液：

用兩部分純化水稀釋濃縮的綠色儲(chǔ)備溶液S-1011D。示例：向15毫升儲(chǔ)備溶液中加入30毫升水。

樣品：

將樣品分裝存放在-20°C或更低溫度下。每個(gè)分裝只使用一次，并在適當(dāng)稀釋的測(cè)定緩沖液（S-1011D）中稀釋。推薦的稀釋比例為：血清或血漿1:100；關(guān)節(jié)液1:100 - 1:10,000；呼出物、唾液、BAL和尿液1:10。

標(biāo)準(zhǔn)品：

輕輕渦旋1000 ng/ml的Calprotectin（MRP8/14）儲(chǔ)備溶液，準(zhǔn)備適當(dāng)稀釋如下。儲(chǔ)備溶液在4° - 8°C下存放時(shí)穩(wěn)定六個(gè)月。

下面的測(cè)試程序使用四個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品，濃度分別為1000、250、62.5和15.63ng/ml，這定義了一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線，適用于大多數(shù)1:100稀釋的正常血清。如有必要，調(diào)整血清稀釋比例以位于曲線的線性部分。

檢測(cè)試劑（S-1011C）：

將試劑S-1011C用測(cè)定緩沖液稀釋至1:400。示例：向10毫升測(cè)定緩沖液中加入25微升。10毫升足夠一個(gè)96孔板使用。

底物稀釋：

在使用前立即準(zhǔn)備。在使用前將底物緩沖液（S-1011F）預(yù)熱至室溫。通過(guò)將20部分底物緩沖液與1部分TMB - H2O2溶液（S-1011E）混合來(lái)準(zhǔn)備稀釋液。這個(gè)稀釋液應(yīng)在準(zhǔn)備后15分鐘內(nèi)使用。

停止溶液：

將硫酸稀釋至1N的濃度。示例：向100毫升水中加入2.9毫升95 - 97%的硫酸（按此順序。不要將水加入酸中）。95 - 97%的濃硫酸（比重1.84）是36N。

BMA Biomedicals是瑞士的一家免疫學(xué)試劑制造商，也是提供免疫化學(xué)物質(zhì)的供應(yīng)商。1989年由免疫學(xué)家、生化學(xué)家和生物學(xué)家創(chuàng)立，主要服務(wù)/產(chǎn)品：?jiǎn)慰寺『投嗫寺】贵w的生產(chǎn)和衍生化的抗體；以及在炎癥、傳染病、止血、腫瘤相關(guān)疾病等，BMA 的主要專長(zhǎng)在于抗體在免疫組織化學(xué)和酶免疫測(cè)定(ELISA)中的應(yīng)用，在免疫學(xué)技術(shù)中的應(yīng)用。BMA 擁有自己的設(shè)施，擁有先進(jìn)的分析和生產(chǎn)基礎(chǔ)設(shè)施。專業(yè)知識(shí)在于單克隆和多克隆抗體的生產(chǎn)和衍生化，以及它們?cè)诿庖呒夹g(shù)中的應(yīng)用。

作為BMA Biomedicals在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BMA Biomedicals產(chǎn)品。