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Biosensis β淀粉樣蛋白肽(A-β40/42),小鼠單克隆抗體多應用解決方案

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2025-04-17     
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β-淀粉樣蛋白肽來源于淀粉樣前體蛋白(APP)的切割,長度從39到43個氨基酸不等。然而,與阿爾茨海默病(AD)病理特征相關的淀粉樣β肽(Aβ)形式仍不清楚。特別是,細胞內Aβ積累的神經毒性是一個研究和爭議的重要領域,主要是因為被認為特異性識別Aβ的抗體實際上被發(fā)現可以檢測細胞內APP,而不僅僅是Aβ。


β-淀粉樣蛋白肽(A-beta 40/42),小鼠單克隆抗體(未結合),適用于WB、IHC-Frozen、IHC-Paraffin-embedded、ICC、IP、FC、ELISA。


該抗體已在WB中使用純化的合成β-淀粉樣蛋白制劑和轉基因小鼠腦甲酸提取物進行了測試(見圖1)。從提取物中進行WB檢測需要甲酸提取/濃縮。MOAB-2抗體特異性識別β-淀粉樣蛋白,不識別APP。建議WB稀釋比例為1:2000-1:5000,使用標準ECL檢測系統。


為了獲得最佳結果,檢測β-淀粉樣蛋白的組織樣本應按照K.L. Youmans等人在《Journal of Neuroscience Methods》196(2011)51-59中詳細說明的方法準備。在直接WB中檢測β-淀粉樣蛋白40/42可能很困難;建議按照Youmans KL等人2012年的詳細說明使用點印跡法檢測準備好的樣本。


尚未測試紅外或熒光檢測系統,但由于檢測方法的靈敏度增加,預計它們在較高一抗稀釋比例下能很好地工作。


IHC建議稀釋比例為1:50-1:1000。新鮮冷凍、4%多聚甲醛固定冷凍或甲醛固定石蠟包埋組織均適用。最佳稀釋比例必須由最終用戶確定。固定組織需要抗原修復以獲得最佳染色效果。


抗體已在3xTg和5xFAD小鼠的4%多聚甲醛/0.1%戊二醛固定冷凍組織上進行了測試。MOAB-2抗體在IHC中檢測到細胞內和細胞外的β-淀粉樣蛋白,但不檢測APP(Youmans KL等人2012年)。


該抗體還與經過熱誘導表位修復(HIER)的存檔甲醛固定、石蠟包埋組織樣本反應:推薦的檸檬酸鹽,pH 6.0緩沖液用于HIER。沒有抗原修復時信號較弱。免疫反應性在阿爾茨海默氏腦內神經內淀粉樣沉積(斑塊)中表達。MoAB-2被發(fā)現非常干凈,具有極好的信噪比,沒有神經細胞彌散染色。


此外,MOAB-2在使用石蠟固定、自由浮動切片的A-beta檢測中顯示出無顯著差異(Youmans KL等人2012年)。與沒有FA相比,甲酸(FA)處理導致細胞內和細胞外A-beta的最佳檢測(在88% FA中孵育8分鐘,Youmans KL等人2012年)。自由浮動組織切片在含有0.25% Triton X-100的TBS中通透化(TBSX;3次10分鐘),用3%馬血清在TBSX中封閉(3次10分鐘),然后用1%馬血清在TBSX中(2次10分鐘),并在含有1%馬血清的TBSX中與適當的一抗孵育過夜。有關完整的IH(P)協議和方法詳情,請參閱Youmans KL等人2012年的研究。


對于IF,建議稀釋比例為1:100-1:500。抗體已在4% PFA固定冷凍組織上進行了測試。固定組織在TBS中洗滌(3次10分鐘),然后在88% FA中孵育(8分鐘),然后在TBSX中通透化(3次10分鐘),并在含有5%牛血清白蛋白(BSA;1小時)的TBSX中封閉。切片隨后在含有2% BSA的TBSX中與適當的一抗孵育過夜。檢測通過熒光標記的二抗進行(Youmans KL等人2012年)。


對于IP,建議稀釋比例為1:200至1:1000,使用蛋白A/G結合的珠子作為捕獲載體(Youmans KL等人2012年)。


在ELISA中,建議稀釋比例為1:50-1:1000。該抗體已在合成β-淀粉樣蛋白和β-淀粉樣蛋白-Tg小鼠組織勻漿的ELISA中進行了測試。Biosensis建議所有應用的最佳稀釋/濃度應由最終用戶確定。提供的稀釋比例僅作為基本指南。


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作為Biosensis在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強烈推薦Biosensis熱銷產品β淀粉樣蛋白肽(A-β40/42),小鼠單克隆抗體-100ug產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產品名稱貨號詳情

β淀粉樣蛋白肽(A-β40/42),小鼠單克隆抗體-100ug

BSS-M-1586-100查看


β淀粉樣蛋白肽(A-β40/42),小鼠單克隆抗體-100ug:

應用:ELISA、FC、ICC、IHC-Frozen、IHC-Paraffin-embedded、IP、WB

應用詳情:Western Blotting(WB)、免疫組織化學(IHC)、免疫組織化學/石蠟包埋IH(P)、免疫沉淀(IP)、免疫熒光(IF)、ELISA。

目標:β-淀粉樣蛋白肽(A-beta 40/42)

特異性:MOAB-2通過點印跡法檢測富含U-、O-、F-Aβ42和U-Aβ40的制劑,因此是一種泛特異性Aβ抗體。然而,MOAB-2對更具神經毒性的Aβ42比Aβ40更具選擇性。實際上,MOAB-2展示了對抗原濃度的滴定,并在2.5 pmol檢測Aβ40,但在抗原濃度低至約0.1 pmol時檢測U-、O-和FAβb42(Youmans. KL等人2012年)。MOAB-2不檢測APP(淀粉樣前體蛋白)。人類,大鼠,其他物種尚未測試。通過點印跡法,MOAB-2檢測到大鼠Aβ40和人類Aβ40,盡管對Aβ42的親和力較低(Youmans. KL等人2012年)。

目標宿主物種:人類

物種反應性:人類、大鼠

抗體宿主:小鼠

抗體類型:單克隆

抗體亞型:IgG2b,lambda

克隆名稱:MOAB-2

結合物:未結合

免疫原描述:重組人β-淀粉樣蛋白42(Aβ42):DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA

純度描述:本產品是蛋白A純化的小鼠IgG2b,含有0.02 M磷酸鉀、0.15 M氯化鈉、0.01%疊氮化鈉,pH 7.2。

格式:凍干,來自蛋白A純化制劑,含有0.02 M磷酸鉀、0.15 M氯化鈉、0.01%疊氮化鈉、0.1%海藻糖,pH 7.2;含有0.01%疊氮化鈉作為防腐劑。

復溶說明:打開前短暫旋轉小瓶。用100 ?L無菌過濾的超純水復溶。離心去除任何不溶物質。最終緩沖液為0.02 M磷酸鉀、0.15 M氯化鈉、0.01%疊氮化鈉、0.1%海藻糖,pH 7.2。

儲存說明:復溶后,將分裝在-20 °至-70°C保存以獲得更高的穩(wěn)定性。在2-8°C下可保存一周,保溫,避光;使用無菌方法和移液器。可添加高純度甘油(1:1)以增加穩(wěn)定性。避免重復凍融循環(huán)。不使用時請緊閉并避光保存。

批號:請參見物品標簽。

有效期:自收到之日起12個月(未開封小瓶)。

替代名稱:Beta-APP42;Beta-APP40;β-淀粉樣蛋白42;β-淀粉樣蛋白40;ABPP;APPI;淀粉樣βA4蛋白;MOAB2;MOAB-2;阿爾茨海默氏抗體;AB40;AB42;abeta


產品圖片:

剪接因子3B亞基4(SF3B4),小鼠單克隆抗體-100ug:

從12個月大的5xFAD小鼠身上采集皮質和海馬的組合樣本。使用Youmans,Molecular Neurodegeneration,2012中所述的標準蛋白質印跡程序分析1.25-25mg FA提取物。MOAB-2的濃度為1?g/mL。

提取方案:如Youmans等人,J Neurosci Methods,2011所述,修改了3步順序提取。修改涉及在步驟3中使用較少體積的甲酸(FA),以獲得更濃縮的提取。因此,添加70%的FA至600mg/mL的濃度,而不是Youmans等人所述的150mg/mL。中和甲酸提取物的最終蛋白質濃度為0.9mg/mL


文獻參考:

Liang C et al. (2025) “Mannose Promotes BB-Amyloid Pathology by Regulating BACE1 Glycosylation in Alzheimer’s Disease” Adv Sci (Weigh) 2025 Jan 14:e2409105. doi:10.1016/j.neuropharm.2025.110300 Online ahead of print . Application: IHC. Species: Mice

Malik N et al. (2024) Regional AT 8 reactive tau species correlate with intracellular AB levels in cased of low AD neuropathology change  Acta Neuropathology. 147(1):40 Application: Human IHC

Nu?ez?Diaz C et al. (2024) The fuorescent ligand bTVBT2 reveals increased p?tau uptake by retinal microglia in Alzheimer’s disease patients and AppNL?F/NL?F mice Alzheimers Res Ther. 16:4 Application: IHC.


Biosensis專注于神經科學領域的抗體和試劑的開發(fā),特別是神經營養(yǎng)因子和神經營養(yǎng)因子受體。除神經營養(yǎng)因子,我們的神經科學產品組合還被廣泛用于神經退行性疾病、神經發(fā)育和神經代謝的研究。重點研究領域包括阿爾茨海默氏癥(AD)、帕金森氏癥(PD)和肌萎縮側索硬化(ALS)疾病,以及自噬和代謝應激障礙,包括肥胖、代謝綜合征的研究、神經免疫學和炎癥。


作為Biosensis在中國區(qū)域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的Biosensis產品。


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