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T7 RNA 聚合酶是一種依賴 DNA 的 RNA 聚合酶,其對(duì)噬菌體 T7 啟動(dòng)子序列有高特異性。該酶從 T7 啟動(dòng)子插入到轉(zhuǎn)錄載體下游的 DNA 上合成大量 RNA。可獲取 T7 RNA 聚合酶技術(shù)公告。
應(yīng)用:標(biāo)記和未標(biāo)記的 RNA 轉(zhuǎn)錄本的合成。
來(lái)源:從在質(zhì)粒上表達(dá) T7 RNA 聚合酶基因的大腸桿菌純化獲得。
性能和質(zhì)量檢驗(yàn):3? 和 5? 脫氧核糖核酸外切酶、核糖核酸酶和 DNA 缺口檢測(cè);
轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中的性能。
T7 RNA聚合酶類(lèi)型:
常規(guī)型和耐熱型。常規(guī)型T7 RNA聚合酶可在37℃對(duì)模板進(jìn)行高效體外轉(zhuǎn)錄,而耐熱型T7 RNA聚合酶可在更高的溫度下進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄。基于此耐熱的體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)特性具有以下優(yōu)勢(shì):
1.提升了GC含量較高RNA的轉(zhuǎn)錄效率;
2.提升了長(zhǎng)片段RNA的合成能力;
3.在使用帽類(lèi)似物時(shí),提高了共轉(zhuǎn)錄的加帽效率;
4.減少了dsRNA 副產(chǎn)物的形成,降低了合成RNA的免疫原性。
艾美捷T7 RNA聚合酶:
英文名字:T7 RNA Polymerase
貨號(hào):C-BSM0124
規(guī)格:5000 U / 25000 U
組成:T7 RNA Polymerase (50 U/μl)/10×T7 RNA Polymerase Buffer
純度:SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果大于95%。
核內(nèi)殘留物:將20 U T7 RNA聚合酶與超螺旋質(zhì)粒DNA在37°C下孵育4小時(shí),DNA電泳未檢測(cè)到質(zhì)粒的變化
殘留DNA酶:將T7 RNA聚合酶與雙鏈DNA在37°C下孵育16小時(shí),DNA電泳未檢測(cè)到DNA變化。
RNase殘基:將T7 RNA聚合酶與RNA在37°C下孵育1小時(shí),電泳中未檢測(cè)到RNA降解
T7 RNA聚合酶適用范圍:
1. 合成單鏈 RNA,包括 mRNA,siRNA,gRNA 等各類(lèi) RNA 的前體。
2. 合成標(biāo)記或未標(biāo)記的高特異性 RNA 探針。
3. 利用帽子類(lèi)似物合成加帽的 mRNA。
推薦的反應(yīng)條件:
在37°C下培養(yǎng)1小時(shí)。如果轉(zhuǎn)錄物長(zhǎng)度小于300nt,反應(yīng)時(shí)間可以延長(zhǎng)至2-16小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后,在上述20μl反應(yīng)混合物中加入1μl雙脫氧核糖核酸酶,并在37°C下孵育15分鐘以移動(dòng)DNA模板
Biogradetech是生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商:Biogradetech成立于2015年,總部位于美國(guó)加利福尼亞州,早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家,逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線,并將其商業(yè)化銷(xiāo)售,包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。
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