CD19（也稱為分化簇19、B淋巴細(xì)胞表面抗原B4或CVID3）是在B細(xì)胞成熟的大多數(shù)階段在B淋巴細(xì)胞表面表達(dá)的糖蛋白。它是B細(xì)胞終末分化的嚴(yán)格要求。CD19基因的突變會(huì)導(dǎo)致與受影響的抗體產(chǎn)生相關(guān)的嚴(yán)重免疫缺陷綜合征，如CVID3（常見變量免疫缺陷3）。大多數(shù)B細(xì)胞惡性腫瘤表達(dá)正常至高水平的CD19，使其幾乎成為癌癥免疫療法的理想靶點(diǎn)。Blinatumomab是一種CD19/CD3雙特異性T細(xì)胞接合劑（BiTE），已被批準(zhǔn)用于復(fù)發(fā)/難治性B前體ALL（急性淋巴細(xì)胞白血病），CD19是首個(gè)獲批的CAR-T細(xì)胞療法的靶點(diǎn)。CD19功能和表達(dá)譜的研究將繼續(xù)擴(kuò)大我們的知識(shí)，并支持在癌癥治療中更廣泛的應(yīng)用。

抗CD19 CAR慢病毒是復(fù)制能力不強(qiáng)的、基于HIV的VSV-G假型慢病毒顆粒，可以轉(zhuǎn)導(dǎo)大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞，包括原代細(xì)胞和非分裂細(xì)胞。這些病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)與第二代CAR（嵌合抗原受體）連接的抗CD19（克隆FMC63）的ScFv部分，含有CD8鉸鏈、4-1BB和CD3ζ信號(hào)結(jié)構(gòu)域（圖1）。

圖1. (A) 用于產(chǎn)生抗CD19 CAR慢病毒的慢病毒載體示意圖。這個(gè)載體是一個(gè)自我滅活（SIN）載體。沒有包含任何哺乳動(dòng)物選擇標(biāo)記。 (B) 構(gòu)建圖示顯示了抗CD19 CAR的組成部分。注意：該產(chǎn)品轉(zhuǎn)導(dǎo)了與其他可獲得的抗CD19 CAR慢病毒（BPS Bioscience # 78600, 78602 和 78775）相同的抗CD19 CAR構(gòu)建（CD19 ScFv-CD8-4-1BB-CD3ζ），但在關(guān)鍵方面有所不同。請(qǐng)見圖2。

艾美捷抗CD 19 CAR慢病毒（CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z; SIN載體）（#BPS-78601）應(yīng)用：

作為T細(xì)胞中抗CD19 CAR評(píng)估的陽性對(duì)照。

轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)生抗CD19 CAR-T細(xì)胞（僅限研究使用，不得用于治療目的）。

配方：

慢病毒顆粒由HEK293T細(xì)胞生產(chǎn)、濃縮，并在DMEM中重新懸浮。根據(jù)特殊請(qǐng)求，可以按定制配方包裝病毒顆粒，需額外收費(fèi)。

尺寸和滴度：

每瓶（50 ?l）抗CD19 CAR的滴度≥ 3 x 10^8 轉(zhuǎn)導(dǎo)單位（TU）/ml。每批的滴度會(huì)有所不同；確切的數(shù)值隨每次發(fā)貨提供。

存儲(chǔ)：

慢病毒通過干冰運(yùn)輸。長期存儲(chǔ)建議將病毒存放在-80°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。每次凍融循環(huán)都可能導(dǎo)致滴度顯著下降。

生物安全：

慢病毒是使用第三代自我滅活（SIN）慢病毒載體生產(chǎn)的，確保慢病毒載體在轉(zhuǎn)導(dǎo)和整合到目標(biāo)細(xì)胞的基因組DNA后自我滅活。由于它們來自缺乏包裝信號(hào)的包裝質(zhì)粒，因此轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞中不會(huì)表達(dá)任何HIV基因（gag、pol、rev）。盡管假型慢病毒是復(fù)制能力不足的，但它們需要在生物安全等級(jí)2的設(shè)施中使用。BPS建議遵循所有地方聯(lián)邦、州和機(jī)構(gòu)的規(guī)定，并采取所有適當(dāng)?shù)陌踩A(yù)防措施。

未提供的必需材料：

這些材料不隨慢病毒提供，但必須按照設(shè)計(jì)協(xié)議使用。BPS Bioscience培養(yǎng)基、試劑和熒光素酶檢測(cè)系統(tǒng)都經(jīng)過驗(yàn)證和優(yōu)化，建議使用這些材料以獲得z佳結(jié)果。

抗CD 19 CAR慢病毒（CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z; SIN載體）相關(guān)產(chǎn)品：

Anti-CD19 CAR / NFAT (Luciferase) Reporter Jurkat Cell Line (CD19 SCFV-CD28-4-1BB-CD3ζ)

Anti-CD19 CAR-T Cells

Firefly Luciferase CD19 Knockout Raji Cell Line

CD19 Knockout Raji Cell Line

Firefly Luciferase CD19 Knockout NALM6 Cell Line

ONE-Step? Luciferase Assay System