泛素激活酶E1負(fù)責(zé)泛素-蛋白質(zhì)同肽鍵形成的第一步，并且是體外偶聯(lián)反應(yīng)啟動的關(guān)鍵組分。E1通過首先用ATP對泛素的C端甘氨酸羧基進(jìn)行腺苷酸化來激活泛素，然后通過形成高能硫醇酯鍵并釋放游離AMP，將該殘基連接到E1中半胱氨酸殘基的巰基側(cè)鏈部分。E1分子內(nèi)有兩個活性位點(diǎn)，使其能夠同時容納兩個泛素分子，新的泛素形成腺苷酸中間體，因?yàn)榍耙粋€被轉(zhuǎn)移到硫醇位點(diǎn)。然后，活化的泛素通過E2/E3偶聯(lián)級聯(lián)轉(zhuǎn)移到靶蛋白的賴氨酸中。

圖一： 通過考馬斯染色確定產(chǎn)品純度 SDS-PAGE

圖B：用于 E2 偶聯(lián)酶的硫酯測定（TE +ve/-ve 對照）的蛋白質(zhì)印跡。生物素化-泛素-酶偶聯(lián)物通過蛋白質(zhì)印跡法檢測含有：A：UbcH2（產(chǎn)品編號：UbcH9025）。BML-KW8）、B：UbcH9135（KW6），分別采用鏈霉親和素HRP檢測系統(tǒng)。M：生物素化的SDS分子量標(biāo)志物（Sigma，SDS-20B）從底部開始：1.29，0.39，8.58，1.<>kDa。

作為Enzo全國總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Enzo熱銷產(chǎn)品泛素激活酶E1（人），（重組）（His標(biāo)簽）。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

泛素激活酶E1（人），（重組）（His標(biāo)簽）詳情：

分子量：118 千達(dá)

源：在大腸桿菌BL21（λDE3）表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生，含有C端His6標(biāo)簽。全長人泛素激活酶E1。

統(tǒng)一認(rèn)證：P22314

配方：液。在50mM TRIS-HCl中，pH 7.5，含有1.0mM DTT。

純度：≥90% （SDS 頁面）

純度細(xì)節(jié)：通過多步色譜純化。

航運(yùn)：干冰

長期儲存：-80°C

處理：避免凍融循環(huán)。

科學(xué)背景：結(jié)果表明，在所有TE + ve對照反應(yīng)中，普素硫酯連接的E2偶聯(lián)物均形成預(yù)期大小。在TE –ve對照反應(yīng)中缺乏這種偶聯(lián)物表明它們的形成是ATP依賴性的（E1激活所必需的），因此來源于泛素級聯(lián)反應(yīng)。

監(jiān)管狀態(tài)：RUO - 僅供研究使用

部分文獻(xiàn)參考：

Structural basis for HIV-1 antagonism of host APOBEC3G via Cullin E3 ligase: F. Ito, et al.; Sci. Adv. 9, eade3168 (2023), 

Protocol to detect in vitro and in cell ubiquitylation of mitochondrial DNA polymerase gamma by mitochondrial E3 ligase MITOL: M. Hussein, et al.; STAR Protoc. 3, 101710 (2022), 

Redox-sensitive E2 Rad6 controls cellular response to oxidative stress via K63-linked ubiquitination of ribosomes: V. Sim?es, et al.; Cell Rep. 39, 110860 (2022)

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