使用苯乙烯/馬來酸共聚物穩(wěn)定膜蛋白的方法最初由Knowles及其同事描述（1）。這些共聚物可以在沒有表面活性劑的情況下，將膜蛋白與天然膜中的雙層脂質(zhì)包裹在一起，形成類似盤狀的粒子或納米盤。基于HEPES的SMALP產(chǎn)品含有共聚物和50 mM HEPES緩沖液，調(diào)整至pH 7.5，因此只需添加雙蒸餾水即可直接應(yīng)用。所選的pH值非常有效地用于蛋白質(zhì)的溶解。來自Cube Biotech的SMALP 200是一種高度純化的苯乙烯和馬來酸（SMA）共聚物，分子量（Mw）為6,500。溶解后，共聚物的濃度為1.5至6.0％，當(dāng)加入到膜蛋白中時(shí)，會(huì)導(dǎo)致高濃度。共聚物提供了一個(gè)面向脂質(zhì)的疏水表面，以及一個(gè)外部的親水表面。這種設(shè)置使納米盤在水溶液中高度溶解，并允許在沒有表面活性劑的情況下溶解膜蛋白。該產(chǎn)品可與磷脂一起使用，例如二十二碳二酸二亞麻酰甘油磷膽堿（DMPC）或棕櫚酰亞油酰磷脂酰膽堿（POPC），結(jié)合十二烷基磺酸鈉。SMA和膜蛋白的復(fù)合物可以與許多生物物理學(xué)分析方法一起使用，例如SDS-PAGE、SEC、Western Blot、UV/Vis光譜和許多色譜過程。共聚物溶液的再組裝Cube SMA共聚物從含有50 mM HEPES、pH 7.5的溶液中凍干交付。每個(gè)小份含有50毫克蛋白質(zhì)。加入0.5毫升雙蒸餾水將恢復(fù)原始溶液，共聚物濃度為10％。根據(jù)不同的應(yīng)用協(xié)議，此儲(chǔ)備液可以進(jìn)一步稀釋。

作為Cube Biotech在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦SMALP 200 1 g。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

技術(shù)細(xì)節(jié)

名稱：苯乙烯馬來酸共聚物、鈉鹽/SMA/SMALP 200，50 mM HEPES，pH 7.5吸光度（280 nm，1% 溶液）：大于0.3

分子量：6,500 g/mol

S:MA比例：2.3:1

溶解度：大于10%（H2O）

顏色：微黃

氣味：無味

pH值（溶解后）：7.5 ± 0.1

運(yùn)輸和儲(chǔ)存運(yùn)輸溫度：常溫凍干

共聚物的儲(chǔ)存：-20°C，可保存數(shù)年

溶解共聚物的儲(chǔ)存：2-8°C，可保存數(shù)天

文獻(xiàn)參考：

1. Knowles, T. J., Finka, R., Smith, C., Lin, Y.-P., Dafforn, T., & Overduin, M. (2009). Membrane Proteins Solubilized Intact in LipidContaining Nanoparticles Bounded by Styrene Maleic Acid Copolymer. Journal of the American Chemical Society, 131(22),7484–7485. doi:10.1021/ja810046q .

2. Lee, S. C., Knowles, T. J., Postis, V. L. G., Jamshad, M., Parslow, R. A., Lin, Y., … Dafforn, T. R. (2016). A method for detergent-freeisolation of membrane proteins in their local lipid environment. Nature Protocols, 11(7), 1149–1162. doi:10.1038/nprot.2016.070

Cube Biotech 是一家專注于蛋白純化產(chǎn)品的德國生產(chǎn)商，尤其擅長(zhǎng)蛋白純化及膜蛋白純化。Cube Biotech 研發(fā)團(tuán)隊(duì)擁有近50年經(jīng)驗(yàn)在膜蛋白的表達(dá)、純化和結(jié)晶等研究，為制藥和生物技術(shù)行業(yè)以及學(xué)術(shù)環(huán)境提供這些經(jīng)驗(yàn)。膜蛋白的結(jié)構(gòu)分析仍是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)，尤其是關(guān)于人源膜蛋白。德國 Cube Biotech 為研究和進(jìn)步釋放膜蛋白的力量，以團(tuán)隊(duì)所有科學(xué)專業(yè)知識(shí)支持制藥和生物技術(shù)界。通過運(yùn)用前沿科學(xué)技術(shù)，德國 Cube Biotech 提供的系列產(chǎn)品解決膜蛋白質(zhì)純化和穩(wěn)定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白質(zhì)親和層析填料和蛋白質(zhì)穩(wěn)定化的高品質(zhì)產(chǎn)品，產(chǎn)品的配套試劑包括去污劑、無細(xì)胞表達(dá)裂解物、納米盤支架蛋白和膜蛋白結(jié)晶板。

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