Bovine lgA ELISA試劑盒是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫測(cè)定法（ELISA），用于測(cè)量牛生物樣品中的IgA。如果ELISA在預(yù)期用途之外使用，用戶可能需要對(duì)所述用途進(jìn)行優(yōu)化。

僅用于研究。非診斷用途。僅限體外使用。

當(dāng)按照包裝內(nèi)說(shuō)明書中的信息完全理解并遵循實(shí)驗(yàn)程序，以及遵守良好的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范時(shí)，將獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果。可能影響實(shí)驗(yàn)性能的因素包括儀器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質(zhì)量、試劑和樣品移液的準(zhǔn)確性、洗滌技術(shù)、孵化時(shí)間和溫度。不要將不同批次或來(lái)源的試劑混合或替換使用。

艾美捷Bovine lgA ELISA試劑盒（E-10A）組件：

試劑盒及其組件的有效期標(biāo)注在盒標(biāo)簽上。如果按照本試劑盒的協(xié)議插入說(shuō)明進(jìn)行存儲(chǔ)和使用，所有組件都應(yīng)保持穩(wěn)定直至有效期。

Bovine lgA ELISA樣本收集和處理：

所有血液成分和生物材料應(yīng)被視為潛在的危險(xiǎn)物質(zhì)進(jìn)行處理。在處理和處置時(shí)遵循通用預(yù)防措施。如果血液樣本出現(xiàn)凝固、明顯溶血、脂血，或者樣本的完整性受到懷疑，請(qǐng)做記錄并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。

下面列出的樣本收集和儲(chǔ)存條件旨在作為一般指南。樣本的穩(wěn)定性尚未評(píng)估。

血清樣本：應(yīng)通過(guò)靜脈穿刺采集血液。血液凝固后，應(yīng)通過(guò)離心分離血清。取出血清后立即檢測(cè)，或分裝并儲(chǔ)存于-80°C（Z好）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

血漿樣本：Z應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進(jìn)行離心。立即檢測(cè)或分裝并儲(chǔ)存于-80°C（好）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

尿液樣本：使用無(wú)菌或清潔的尿液收集器收集中段尿液。離心以去除細(xì)胞碎片。立即檢測(cè)或分裝并儲(chǔ)存于-80°C（Z好）或-20°C。避免反復(fù)凍融。

已知干擾物質(zhì)：高于0.1%濃度的疊氮化物和硫柳汞會(huì)抑制酶反應(yīng)。

Bovine lgA ELISA檢測(cè)程序：

1. 所有樣本和標(biāo)準(zhǔn)品都應(yīng)以雙份進(jìn)行檢測(cè)。

2. 應(yīng)盡快將標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本（s）裝入ELISA孔中，以避免吸光度（OD）讀數(shù)的偏移。使用多通道移液管可以減少這種情況的發(fā)生。將以下標(biāo)準(zhǔn)品和樣本以雙份移液至孔中：

標(biāo)準(zhǔn)品0（0.0 ng/mL）雙份

標(biāo)準(zhǔn)品1（6.25 ng/mL）雙份

標(biāo)準(zhǔn)品2（12.50 ng/mL）雙份

標(biāo)準(zhǔn)品3（25 ng/mL）雙份

標(biāo)準(zhǔn)品4（50 ng/mL）雙份

標(biāo)準(zhǔn)品5（100 ng/mL）雙份

標(biāo)準(zhǔn)品6（200 ng/mL）雙份

標(biāo)準(zhǔn)品7（400 ng/mL）雙份

3. 將100 μL的樣本（雙份）移液至預(yù)先指定的孔中。

4. 將微孔板在室溫下孵育六十（60 ± 2）分鐘。孵育期間保持板蓋覆蓋并保持水平。

5. 孵育后，吸去孔中的內(nèi)容物。

6. 用適當(dāng)稀釋的洗滌液完全填充每個(gè)孔，然后吸去。重復(fù)三次，總共進(jìn)行四次洗滌。如果手動(dòng)洗滌：用洗滌緩沖液完全填充孔，然后將板倒置，將內(nèi)容物倒入或搖晃進(jìn)廢液容器中。接著用力敲擊孔以吸收紙上去除殘留的緩沖液。重復(fù)三次，總共進(jìn)行四次洗滌。

7. 將100 μL適當(dāng)稀釋的酶-抗體結(jié)合物移液至每個(gè)孔中。在室溫下暗處孵育二十（20 ± 2）分鐘。孵育期間保持板蓋覆蓋并保持水平。

8. 如步驟5/6所述洗滌并吸干孔中的內(nèi)容物。

9. 將100 μL的TMB底物溶液移液至每個(gè)孔中。

10. 在暗處室溫下精確孵育十分鐘（10）。

11. 十分鐘后，向每個(gè)孔中添加100 μL的終止溶液。

12. 在30分鐘內(nèi)測(cè)定每個(gè)孔中內(nèi)容物的吸光度（450 nm）。根據(jù)制造商的規(guī)格校準(zhǔn)板式讀取器。