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在先天免疫研究領(lǐng)域,環(huán)二核苷酸(CDN)作為介導(dǎo)宿主對(duì)抗病原體入侵的關(guān)鍵第二信使,其功能解析與精準(zhǔn)定量是揭示免疫信號(hào)通路機(jī)制的核心環(huán)節(jié)。3’2’- 環(huán)鳥苷酸 - 腺苷酸(3’2’-cGAMP)作為一類具有物種特異性的 CDN 分子,在果蠅抗病毒免疫和細(xì)菌抗噬菌體防御中扮演著不可替代的角色。然而,傳統(tǒng)檢測(cè)方法的局限性長(zhǎng)期制約著相關(guān)研究的推進(jìn)。Cayman Chemical 與 Biolog Life Science Institute 聯(lián)合打造的 3’2’-cGAMP ELISA Kit(貨號(hào) 502340),以其高靈敏度、高特異性和便捷性,為該領(lǐng)域研究提供了突破性解決方案,重塑了 CDN 檢測(cè)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。
一、研究背景
先天免疫是生物抵御病原體入侵的第一道防線,而 CDN 介導(dǎo)的信號(hào)通路是先天免疫激活的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,DNA 病毒感染會(huì)誘導(dǎo)環(huán)鳥苷酸 - 腺苷酸合成酶(cGAS)識(shí)別胞質(zhì) DNA,進(jìn)而產(chǎn)生 2’3’-cGAMP,該分子結(jié)合并激活干擾素基因刺激蛋白(STING),最終啟動(dòng)先天免疫反應(yīng)。但在果蠅中,免疫信號(hào)通路呈現(xiàn)出獨(dú)特的特異性:應(yīng)對(duì) RNA 和 DNA 病毒感染時(shí),主要產(chǎn)生的 CDN 分子是 3’2’-cGAMP,而非哺乳動(dòng)物中的 2’3’-cGAMP。這種分子由先天免疫傳感器 cGAS 樣受體 1(cGLR1,識(shí)別外源雙鏈 RNA)和 cGLR2(配體尚未明確,同時(shí)可合成 2’3’-cGAMP)合成,通過結(jié)合果蠅 STING(dSTING),誘導(dǎo) STING 及下游 STING 調(diào)控基因(Srg)的表達(dá),最終降低病毒載量并提升果蠅存活率。
在細(xì)菌中,3’2’-cGAMP 的功能同樣關(guān)鍵。它作為 CBASS 系統(tǒng)的核心第二信使,由 cGAS/DncV 樣核苷酸轉(zhuǎn)移酶(CD-NTase)家族中的 AsCdnG 合成,隨后激活效應(yīng)蛋白 AsCap5 降解噬菌體 DNA,從而實(shí)現(xiàn)細(xì)菌對(duì)噬菌體的防御。然而,由于 3’2’-cGAMP 在生物樣本中濃度極低,且易與 2’3’-cGAMP、環(huán)二 GMP、環(huán)二 AMP 等結(jié)構(gòu)相似的 CDN 分子發(fā)生交叉干擾,傳統(tǒng)檢測(cè)方法面臨諸多挑戰(zhàn)。質(zhì)譜法雖能實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)檢測(cè),但設(shè)備成本高昂、操作流程復(fù)雜、檢測(cè)周期長(zhǎng),難以滿足常規(guī)實(shí)驗(yàn)室的高通量檢測(cè)需求。
Cayman 新型 3’2’-cGAMP ELISA Kit 的推出,正是針對(duì)這一研究痛點(diǎn)。該試劑盒專為果蠅勻漿和細(xì)菌裂解物樣本設(shè)計(jì),通過競(jìng)爭(zhēng)性 ELISA 技術(shù),實(shí)現(xiàn)對(duì) 3’2’-cGAMP 的高靈敏度、高特異性定量檢測(cè),不僅操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)快速,且成本遠(yuǎn)低于質(zhì)譜法,為 CDN 介導(dǎo)的抗病毒免疫和細(xì)菌抗噬菌體防御研究提供了強(qiáng)有力的工具支持。
二、3'2'-cGAMP ELISA Kit(CAY-502340) 產(chǎn)品核心性能與檢測(cè)原理
靈敏度相關(guān) | — |
檢測(cè)范圍 | 7.8-1000 皮摩爾(5.3-674.4 皮克 / 毫升) |
靈敏度(80% B/B?) | 15 皮摩爾(10.1 皮克 / 毫升) |
最低檢測(cè)限(LLOD) | 4.0 皮摩爾(2.7 皮克 / 毫升) |
樣本類型 | 果蠅勻漿和細(xì)菌裂解液 |
運(yùn)行時(shí)間 | 3 小時(shí)以內(nèi) |
讀數(shù)方式 | 比色法(吸光度 = 450 納米) |
樣本容量 | 24 個(gè)樣本做三次重復(fù),或 36 個(gè)樣本做兩次重復(fù) |
(一)關(guān)鍵性能指標(biāo)
·靈敏度高:檢測(cè)下限低至4.0 pM,15 pM就能穩(wěn)定檢出,生物樣本里的微量目標(biāo)也跑不了
·范圍寬:7.8-1000 pM的線性范圍,覆蓋生理濃度,不用反復(fù)稀釋樣本
·特異性強(qiáng):與2’3’-cGAMP、環(huán)二GMP等相似分子的交叉反應(yīng)率低于0.0001%,避免假陽性。
化合物 | 交叉反應(yīng)性 |
3'2'-cGAMP | 100% |
2'2'-cGAMP | 0.27% |
3'3'-cGAMP | 0.0009% |
2'3'-cGAMP | 0.0006% |
pApG | 0.0004% |
環(huán)二鳥苷酸(Cyclic di-GMP) | 0.0001% |
三磷酸腺苷(ATP) | <0.0001% |
三磷酸鳥苷(GTP) | <0.0001% |
一磷酸腺苷(AMP) | <0.0001% |
一磷酸鳥苷(GMP) | <0.0001% |
環(huán)磷酸腺苷(cAMP) | <0.0001% |
環(huán)磷酸鳥苷(cGMP) | <0.0001% |
環(huán)二腺苷酸(Cyclic di-AMP) | <0.0001% |
(二)檢測(cè)原理
試劑盒預(yù)包被IgG抗體,您的樣本與酶標(biāo)3’2’-cGAMP競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合抗體。樣本中目標(biāo)物越多,結(jié)合到板上的酶標(biāo)物就越少,最終顯色信號(hào)與濃度呈負(fù)相關(guān)。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線即可算出準(zhǔn)確濃度。

三、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)與配套生態(tài)
做科研,工具配套很重要。Cayman圍繞CDN研究構(gòu)建了一整套解決方案:
·標(biāo)準(zhǔn)品與對(duì)照:3’2’-cGAMP純品、陰性對(duì)照,方便校準(zhǔn)和驗(yàn)證
·通路研究工具:cGAS、STING等關(guān)鍵蛋白的抑制劑/激活劑,幫您解析信號(hào)通路
·多分子檢測(cè):同時(shí)提供2’3’-cGAMP、環(huán)二GMP等多種CDN檢測(cè)試劑盒,滿足比較研究需求
從"檢測(cè)一個(gè)分子"到"解析整條通路",從"機(jī)制研究"到"藥物篩選",我們都能提供支持。
四、應(yīng)用場(chǎng)景與科研價(jià)值
該 3’2’-cGAMP ELISA Kit 憑借其優(yōu)異的性能和配套的產(chǎn)品生態(tài),在多個(gè)研究領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值:
在果蠅抗病毒免疫研究中,可用于定量檢測(cè)病毒感染前后果蠅勻漿中 3’2’-cGAMP 的濃度變化,明確 cGLR1、cGLR2 等受體的激活機(jī)制,以及 3’2’-cGAMP-dSTING 通路對(duì)病毒復(fù)制的抑制作用,為昆蟲先天免疫機(jī)制研究提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持。
在細(xì)菌抗噬菌體防御研究中,能夠精準(zhǔn)量化 CBASS 系統(tǒng)激活后細(xì)菌裂解物中 3’2’-cGAMP 的水平,助力解析 AsCdnG-Cap5 等抗噬菌體通路的分子機(jī)制,為開發(fā)新型抗菌藥物或噬菌體療法提供理論基礎(chǔ)。
在 CDN 分子功能比較研究中,結(jié)合 Cayman 的 2’3’-cGAMP、環(huán)二 GMP 等其他 CDN 檢測(cè)試劑盒,可同時(shí)分析不同 CDN 分子在病原體感染、免疫激活過程中的動(dòng)態(tài)變化,揭示不同 CDN 分子的功能特異性和協(xié)同作用。此外,該試劑盒還可用于篩選調(diào)控 3’2’-cGAMP 合成或代謝的小分子化合物,為開發(fā)新型抗病毒、抗菌藥物提供篩選工具,具有重要的轉(zhuǎn)化應(yīng)用價(jià)值。
五、品牌支持與服務(wù)保障
Cayman Chemical 作為全球知名的生物試劑供應(yīng)商,始終專注于為科研人員提供高質(zhì)量的檢測(cè)試劑和研究工具,尤其在 CDN 與免疫信號(hào)通路研究領(lǐng)域,憑借深厚的技術(shù)積累和嚴(yán)格的質(zhì)量控制,成為科研人員信賴的合作伙伴。其定位為 “Cayman Chemical:深耕 CDN 與先天免疫研究,提供高特異性定量檢測(cè)解決方案”。
艾美捷科技作為 Cayman Chemical 中國(guó)區(qū)總代理,始終致力于為中國(guó)科研人員搭建通往全球優(yōu)質(zhì)研究工具的橋梁。艾美捷科技:讓世界級(jí)研究工具,觸手可及!低成本,智啟高效創(chuàng)新!我們將為國(guó)內(nèi)用戶提供 3’2’-cGAMP ELISA Kit 及 Cayman 全系列 CDN 相關(guān)產(chǎn)品的咨詢、采購(gòu)、技術(shù)支持等一站式服務(wù),助力科研人員高效推進(jìn)相關(guān)領(lǐng)域研究,加速科研成果轉(zhuǎn)化。
無論是基礎(chǔ)科研中的機(jī)制解析,還是應(yīng)用研究中的藥物篩選,3’2’-cGAMP ELISA Kit 都將以其精準(zhǔn)、高效、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)勢(shì),成為 CDN 相關(guān)研究的得力助手,推動(dòng)抗病毒免疫與細(xì)菌防御領(lǐng)域的研究不斷取得新突破。如需了解更多產(chǎn)品詳情或咨詢相關(guān)服務(wù),歡迎聯(lián)系艾美捷科技獲取專業(yè)支持。
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