將苯乙烯/丙烯酸共聚物用于穩(wěn)定膜蛋白的方法最初由Smith及其同事（1）描述。這些共聚物可以在沒有清潔劑的情況下，將膜蛋白與天然膜結(jié)合，包裹在脂質(zhì)雙層的一個區(qū)域周圍，形成類似盤狀或納米盤的結(jié)構(gòu)。基于HEPES的AASTY產(chǎn)品含有共聚物和50 mM HEPES緩沖液，調(diào)節(jié)至pH 7.5，因此只需添加雙蒸餾水即可直接應(yīng)用。所選的pH值非常有效用于蛋白質(zhì)的溶解。來自Cube Biotech的AASTY 11-50是一種高純度的苯乙烯和丙烯酸共聚物，分子量（Mw）為5.500。在溶解后，共聚物的濃度在1.5%至6.0%之間，當(dāng)添加到膜蛋白中時會導(dǎo)致高濃度。共聚物提供一個面向脂質(zhì)的疏水表面，以及一個外部的親水表面。這種設(shè)置使納米盤在水溶液中高度溶解，并允許在沒有清潔劑的情況下溶解膜蛋白。該產(chǎn)品可以與磷脂一起使用，如二十二碳二酰基甘油磷膽堿（DMPC）或棕櫚酰油酰基磷脂酰膽堿（POPC），結(jié)合十二烷基磺酸鈉。AASTY和膜蛋白的復(fù)合物可與許多生物物理學(xué)分析方法一起使用，如SDS-PAGE、SEC、Western Blot、UV/Vis光譜和許多色譜過程。共聚物溶液的重組Cube AASTY共聚物經(jīng)過凍干處理，含有50 mM HEPES，pH 7.5的溶液。每份含50毫克聚合物或1克。每50毫克聚合物添加0.5毫升雙蒸餾水，將恢復(fù)具有10%共聚物濃度的原始溶液。根據(jù)不同的應(yīng)用協(xié)議，這種儲備可以進一步稀釋。

作為Cube Biotech在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦AASTY 11-50，10x50 mg。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

技術(shù)細(xì)節(jié)

名稱：苯乙烯丙烯酸共聚物，鈉鹽，50 mM HEPES，pH 7.5

吸光度（280 nm，1%溶液）：> 0.1

AA/STY比例：50:50

溶解性：> 10%（H2O）

緩沖液：HEPES

雙價陽離子耐受性：6 mM

pH值（溶解后）：7.5 ± 0.3

分子量：10,000 - 11,000克/摩爾

運輸和儲存

運輸溫度：常溫

凍干共聚物儲存：-20°C，可保存數(shù)年

溶解共聚物儲存：2-8°C，可保存數(shù)天

對于從稀釋溶液中純化帶有His標(biāo)簽的蛋白質(zhì)，我們建議使用PureCube Ni-NTAMagBeads。對于GST標(biāo)記的、Rho1d4標(biāo)記的或Strep?標(biāo)記的蛋白質(zhì)的親和純化，Cube Biotech提供專用瓊脂糖樹脂、磁珠和預(yù)裝載的柱。

文獻(xiàn)參考：

1. Anton A.A. Smith, Henriette E. Autzen, Bryan Faust, Joseph L. Mann, Benjamin W. Muir, Shaun Howard, AlmarPostma, Andrew J. Spakowitz, Yifan Cheng, and Eric A. Appel; Lipid Nanodiscs via Ordered Copolymers Chem 6,2782–2795, October 8, 2020.

2. M Timcenko, AAA Autzen, HE Autzen Characterization of divalent cation interactions with AASTY nativenanodiscs. Biorxiv, doi: https://doi.org/10.1101/2021.10.07.463511

Cube Biotech 是一家專注于蛋白純化產(chǎn)品的德國生產(chǎn)商，尤其擅長蛋白純化及膜蛋白純化。Cube Biotech 研發(fā)團隊擁有近50年經(jīng)驗在膜蛋白的表達(dá)、純化和結(jié)晶等研究，為制藥和生物技術(shù)行業(yè)以及學(xué)術(shù)環(huán)境提供這些經(jīng)驗。膜蛋白的結(jié)構(gòu)分析仍是一個巨大的挑戰(zhàn)，尤其是關(guān)于人源膜蛋白。德國 Cube Biotech 為研究和進步釋放膜蛋白的力量，以團隊所有科學(xué)專業(yè)知識支持制藥和生物技術(shù)界。通過運用前沿科學(xué)技術(shù)，德國 Cube Biotech 提供的系列產(chǎn)品解決膜蛋白質(zhì)純化和穩(wěn)定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白質(zhì)親和層析填料和蛋白質(zhì)穩(wěn)定化的高品質(zhì)產(chǎn)品，產(chǎn)品的配套試劑包括去污劑、無細(xì)胞表達(dá)裂解物、納米盤支架蛋白和膜蛋白結(jié)晶板。

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