快速內(nèi)切酶，可在5~15 min內(nèi)完成反應(yīng)，最適反應(yīng)溫度為37℃，受CpG甲基化影響，序列完全重疊，剪切受阻，失活條件為80℃溫育20 min，3 h溫育未表現(xiàn)星號(hào)活性，延時(shí)酶切可能出現(xiàn)星號(hào)活性。

艾美捷快速內(nèi)切酶XhoI：

Cat #: C-BSM583

Size: 500 rxns

Storage: -20°C

快速內(nèi)切酶XhoI組成：

Components Amount

FlyCut?"  Xhol 500μl

10x CutOne' Buffer 3x1 ml

10x CutOne' Color Buffer 3×1 ml

使用方法：

1.快速DNA消化方案

①將以下反應(yīng)組分按所示順序在冰上混合：

對(duì)于純化的PCR產(chǎn)物。如果PCR產(chǎn)物未純化，則10×CutOne的量? 緩沖液應(yīng)減少到2μl，以減少未純化的PCR產(chǎn)物中剩余的金屬離子。我們建議在消化用于克隆之前純化PCR產(chǎn)物，因?yàn)橐恍〥NA聚合酶的核酸外切酶活性可能會(huì)改變切割DNA的末端。

②輕輕攪拌并向下旋轉(zhuǎn)；

③在37°C下培養(yǎng)15分鐘（質(zhì)粒DNA）或15～30分鐘（PCR產(chǎn)物）或30～60分鐘（基因組DNA）；

④ 可選：在80°C下加熱20分鐘使酶失活；

⑤如果CutOne? 在反應(yīng)中使用顏色緩沖液，將反應(yīng)混合物的等分試樣直接裝入凝膠中。

2.DNA的雙重和多重消化

① 使用每種酶1μl，并適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)條件；

② 反應(yīng)混合物中酶的總體積不應(yīng)超過總反應(yīng)體積的1/10；

③如果酶需要不同的反應(yīng)溫度，從需要較低溫度的酶開始，然后加入第二種酶并在較高溫度下孵育。

3.擴(kuò)大質(zhì)粒DNA消化反應(yīng)

Biogradetech全球生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。